Electrospray ionization (ESI)-mass

Electrospray ionization (ESI)-mass spectrometry (MS)
can provide information on protein−ligand interactions via detection of
the corresponding complexes as gaseous ions. Unfortunately, some
systems are prone to dissociation upon transfer into the gas phase. The
reversible oxygen binding to hemoglobin (Hb) has been extensively
studied in solution using a wide range of biophysical techniques. In
addition to O2, ferrous (FeII) Hb can bind CO. High affinity interactions
with CN− are limited to the ferric (FeIII) state. In analogous fashion,
CN−, CO, and O2 bind to myoglobin (Mb). It remains unclear whether
any of these ligand-bound forms can be observed by ESI-MS. In this
work we demonstrate the successful detection of MbCN, while MbCO
and MbO2 do not survive under ESI-MS conditions. Control experiments suggest that an older report of “MbO2“ detection by
ESI-MS may involve the misassignment of oxidation artifacts formed under corona discharge conditions. The situation is more
favorable for ESI-MS studies on Hb. The most intense signal in the HbCN mass distribution corresponds to the expected
complex with four cyanide moieties bound. Ligand loss during ESI-MS is around 20%. HbCO is detectable as well, albeit with a
more noticeable level of ligand dissociation (∼50%) which produces the 2CO-bound state as the highest intensity ion in the
spectrum. In addition, our data suggest that low levels of HbO2 can survive the transition into the gas phase, evident from +64 Da
and +128 Da signals that can be assigned to Hb carrying two and four oxygen molecules, respectively. The application of
collisional activation induces neutral ligand loss for all three Hb derivatives. It appears that this is the first report on the detection
of MbCN, HbCO, and HbO2 in the gas phase. We hope that this work will pave the way towards future spectroscopic
investigations of desolvated Mb and Hb, complementing the extensive literature on CN−, CO, and O2 bound globins in the
condensed phase.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีพ่นละอองไฟฟ้า ionization (ESI) -โตรเมทรี (MS)สามารถให้ข้อมูลเกี่ยวกับ protein−ligand การโต้ตอบผ่านการตรวจสอบคอมเพล็กซ์ที่สอดคล้องกันเป็นกันเป็นต้น อับ บางระบบมีแนวโน้มที่ dissociation เมื่อโอนย้ายไปเฟสแก๊ส ที่ออกซิเจนกลับผูกกับฮีโมโกลบิน (Hb) ดำเนินได้อย่างกว้างขวางศึกษาในโซลูชันที่ใช้เทคนิค biophysical หลากหลาย ในนี้ O2 เหล็ก (FeII) Hb สามารถผูกการโต้ตอบความสัมพันธ์สูงจำกัดมี CN− มีจำกัดการเฟอร์ (FeIII) แฟชั่นคู่CN−, CO และ O2 ผูกไมโยโกลบิน (Mb) มันยังคงไม่ชัดเจนว่าสามารถตรวจสอบฟอร์มใด ๆ เหล่านี้ผูกกับลิแกนด์ โดย ESI MS ในที่นี้งานที่เราแสดงให้เห็นถึงการตรวจพบ MbCN ในขณะที่ MbCO ประสบความสำเร็จและ MbO2 ไม่อยู่รอดภายใต้เงื่อนไข ESI MS แนะนำการทดลองควบคุมที่มีรายงานเก่าของ "MbO2" การตรวจสอบโดยESI MS อาจเกี่ยวข้องกับ misassignment สิ่งประดิษฐ์เกิดออกซิเดชันที่เกิดขึ้นภายใต้เงื่อนไขปรากฏการณ์ สถานการณ์คือเพิ่มเติมดีสำหรับศึกษา ESI MS Hb สัญญาณที่รุนแรงที่สุดในการกระจายมวล HbCN สอดคล้องกับที่คาดไว้เชิงซ้อนกับ 4 ไซยาไนด์ moieties ผูก ลิแกนด์สูญหายระหว่าง ESI MS เป็นประมาณ 20% HbCO จะสามารถตรวจสอบได้เช่นกัน แม้ว่ามีการระดับขึ้นเห็นได้ชัดของลิแกนด์ dissociation (∼50%) ซึ่งก่อให้เกิดสถานะ 2CO ผูกเป็นไอออนความเข้มสูงสุดใน การสเปกตรัมการ นอกจากนี้ ข้อมูลแนะนำว่า ระดับต่ำสุดของ HbO2 สามารถอยู่รอดเปลี่ยนเป็นระยะก๊าซ เห็นได้ชัดจากดา +64และสัญญาณดา +128 ที่สามารถกำหนดให้กับ Hb ถือครองโมเลกุลออกซิเจน 2 และ 4 ตามลำดับ การประยุกต์ใช้เรียกใช้ collisional ก่อให้เกิดการสูญเสียของลิแกนด์ที่เป็นกลางสำหรับตราสารอนุพันธ์ Hb สามทั้งหมด ปรากฏว่า เป็นรายงานแรกเกี่ยวกับการตรวจพบMbCN, HbCO และ HbO2 ในเฟสก๊าซ เราหวังว่า งานนี้จะถางทางสู่อนาคตด้านสอบสวนของ desolvated Mb และ Hb วรรณคดีอย่างละเอียดบน CN−, CO และ O2 ช่วยผูก globins ในการขั้นตอนการบีบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

electrospray ไอออนไนซ์ (ESI) spectrometry มวล (MS)
สามารถให้ข้อมูลเกี่ยวกับการมีปฏิสัมพันธ์โปรตีนแกนด์ผ่านการตรวจสอบของคอมเพล็กซ์ที่สอดคล้องกันเป็นไอออนก๊าซ
แต่บางระบบมีแนวโน้มที่จะแยกออกจากกันเมื่อเข้าสู่ขั้นตอนการถ่ายโอนก๊าซ ออกซิเจนย้อนกลับได้ผูกพันกับฮีโมโกล (Hb) ได้รับอย่างกว้างขวางศึกษาในการแก้ปัญหาโดยใช้ความหลากหลายของเทคนิคชีวฟิสิกส์ ในนอกจาก O2, เหล็ก (FeII) Hb สามารถผูก CO. ปฏิสัมพันธ์ความสัมพันธ์สูงกับCN- จะถูก จำกัด ให้ธาตุเหล็ก (ที่ FeIII) รัฐ ในแฟชั่นคล้ายคลึงCN-, CO, O2 และผูกเพื่อ myoglobin (MB) มันยังไม่ชัดเจนไม่ว่าจะเป็นรูปแบบใด ๆ ที่ถูกผูกไว้แกนด์เหล่านี้สามารถสังเกตได้โดย ESI-MS ในการนี้การทำงานของเราแสดงให้เห็นถึงการตรวจสอบความสำเร็จในการ MbCN ขณะ MbCO และ MbO2 ไม่รอดภายใต้เงื่อนไข ESI-MS การควบคุมการทดลองแสดงให้เห็นว่ารายงานเก่าของ "MbO2" การตรวจสอบโดยESI-MS อาจเกี่ยวข้องกับการ misassignment การเกิดออกซิเดชันของสิ่งประดิษฐ์ที่เกิดขึ้นภายใต้เงื่อนไขที่ปล่อยโคโรนา สถานการณ์อื่น ๆที่ดีสำหรับการศึกษา ESI-MS ใน Hb สัญญาณที่รุนแรงที่สุดใน HbCN กระจายมวลสอดคล้องกับที่คาดว่าจะมีความซับซ้อนที่มีสี่moieties ไซยาไนด์ที่ถูกผูกไว้ การสูญเสียแกนด์ในช่วง ESI-MS อยู่ที่ประมาณ 20% HbCO สามารถตรวจพบได้เช่นกันแม้จะมีระดับที่เห็นได้ชัดเจนมากขึ้นของการแยกตัวออกแกนด์(~50%) ซึ่งเป็นผู้ผลิตรัฐ 2CO ที่ถูกผูกไว้เป็นไอออนความเข้มสูงที่สุดในคลื่นความถี่ นอกจากนี้ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่าระดับต่ำของ HbO2 สามารถอยู่รอดได้เข้าสู่ขั้นตอนการเปลี่ยนก๊าซเห็นได้จากดา 64 และ 128 สัญญาณดาที่สามารถได้รับมอบหมายให้ดำเนินการ Hb สองและสี่โมเลกุลออกซิเจนตามลำดับ การประยุกต์ใช้การเปิดใช้งานก่อให้เกิดการสูญเสีย collisional แกนด์เป็นกลางสำหรับทั้งสามสัญญาซื้อขายล่วงหน้า Hb ปรากฏว่าครั้งนี้เป็นครั้งแรกในรายงานการตรวจสอบของ MbCN, HbCO และ HbO2 ในระยะก๊าซ เราหวังว่างานนี้จะปูทางไปสู่สเปกโทรสโกในอนาคตการสืบสวนของ desolvated Mb และ Hb เมี่ยงวรรณกรรมอย่างกว้างขวางใน CN-, CO, และ O2 globins ผูกพันในระยะข้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไอวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ( ESI ) - แมสสเปกโทรเมทรี ( MS )
สามารถให้ข้อมูลเกี่ยวกับ บริษัท เวสเทิร์น ลิแกนด์ปฏิสัมพันธ์ผ่านการตรวจหาโปรตีนเชิงซ้อนไอออน
ที่เป็นก๊าซ แต่น่าเสียดายที่บาง
ระบบมักจะแยกออกจากกันเมื่อโอนเป็นก๊าซระยะ
กลับออกซิเจนฮีโมโกลบิน ( Hb ) ผูกได้รับอย่างกว้างขวาง
ศึกษาในสารละลายโดยใช้ความหลากหลายของเทคนิคทางชีวกายภาพ . ใน
ไอวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ( ESI ) - แมสสเปกโทรเมทรี ( MS )
สามารถให้ข้อมูลเกี่ยวกับ บริษัท เวสเทิร์น ลิแกนด์ปฏิสัมพันธ์ผ่านการตรวจหาโปรตีนเชิงซ้อนไอออน
ที่เป็นก๊าซ แต่น่าเสียดายที่บาง
ระบบมักจะแยกออกจากกันเมื่อโอนเป็นก๊าซระยะ
กลับออกซิเจนฮีโมโกลบิน ( Hb ) ผูกได้รับอย่างกว้างขวาง
ศึกษาในสารละลายโดยใช้ความหลากหลายของเทคนิคทางชีวกายภาพ . ใน
นอกจาก O2 , เหล็ก ( หลง ) 2 . ปฏิสัมพันธ์สามารถผูกตะบอย
กับ CN − จำกัด กับเฟอร์ริก ( feiii ) รัฐ ในแฟชั่นที่คล้ายกัน
CN , − , Co , และ O2 ผูกกับไมโอโกลบิน ( MB ) มันยังคงไม่ชัดเจนว่า
ใด ๆเหล่านี้สามารถสังเกตได้โดยลิแกนด์ผูกพันรูปแบบ esi-ms. ในงานนี้
เราแสดงการตรวจจับความสําเร็จของ mbcn ในขณะที่และ mbco
mbo2 ไม่เอาตัวรอดภายใต้เงื่อนไข esi-ms .การทดลองควบคุมแนะนำว่ารายงานเก่าของ " mbo2 " ตรวจจับด้วย
esi-ms อาจเกี่ยวข้องกับ misassignment สิ่งประดิษฐ์ออกซิเดชันเกิดขึ้นภายใต้เงื่อนไขปล่อยโคโรนา . สถานการณ์เพิ่มเติม
มงคลเพื่อการศึกษา esi-ms ใน HB . สัญญาณที่รุนแรงที่สุดใน hbcn มวลกระจายสอดคล้องกับคาดหวัง
ซับซ้อนกับสี่ไซยาไนด์โมเลกุลที่ถูกผูกไว้ เกิดการสูญเสียใน esi-ms ประมาณ 20 %hbco คือได้เป็นอย่างดี แม้ว่าด้วย
สามารถเพิ่มเติมระดับของสารแยกออกจากกัน ( ∼ 50% ) ซึ่งก่อให้เกิด 2CO ผูกพันรัฐเป็นไอออนความเข้มสูงสุดใน
สเปกตรัม นอกจากนี้ ข้อมูลที่บ่งชี้ว่าระดับต่ำของ hbo2 สามารถอยู่รอดได้เปลี่ยนเป็นแก๊ส เฟส เห็นได้ชัดจาก 64 และ 128 ดาดา
สัญญาณที่สามารถมอบหมายให้ HB แบกสองและสี่โมเลกุลออกซิเจน ตามลำดับการกระตุ้นให้เกิดการสูญเสีย
collisional ลิแกนด์เป็นกลางสำหรับ HB ทั้งสามสูง ปรากฏว่าครั้งนี้เป็นรายการของ mbcn hbco
, , และ hbo2 ในก๊าซระยะ เราหวังว่างานนี้จะปูทางสู่อนาคตสเปก
การสืบสวนของ desolvated MB และ HB เมี่ยงวรรณกรรมที่ CN − , Co , และ O2
globins ผูกในย่อระยะ