These pharmacological and genetic t

These pharmacological and genetic tools to manipulate DNA methylation status have pro-
vided key insights into the role of DNA methylation in activity-related neuronal changes (32, 39),
neurogenesis (70), learning and memory (33–35, 40, 41, 71, 72), and long-term behavioral plas-
ticity (36, 37, 73, 74). However, each of these phenomena is comprised of temporally, cellularly,
spatially, and genetically precise changes that arise from circuit interactions between and within de-
fined neuronal structures (27, 75–77). Indeed, although recent tools such as fluorescence-activated
cell sorting and next-generation sequencing have greatly enhanced our ability to measure epige-
netic changes with cellular and genetic precision (see sidebar, Measuring the Epigenome), our
approaches to manipulating DNA methylation are much less sophisticated. For example, pharma-
cological DNMT inhibitors promote global demethylation, presumably at all genes and in all cells
affected. Thus, even where these drugs can be infused directly into a target brain region, they lack
the specificity to demethylate specific genetic elements, such as the promoter region of a gene of
interest. Furthermore, the nucleoside analogue DNMT inhibitors act to covalently trap DNMT
enzymes, causing overt toxicity to mammalian cells (78). Likewise, these drugs lack specificity for
particular DNMT isoforms (DNMT1, 3a, or 3b) and therefore do not allow selective assessment
of how these different isoforms operate at DNA. In contrast, genetic approaches such as traditional
gene knockout animal lines, small hairpin RNA knockdown, and virally mediated gene overexpres-
sion are capable of exhibiting complete isoform selectivity, as has been demonstrated for various
DNMT proteins and Tet1 (40–42, 67, 71, 79, 80). These approaches still present problems in that
they do not deliver precise temporal control over methylation status. Moreover, these approaches
still lack target specificity, as they presumably affect methylation status in a genome-wide fashion.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เครื่องมือเหล่านี้และเภสัชวิทยาทางพันธุกรรมที่จะจัดการกับสถานะดีเอ็นเอ methylation
มีโปรเชิงลึกที่สำคัญแต่แบ่งออกเป็นบทบาทของดีเอ็นเอ methylation ในกิจกรรมที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ประสาท (32, 39)
neurogenesis (70), การเรียนรู้และความจำ (33-35, 40, 41 , 71, 72) และในระยะยาวพฤติกรรมพลา
ticity (36, 37, 73, 74) อย่างไรก็ตามแต่ละปรากฏการณ์เหล่านี้ประกอบด้วยชั่วคราว, cellularly,
ตำแหน่งและการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมที่ถูกต้องที่เกิดขึ้นจากการมีปฏิสัมพันธ์วงจรภายในและระหว่าง de-
นิยามโครงสร้างของเซลล์ประสาท (27, 75-77) อันที่จริงแม้ว่าเครื่องมือที่ผ่านมาเช่นชั้น uorescence
เปิดใช้งานเซลล์เรียงลำดับและลำดับรุ่นต่อไปได้เพิ่มขึ้นอย่างมากความสามารถของเราในการวัดepige-
เปลี่ยนแปลงแม่เหล็กที่มีความแม่นยำโทรศัพท์มือถือและทางพันธุกรรม (ดูแถบด้านข้างวัด epigenome)
ของเราวิธีการจัดการกับดีเอ็นเอmethylation มีมาก ที่มีความซับซ้อนน้อยลง ยกตัวอย่างเช่น pharma-
ยับยั้ง DNMT cological ส่งเสริม demethylation
ทั่วโลกสมมุติที่ยีนและในเซลล์ทั้งหมดได้รับผลกระทบ ดังนั้นแม้ในที่ที่ยาเสพติดเหล่านี้สามารถผสมโดยตรงในสมองเป้าหมายที่พวกเขาขาดเมืองระบุไว้เพื่อ demethylate speci สายองค์ประกอบทางพันธุกรรมคเช่นภูมิภาคโปรโมเตอร์ของยีนที่น่าสนใจ นอกจากนี้สารยับยั้ง DNMT อนาล็อก nucleoside ทำหน้าที่ในการดัก DNMT covalently เอนไซม์ที่ก่อให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์โจ่งแจ้งเลี้ยงลูกด้วยนม (78) ในทำนองเดียวกันยาเหล่านี้ขาดเมืองที่ระบุไว้สำหรับไอโซฟอร์ม DNMT โดยเฉพาะอย่างยิ่ง (DNMT1, 3a หรือ 3b) และดังนั้นจึงไม่อนุญาตให้มีการประเมินผลการเลือกของวิธีการที่แตกต่างกันไอโซฟอร์มเหล่านี้ทำงานที่ดีเอ็นเอ ในทางตรงกันข้ามวิธีทางพันธุกรรมแบบดั้งเดิมเช่นยีนสายสัตว์ที่น่าพิศวง, RNA กิ๊บขนาดเล็กล้มลงและพึ่งไวรัสยีน overexpres- ไซออนมีความสามารถในการแสดงการเลือกไอโซฟอร์มที่สมบูรณ์แบบตามที่ได้รับแสดงให้เห็นต่างๆโปรตีน DNMT และ Tet1 (40-42, 67, 71, 79, 80) วิธีการเหล่านี้ยังคงมีปัญหาในปัจจุบันที่พวกเขาไม่ได้ส่งมอบการควบคุมที่แม่นยำกว่าชั่วสถานะ methylation นอกจากนี้วิธีการเหล่านี้ยังขาดเป้าหมาย speci เมือง fi, ที่พวกเขาน่าจะส่งผลกระทบต่อสถานะ methylation ในแฟชั่นจีโนมกว้าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เหล่านี้ทางเภสัชวิทยาและพันธุกรรมดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นมีเครื่องมือที่จะจัดการกับสถานะของ Pro -
vided คีย์ข้อมูลเชิงลึกในบทบาทของดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นในกิจกรรมที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลง ( 32 , 39 ) ,
neurogenesis ( 70 ) , หน่วยความจำ และการเรียนรู้ ( 33 - 35 , 40 , 41 , 71 , 72 ) , และ ระยะยาว พลาส -
ticity พฤติกรรม ( 36 , 37 , 73 , 74 ) อย่างไรก็ตาม แต่ละเหล่านี้ปรากฏการณ์ประกอบด้วยชั่วคราว cellularly
เปลี่ยนไป , , ,และพันธุกรรม แม่นยำ การเปลี่ยนแปลงที่เกิดขึ้นจากวงจรปฏิสัมพันธ์ระหว่างและภายใน de -
จึงเน็ดและโครงสร้าง ( 27 , 75 ( 77 ) แน่นอน แม้ว่าล่าสุดเครื่องมือเช่นfl uorescence กระตุ้นเซลล์เรียงลำดับรุ่น
มากขึ้นและมีความสามารถที่จะวัด epige -
netic เปลี่ยนกับเซลล์และพันธุกรรมที่แม่นยำ ( ดูแถบด้านข้างวัดพิจีโนมของเรา
)วิธีการจัดการ methylation ดีเอ็นเอมีมากน้อยที่มีความซับซ้อน ตัวอย่างเช่น ฟาร์มา -
cological dnmt การส่งเสริมโลก demethylation สันนิษฐานทั้งหมดและยีนในเซลล์ทั้งหมด
ผลกระทบ ดังนั้น แม้ว่ายาเหล่านี้จะสามารถได้รับโดยตรงในเป้าหมายภาคสมองพวกเขาขาด
กาจึงเมือง demethylate speci จึง C องค์ประกอบพันธุกรรม เช่น โปรโมเตอร์ของยีนของภูมิภาค
สนใจนอกจากนี้ การกระทำแบบ dnmt วคลีโอไซด์ covalently กับดัก dnmt
เอนไซม์ที่ก่อให้เกิดความเป็นพิษต่อสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมตัวเซลล์ ( 78 ) อนึ่ง ยาเหล่านี้จึงขาดกาเมือง
โดยเฉพาะ dnmt ต่อ ( dnmt1 3A , 3B , หรือ ) และดังนั้นจึงไม่อนุญาตให้ใช้วิธีต่อ
การประเมินต่าง ๆ เหล่านี้งานที่ดีเอ็นเอ ในทางตรงกันข้าม , วิธีการทางพันธุกรรมเช่นเดิม
ยีนที่น่าพิศวงสัตว์เส้นเล็ก กิ๊บ อาร์เอ็นเอ น็อค และจากไวรัสโดยยีน overexpres -
ไซออนสามารถจัดแสดงเลือกเกิดไอโซฟอร์มสมบูรณ์ ตามที่ได้แสดง dnmt และโปรตีนต่าง ๆ
tet1 ( 40 - 42 , 67 , 71 , 79 , 80 ) ปัญหาเหล่านี้ยังคงอยู่ในแนวทางที่พวกเขาไม่ได้ส่งมอบการควบคุมขมับ
แม่นยำกว่าจากสถานะ นอกจากนี้แนวทาง
ยังขาดการถ่ายทอดเป้าหมายกาเมือง พวกเขาน่าจะมีผลต่อสถานะจากใน genome-wide
แฟชั่น