Mammalian Cell Mutation Test - Mous

Mammalian Cell Mutation Test - Mouse Lymphoma Assay

The system recommended by ICH and others emplys L5178Y cells and the TK (thymidine kinase) locus. Mammalian cells generally have two copies of each gene, but this mouse lymphoma cell line has only one functional copy of the gene, and is referred to as TK+/TK-.

Thymidine kinase is not an essential enzyme. It is part of a system that recycles free thymidine that is eventually incorporated into DNA. Trifluorothymidine (TFT) is a toxic analogue of thymidine and intereferes with DNA metabolism, killing the cell. However, if the functional copy of the TK gene is lost through mutation, the TFT is not metabolized and is no longer toxic.

L5178Y cell cultures are treated with various concentrations of the test compund in both the presence and the absence of S9 mix for 3 hours. Duplicate cultures are used at each experimental point. At least four dose levels of the compound are assessed with the highest dose level being either that expected to reduced survival by 80-90% based on a scaled down preliminary test or, for non-toxic compounds, the sandard limit of 5 mg/ml or to the limit of solubility. The terated cells are washed free of compound and the cells are grown for an expression period of 48 hours hours to allow fixation of mutations.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบการกลายพันธุ์เซลล์ mammalian - ทดสอบเมาส์คอลลาระบบแนะนำ โดย ICH และอื่น ๆ emplys L5178Y เซลล์และโลกัสโพล (thymidine kinase) ทีเค Mammalian เซลล์โดยทั่วไปมีสำเนาของยีนแต่ละ แต่นี้เมาส์คอลลาเซลล์ได้ทำสำเนาของยีน และเรียกว่า TK + /mts TK-Thymidine kinase ไม่มีเอนไซม์ที่จำเป็น เป็นส่วนหนึ่งของระบบที่ recycles thymidine ฟรีที่จะรวมอยู่ในดีเอ็นเอในที่สุด Trifluorothymidine (TFT) เป็นอนาล็อกพิษ thymidine และ intereferes กับการเผาผลาญดีเอ็นเอ ฆ่าเซลล์ อย่างไรก็ตาม ถ้าสำเนาทำงานของยีน TK หายผ่านการกลายพันธุ์ TFT ถูก metabolized และไม่เป็นพิษ วัฒนธรรมเซลล์ L5178Y จะถือว่า มีความเข้มข้นต่าง ๆ ของ compund ทดสอบในทั้งสถานะและการขาดงานของ S9 ผสม 3 ชั่วโมง วัฒนธรรมซ้ำจะใช้ในแต่ละจุดทดลอง ยาน้อยสี่ระดับของสารประกอบจะประเมินกับระดับยาสูงสุดกำลังอย่างใดอย่างหนึ่งที่คาดว่าจะลดอยู่รอด 80-90% ใช้ ในการทดสอบเบื้องต้นปรับสัดส่วนได้ลง หรือ สารพิษ วงเงิน sandard 5 mg/ml หรือขีดจำกัดของการละลาย Terated เซลล์จะล้างฟรีของสารประกอบและเซลล์จะเติบโตเป็นระยะเวลา 48 ชั่วโมงให้เบีกลายพันธุ์นิพจน์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การกลายพันธุ์ของเซลล์ Mammalian Test - เมาส์มะเร็งต่อมน้ำเหลือง Assay ระบบที่แนะนำโดยไอซีและอื่น ๆ emplys เซลล์ L5178Y และ TK (ไคเนส thymidine) สถานที่ เซลล์สัตว์โดยทั่วไปมีสองสำเนาของยีนแต่ละ แต่เซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองเมาส์นี้มีเพียงหนึ่งสำเนาการทำงานของยีนและจะเรียกว่า TK + / TK-. ไคเนส Thymidine ไม่ได้เป็นเอนไซม์ที่จำเป็น มันเป็นส่วนหนึ่งของระบบที่รีไซเคิล thymidine ฟรีที่เป็นนิติบุคคลที่จัดตั้งที่สุดในดีเอ็นเอ Trifluorothymidine (TFT) เป็นอะนาล็อกเป็นพิษของ thymidine และ intereferes กับการเผาผลาญอาหารดีเอ็นเอฆ่าเซลล์ แต่ถ้าสำเนาการทำงานของยีน TK จะหายไปผ่านการกลายพันธุ์ TFT ที่ไม่ได้เผาผลาญและไม่เป็นพิษ. L5178Y เซลล์เพาะเลี้ยงได้รับการปฏิบัติที่มีความเข้มข้นต่างๆของ Compund การทดสอบทั้งในการแสดงตนและการขาดการผสม S9 3 ชั่วโมง วัฒนธรรมที่ซ้ำกันจะถูกนำมาใช้ในการทดลองแต่ละจุด อย่างน้อยสี่ระดับปริมาณของสารได้รับการประเมินที่มีระดับปริมาณสูงสุดเป็นทั้งที่คาดว่าจะอยู่รอดลดลง 80-90% ขึ้นอยู่กับการปรับลงทดสอบเบื้องต้นหรือสำหรับสารปลอดสารพิษ, ขีด จำกัด sandard 5 mg / ml หรือขีด จำกัด ของความสามารถในการละลาย เซลล์จะถูกล้าง terated ฟรีสารประกอบและเซลล์มีการเจริญเติบโตเป็นระยะเวลาการแสดงออกของ 48 ชั่วโมงชั่วโมงในการอนุญาตให้มีการตรึงของการกลายพันธุ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลือง - เมาส์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมการกลายพันธุ์ทดสอบการทดสอบ

ระบบแนะนำโดยฉันและคนอื่น ๆ emplys l5178y เซลล์และ TK ( ไทมิดีน ไคเนส ) - . เลี้ยงเซลล์โดยทั่วไปจะมีสองสำเนาของแต่ละยีน แต่เมาส์ต่อมน้ำเหลืองเซลล์เส้นมีเพียงหนึ่งสำเนาการทำงานของยีนและเรียกว่า / TK TK - .

ไทมิดีนไคเนสไม่จําเป็น เอนไซม์มันเป็นส่วนหนึ่งของระบบการรีไซเคิลฟรีเพียงที่ในที่สุดก็รวมอยู่ในดีเอ็นเอ trifluorothymidine ( TFT ) เป็นสารพิษและอนาล็อกเพียง intereferes กับการเผาผลาญ DNA ฆ่าเซลล์ อย่างไรก็ตาม ถ้าสำเนาการทำงานของยีน TK หายผ่านการกลายพันธุ์ , TFT ไม่เผาผลาญ และพิษอีกต่อไป

l5178y เซลล์วัฒนธรรมปฏิบัติต่างๆ ความเข้มข้นของการทดสอบ compund ทั้งการแสดงและการขาดงานของ S9 ผสมเป็นเวลา 3 ชั่วโมง วัฒนธรรมที่ซ้ำกันจะใช้ในแต่ละการทดลองจุด อย่างน้อยสี่ระดับของปริมาณส่วนผสมสูงสุดระดับการประเมินที่มีปริมาณที่คาดว่าจะลดลง โดย 80-90% ตามการปรับลงทดสอบเบื้องต้น หรือสำหรับสารประกอบที่ไม่เป็นพิษ , Sandard วงเงิน 5 mg / ml หรือขีด จำกัด ของการละลาย . การ terated เซลล์จะล้างฟรีของสารประกอบและเซลล์จะเติบโตขึ้น เพราะการแสดงออกที่ระยะเวลา 48 ชั่วโมง ชั่วโมง จะช่วยให้ความหลงใหลของการกลายพันธุ์