Although deoxyribozymes (DNAzymes)

Although deoxyribozymes (DNAzymes) have
been widely used as biosensors for the detection of their
cofactors and the targets of related aptazymes, it is desirable to
expand their range of analytes to take advantage of the
DNAzyme-based signal amplification for more sensitive
detections. In this study, the activity of uracil-DNA glycosylase
(UNG) was successfully detected and quantified by deoxyur-
idine-modified DNAzymes that underwent UNG-dependent
deactivation or activation. In one design, the indispensable
thymidine T2.1 in the 8−17 DNAzyme was replaced with a
deoxyuridine, resulting in minimal change of the DNAzyme’s
activity. Since UNG is capable of removing uracils from single- or double-stranded DNAs, the modified DNAzyme was deactivated when the uracil at the indispensable thymidine site was eliminated by UNG. In another design, introducing a deoxyuridine to the 3′ position of the deoxycytidine C13 in the catalytic core of the same DNAzyme caused significant decrease of the activity. The removal of the interfering deoxyuridine by UNG, however, activated the DNAzyme. By monitoring the activity change of the DNAzymes through the fluorescence enhancement from the DNAzyme-catalyzed cleavage of DNA substrates labeled by a fluorophore and quencher pair, the UNG activity was measured based on UNG-dependent deactivation and activation of the DNAzymes. This method was found to be able to detect UNG activity as low as 0.0034 U/mL. Such a method can be applied to the detection of other nucleotide-modifying enzymes and expand the analyte range of DNAzyme-based biosensors.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แม้ว่าจะมี deoxyribozymes (DNAzymes)ได้แพร่หลายใช้เป็น biosensors ตรวจของของพวกเขาใช้โคแฟกเตอร์และเป้าหมายของ aptazymes ที่เกี่ยวข้อง เป็นการสมควรขยายช่วงของ analytes การใช้ประโยชน์จากการขยายสัญญาณโดยใช้ DNAzyme สำหรับสำคัญเพิ่มเติมdetections ในการศึกษานี้ กิจกรรมของดีเอ็นเอ uracil glycosylase(ง) ถูกตรวจพบ และ quantified โดย deoxyur - เรียบร้อยDNAzymes idine ปรับเปลี่ยนที่มีเปลี่ยนขึ้นอยู่กับบริเวณปิดใช้งานหรือเปิดใช้งาน ในการออกแบบหนึ่ง ขาดไม่ได้thymidine T2.1 ใน 8−17 DNAzyme ถูกแทนที่ด้วยการเปลี่ยน deoxyuridine เกิดน้อยที่สุดของ DNAzymeกิจกรรมการ เนื่องจากบริเวณที่มีความสามารถในการเอา uracils จากเดียว - หรือเดี่ยวควั่น DNAs, DNAzyme ปรับเปลี่ยนถูกปิดใช้งานเมื่อ uracil ไซต์ thymidine สำคัญถูกตัด โดยอัง ในการออกแบบอื่น แนะนำ deoxyuridine ตำแหน่ง 3′ deoxycytidine C13 ในตัวเร่งปฏิกิริยาหลักของ DNAzyme เดียวกันเกิดการลดลงอย่างมีนัยสำคัญของกิจกรรม อย่างไรก็ตาม การกำจัด deoxyuridine รบกวนโดยอัง เรียกใช้ DNAzyme โดยการตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงกิจกรรมของ DNAzymes ผ่านปรับปรุง fluorescence จากปริ DNAzyme กระบวนของพื้นผิว DNA ที่ชื่อ fluorophore และ quencher คู่ กิจกรรมอังถูกวัดตามปิดใช้งานขึ้นอยู่กับบริเวณและเรียกใช้การ DNAzymes วิธีนี้ถูกค้นพบเพื่อให้สามารถตรวจสอบกิจกรรมบริเวณต่ำสุด 0.0034 U/mL วิธีการดังกล่าวสามารถนำไปใช้กับการตรวจพบเอนไซม์อื่น ๆ ปรับเปลี่ยนนิวคลีโอไทด์ และขยาย biosensors ช่วง DNAzyme การ analyte

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แม้ว่า deoxyribozymes (DNAzymes) ได้
ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางว่าเป็นไบโอเซนเซอร์สำหรับการตรวจสอบของ
ปัจจัยและเป้าหมายของ aptazymes ที่เกี่ยวข้องก็เป็นที่พึงปรารถนาที่จะ
ขยายช่วงของการวิเคราะห์การใช้ประโยชน์จาก
การขยายสัญญาณ DNAzyme ตามความสำคัญมากขึ้นสำหรับ
การตรวจจับ ในการศึกษานี้กิจกรรมของ glycosylase uracil ดีเอ็นเอ
(อึ้ง) ได้รับการตรวจพบและประสบความสำเร็จในเชิงปริมาณโดย deoxyur-
DNAzymes idine ปรับปรุงที่ได้รับการขึ้นอยู่กับอึ้ง
เสื่อมหรือยืนยันการใช้งาน หนึ่งในการออกแบบที่ขาดไม่ได้
T2.1 thymidine ใน 8-17 DNAzyme ถูกแทนที่ด้วย
deoxyuridine ผลในการเปลี่ยนแปลงน้อยที่สุดของ DNAzyme ของ
กิจกรรม ตั้งแต่ UNG มีความสามารถในการลบ uracils จาก DNAs เดียวหรือสองครั้งที่ควั่น, DNAzyme แก้ไขถูกปลดเมื่อ uracil ที่เว็บไซต์ thymidine ที่ขาดไม่ได้ถูกกำจัดโดยอึ้ง ในการออกแบบอีกแนะนำ deoxyuridine ไปที่ตำแหน่ง 3 'ของ deoxycytidine C13 ในแกนเร่งปฏิกิริยาของ DNAzyme เดียวกันที่เกิดการลดลงอย่างมีนัยสำคัญของกิจกรรม การกำจัดของ deoxyuridine รบกวนโดยอึ้ง แต่เปิดใช้งาน DNAzyme โดยการตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงการทำงานของ DNAzymes ผ่านการเพิ่มประสิทธิภาพของการเรืองแสงจากความแตกแยก DNAzyme-เร่งของพื้นผิวดีเอ็นเอโดดเด่นด้วยสารเรืองแสงและดับคู่, กิจกรรม UNG วัดขึ้นอยู่กับการยกเลิกการทำงานขึ้นอยู่กับอึ้งและการทำงานของ DNAzymes วิธีการนี้ก็จะพบว่าสามารถตรวจสอบกิจกรรม UNG ต่ำเป็น 0.0034 U / มิลลิลิตร วิธีการดังกล่าวสามารถนำไปใช้กับการตรวจสอบของเอนไซม์เบื่อหน่ายการปรับเปลี่ยนอื่น ๆ และขยายช่วงวิเคราะห์ไบโอเซนเซอร์ DNAzyme ตาม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แม้ว่า deoxyribozymes ( dnazymes ) ได้ถูกใช้อย่างกว้างขวางว่าเป็นตาม

การตรวจหาปัจจัยของพวกเขาและเป้าหมายที่เกี่ยวข้องกับ aptazymes เป็นที่พึงปรารถนาที่จะขยายช่วงของพวกเขา
กรณีเอาเปรียบ
dnazyme ตามสัญญาณการสื่อสารที่มี
เพิ่มเติมเรื่อง . ในการศึกษานี้ กิจกรรมของไกลโคไซเลส
DNA ยูราซิล( อัง ) ได้ตรวจพบและ quantified โดย deoxyur -
idine แก้ไข dnazymes ที่ได้รับอังเสื่อมขึ้นอยู่กับ
หรือเปิดใช้งาน ในการออกแบบ t2.1 เพียงขาดไม่ได้
ใน 8 − 17 dnazyme ถูกแทนที่ด้วย
deoxyuridine เป็นผลในการเปลี่ยนแปลงน้อยที่สุดของกิจกรรมของ
dnazyme . เพราะวุงสามารถถอด uracils จากเดียว หรือติดแถบคู่ ,การ dnazyme ถูกทำลายเมื่อยูราซิล ใน เว็บไซต์ ขาดไม่ได้เพียงถูกอัง ในการออกแบบอื่น แนะนำ deoxyuridine ทั้ง 3 ได้รับตำแหน่งของ deoxycytidine c13 ในหลักการของ dnazyme เดียวกันลดลงจากระดับของกิจกรรม การกำจัดของรบกวน deoxyuridine โดยอุง แต่เปิด dnazyme .โดยการตรวจสอบกิจกรรมของ dnazymes เปลี่ยนผ่านจากการเร่งตัวของดีเอ็นเอจาก dnazyme พื้นผิวข้อความโดย fluorophore เรและคู่ กิจกรรมวัดอังอังตามขึ้นอยู่กับการเสื่อมและการเปิดใช้งานของ dnazymes . วิธีนี้พบว่าสามารถตรวจพบกิจกรรมอังเป็นต่ำเป็น Ratio U / mlวิธีนี้สามารถใช้กับการตรวจหายีนเอนไซม์ดัดแปรอื่น ๆและขยายช่วงของ dnazyme ครูใช้ไบโอเซนเซอร์ .