Example 4. ส่วนแยก ซีรัม of Camellia sinensis (i.e. Recentia® CS) inhibits SDS-
35 induced IL-1a and IL-8 ในรูปแบบ ที่ขึ้นอยู่กับ ขนาดยา, as compared to anti-
inflammatory benchmark agents.
ส่วนแยก ซีรัม of Camellia sinensis (Recentia® CS) is obtained from fresh Camellia
sinensis (tea plant) by process described in, for example, US patents 7473435, 8043635,
and 8318220. It delivers multiple benefits for free-radical scavenging properties, anti-
5 inflammatory benefits, and photostabilization activity. Therefore, we compared Recentia®
CS to anti-inflammatory benchmark agents (positive controls) for mitigating the release of
inflammatory ไซโตไคน์ IL-1a and คีโมไคน์ IL-8 in HEK.
The แบบวิธี for the growth of HEK are described under Example 1. Treatment was 10 conducted by incubation of HEK with SDS (25 pg/mI for การชักนำ of IL-1a or 6 pg/mI for
การชักนำ of IL-8 as determined in Example 1) for 16 hours in presence of a range of
concentrations of Recentia® CS, or Aspirin, or SB203580.
Figure 5A shows that Aspirin, a well-known anti-inflammatory benchmark agent
15 (Reviewed by Jue DM, et al. 1999; 14 (3): 231-8), demonstrated dose-dependent inhibition
of IL-1a การปลดปล่อย ที่ชักนำ โดย SDS (25 pg/ml) in HEK. Estimated 1050 of Aspirin was about 230
pg/ml. Recentia® CS was compared to aspirin for mitigating การปลดปล่อย ที่ชักนำ โดย SDS of the
inflammatory ไซโตไคน์ IL-1a. It was found that Recentia® CS is an effective inhibitor of SDS-
induced release of IL-1 a. Estimated IC50 of Recentia CS was about 310 pg/mI, suggesting 20 the comparable potency as that of Aspirin.
In Figure 5A, "Baseline refers to the concentration of IL-1a in ส่วนลอย of
untreated HEK. "การชักนำ" refers to the concentration of IL-1a in ส่วนลอย of HEK treated
with 25 pg/ml of SDS, which is the การชักนำ dose determined in Example 1. Due to
25 variations inherent in biological test systems such as HEK cultures produced from cells
harvested from different donors or different donor body locations, response of HEK as
shown by concentrations of ไซโตไคน์ (e.g. IL-1a) and คีโมไคน์s (e.g. IL-8) may vary
between experiments, particularly the "Baseline" and "การชักนำ" concentrations.
30 Importantly, Aspirin did not inhibit การปลดปล่อย ที่ชักนำ โดย SDS of inflammatory คีโมไคน์
IL-8. We thus evaluated another anti-inflammatory benchmark agent, SB203580, a p38 MAPK kinase inhibitor (Reviewed by Lee JC et al. Immunopharmacology 2000; 47, 185-
201). As shown in Figure 5B, SB203580 demonstrated dose-dependent inhibition of IL-8
การปลดปล่อย ที่ชักนำ โดย SDS (6 pg/ml) with estimated IC50 of about 0.70 pg/ml. When we
35 compared to SB203580, Recentia® CS showed dose-dependent inhibition of IL-8 induced
by SDS (6 pg/ml) with estimated IC50 of about 34 pg/ml. It was especially important to find that Recentia CS inhibited both SDS-induced and basal level non-induced IL-8 release, while SB203580 inhibited SDS-induced IL-8 only.
In Figure 5B, "Baseline" refers to the concentration of IL-8 in ส่วนลอย of untreated 5 HEK. "การชักนำ" refers to the concentration of IL-8 in ส่วนลอย of HEK treated with 6
pg/ml of SDS, which is the การชักนำ dose determined in Example 1. Due to variations
inherent in biological test systems such as HEK cultures produced from cells harvested from
different donors or different donor body locations, response of HEK as shown by
concentrations of ไซโตไคน์ (e.g. IL-1a) and คีโมไคน์s (e.g. IL-8) may vary between
10 experiments, particularly the "Baseline" and "การชักนำ" concentrations.
Example 5. ส่วนแยก ซีรัม of Camellia sinensis (i.e. Recentia® CS) inhibits
เอธอกซิเลตเตด alcohol-induced release of IL-1a ในรูปแบบ ที่ขึ้นอยู่กับ ขนาดยา.
15
We further evaluated Aspirin for inhibition of the IL-1 a การปลดปล่อย ที่ชักนำ โดย the เอธอกซิเลตเตด alcohol.
The แบบวิธี for the growth of HEK are described under Example 1. Treatment was 20 conducted by incubation of HEK with เอธอกซิเลตเตด alcohol (1000 pg/ml for การชักนำ of IL-1 a
as determined in Example 3) for 16 hours in presence of a range of concentrations of
Recentia® CS, or Aspirin.
As shown in Figure 6, Aspirin failed to inhibit IL-1a การปลดปล่อย ที่ชักนำ โดย the
25 เอธอกซิเลตเตด alcohol. Surprisingly, Recentia® CS effectively inhibited เอธอกซิเลตเตด alcohol-
induced IL-1 a release ในรูปแบบ ที่ขึ้นอยู่กับ ขนาดยา with estimated IC50 of about 560 pg/ml in HEK. This data clearly indicates that Recentia® CS can mitigate IL-1a การปลดปล่อย ที่ชักนำ โดย different
classes of surfactants.
30 In Figure 6, "Baseline" refers to the concentration of IL-1 a in ส่วนลอย of untreated
HEK. "การชักนำ" refers to the concentration of IL-1 a in ส่วนลอย of HEK treated with 1000 pg/ml of เอธอกซิเลตเตด alcohol, which is the การชักนำ dose determined in Example 3. Due to variations inherent in biological test systems such as HEK cultures produced from cells
harvested from different donors or different donor body locations, response of HEK as 35 shown by concentrations of ไซโตไคน์ (e.g. IL-1a) and คีโมไคน์s (e.g. IL-8) may vary
between experiments, particularly the "Baseline" and "การชักนำ" concentrations.
Example 6. Conventional green tea and black tea preparations from the source
identical to ส่วนแยก ซีรัม of Camellia sinensis (i.e. Recentia® CS), have no inhibition of IL-1a and IL-8 induced by SDS.
5
To demonstrate superior activity of Recentia® CS for mitigating the release of the
inflammatory ไซโตไคน์ IL-1a and IL-8 induced by SDS, we did a side by side fair comparison
of conventional preparations of commercially available green tea and black tea from source
identical to material used for obtaining Recentia® CS used in this การประดิษฐ์. The
10 conventional tea preparations were made in accordance with manufacturer-suggested
methods described below.
Conventional green tea preparation was obtained from the same cultivar of tea plant
grown and harvested under the same conditions and at the same time as that used for
15 obtaining ส่วนแยก ซีรัม of Camellia sinensis (Recentia® CS). 2 grams of "Island Green
Premium Tea" from Charleston Tea Plantation, Wadmalaw Island, South Carolina, USA,
were steeped in 200 grams of deionized water at 85°C on a magnetic stirrer for 2 minutes.
Resulting liquid was strained, allowed to cool to room temperature, divided into aliquots in
cryogenic vials and stored at -30°C for further experimental use.
20
Conventional black tea preparation was obtained from the same cultivar of tea plant
grown and harvested under the same conditions and at the same time as that used for
obtaining ส่วนแยก ซีรัม of Camellia sinensis (Recentia® CS). 2 grams of "Limited Edition
Exceptional Quality 100% First Flush Loose Tea" from Charleston Tea Plantation,
25 Wadmalaw Island, South Carolina, USA, were steeped in 200 grams of deionized water at
99°C on a magnetic stirrer for 4 minutes. Resulting liquid was strained, allowed to cool to
room temperature, divided into aliquots in cryogenic vials and stored at -30°C for further
experimental use.
30 ส่วนแยก ซีรัม of Camellia sinensis (Recentia® CS) was obtained from fresh
Camellia sinensis (tea plant) by process described in, for example, US patents 7473435, 8043635, and 8318220.
The แบบวิธี for the growth of HEK are described under Example 1. Treatment was 35 conducted by incubation of HEK with SDS (25 lag/ml for การชักนำ of IL-1 a or 6 tag/ml for
การชักนำ of IL-8 as determined in Example 1) for 16 hours in presence of a range of concentrations of Recentia® CS, or conventional green tea preparation, or conventional black tea preparation.
As shown in the Figure 7A-B, Recentia® CS ในรูปแบบ ที่ขึ้นอยู่กับ ขนาดยา inhibited SDS-
5 induced release of IL-1a (A) with estimated IC50 of about 0.39% (with notable inhibition
starting at the concentration of about 0.1%), and release of IL-8 (B) with estimated 1050 of
about 0.043% (with notable inhibition starting at the concentration of about 0.04%). While the
highest concentration of Recentia® CS tested was 1°/0, this should not be construed as the
high limit of concentration range effective for inhibition. The concentrations of Recentia® CS, 10 or conventional green tea preparation, or conventional black tea preparation indicated in
Figure 7A-B are percent by volume in HEK growth medium, assuming "as is" material as
100%. However, neither green tea nor black tea at the same concentrations showed notable
inhibition. The data indicate that Recentia® CS, processed by patented Zeta ส่วนแยก TM
technology, has unique and diverse composition of natural constituents that exhibit superior 15 multifunctional benefits than preparations of green tea and black tea.
In Figure 7A, "Baseline" refers to the concentration of IL-1a in ส่วนลอย of
untreated HEK. "การชักนำ" refers to the concentration of IL-1a in ส่วนลอย of HEK treated
with 25 pg/ml of SDS, which is the การชักนำ dose determined in Example 1.
20
In Figure 7B, "Baseline" refers to the concentration of IL-8 in ส่วนลอย of untreated
HEK. "การชักนำ" refers to the concentration of IL-8 in ส่วนลอย of HEK treated with 6
lag/ml of SDS, which is the การชักนำ dose determined in Example 1. Due to variations
inherent in biolo
ตัวอย่างที่ 4 ซีรัมส่วนแยกของ Camellia sinensis (เช่น Recentia ® CS) ยับยั้ง SDS-35 เกิด IL-1a และ IL-8 ในรูปแบบที่ขึ้นอยู่กับขนาดยา เมื่อเทียบกับยาแก้อักเสบเกณฑ์มาตรฐานอักเสบแทนซีรัมส่วนแยกของต้นชา (Recentia ® CS) ได้รับจากคาเมลเลียสด sinensis (ชาพันธุ์โดยกระบวนอธิบาย ตัวอย่าง เราสิทธิบัตร 7473435, 8043635 และ 8318220 มันให้ประโยชน์หลายสำหรับอนุมูลอิสระ scavenging คุณสมบัติ ยาแก้อักเสบประโยชน์ 5 อักเสบ และกิจกรรม photostabilization ดังนั้น เราเปรียบเทียบ Recentia ® CS กับตัวแทนมาตรฐานแก้อักเสบ (การควบคุมบวก) สำหรับการบรรเทาของ ไซโตไคน์อักเสบ IL-1a และคีโมไคน์ IL-8 ใน HEKแบบวิธีสำหรับการเติบโตของ HEK ไว้ภายใต้ 1 ตัวอย่าง รักษาที่ดำเนินการ โดยคณะทันตแพทยศาสตร์ของ HEK กับ SDS (pg 25 mI สำหรับการชักนำของ IL-1a หรือ pg 6 mI สำหรับ 10 การชักนำอิล 8 ตามที่กำหนดไว้ในตัวอย่าง 1) 16 ชั่วโมงในอยู่ในช่วงของ ความเข้มข้นของ Recentia ® CS แอสไพริน หรือ SB203580รูปของ 5A แสดงที่แอสไพริน ตัวแทนมาตรฐานรู้จักแก้อักเสบ15 (ตรวจทาน โดยจองเจง DM, et al. 1999; 14 (3): 231-8), สาธิตยับยั้งการขึ้นอยู่กับปริมาณรังสีของ IL-1a การปลดปล่อยที่ชักนำโดย SDS (25 pg/ml) ใน HEK ประมาณ 1050 ของแอสไพรินได้ประมาณ 230 pg / ml. Recentia ® CS ถูกเปรียบเทียบกับแอสไพรินสำหรับบรรเทาการปลดปล่อยที่ชักนำโดย SDS ของ ไซโตไคน์อักเสบ IL-1a พบว่า Recentia ® CS มีผลประสิทธิภาพขององค์กร- IL-1 อ.ประมาณ IC50 ของ Recentia CS รุ่นอาจถูกประมาณ 310 pg/mI แนะนำ 20 ศักยภาพเทียบเท่ากับแอสไพรินในรูปของ 5A "พื้นฐานหมายถึงความเข้มข้นของ IL-1a ในส่วนลอยของHEK ไม่ถูกรักษาไว้ "การชักนำ" หมายถึงความเข้มข้นของ IL-1a ในส่วนลอยของ HEK ถือว่า มี 25 pg/ml ขององค์กร ซึ่งเป็นยาการชักนำที่ถูกกำหนดในตัวอย่าง 1 เนื่อง ในระบบการทดสอบทางชีวภาพเช่นวัฒนธรรม HEK 25 รูปแบบผลิตจากเซลล์ เก็บเกี่ยวจากผู้บริจาคต่าง ๆ หรือร่างกายผู้บริจาคต่างสถาน ของ HEK เป็น แสดงความเข้มข้นของไซโตไคน์ (เช่น IL-1a) และ คีโมไคน์s (เช่น IL-8) อาจแตกต่างกัน ระหว่างทดลอง โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่ "พื้นฐาน" และ "การชักนำ" ความเข้มข้น30 สำคัญ แอสไพรินไม่ได้ยับยั้งการปลดปล่อยที่ชักนำโดย SDS ของคีโมไคน์อักเสบอิล-8 เราจึงประเมินอื่น benchmark แก้อักเสบแทน SB203580 เป็น p38 MAPK kinase ผล (ตรวจทาน โดยลีเจซีเอ็ด al. Immunopharmacology 2000; 47, 185 -201) ดังแสดงในรูปที่ 5B, SB203580 แสดงให้เห็นว่าขึ้นอยู่กับยายับยั้ง IL-8การปลดปล่อยที่ชักนำโดย SDS (6 pg/ml) ด้วย IC50 ประเมินของประมาณ 0.70 pg/ml เมื่อเรา35 เมื่อเปรียบเทียบกับ SB203580, Recentia ® CS พบว่ายับยั้งการขึ้นอยู่กับปริมาณของ IL-8 เกิดจากโดย SDS (6 pg/ml) ด้วย IC50 ประเมินของ pg/ml ประมาณ 34 มันเป็นความสำคัญอย่างยิ่งในการค้นหาว่า Recentia CS ห้าม เกิด SDS และโรคระดับไม่ใช่เกิดจาก IL-8 รุ่น ในขณะที่ SB203580 ห้ามเกิด SDS IL-8 เท่าในรูป 5B "พื้นฐาน" หมายถึงความเข้มข้นของ IL-8 ในส่วนลอยของ HEK ไม่ถูกรักษา 5 "การชักนำ" หมายถึงความเข้มข้นของ IL-8 ในส่วนลอยของ HEK รับ 6 pg/ml ขององค์กร ซึ่งเป็นยาการชักนำที่ถูกกำหนดในตัวอย่าง 1 เนื่องจากรูปแบบ ในระบบการทดสอบทางชีวภาพเช่นผลิตจากเซลล์ที่เก็บเกี่ยวจากวัฒนธรรม HEK ผู้บริจาคต่าง ๆ หรือร่างกายผู้บริจาคต่างสถาน ของ HEK แสดงโดย ความเข้มข้นของไซโตไคน์ (เช่น IL-1a) และ คีโมไคน์s (เช่น IL-8) อาจแตกต่างกันระหว่าง การทดลองที่ 10 โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่ "พื้นฐาน" และ "การชักนำ" ความเข้มข้นตัวอย่างที่ 5 ซีรัมส่วนแยกของ Camellia sinensis (เช่น Recentia ® CS) ยับยั้งเอธอกซิเลตเตดทำให้เกิดแอลกอฮอล์รุ่น IL 1a ในรูปแบบที่ขึ้นอยู่กับขนาดยา15เราประเมินแอสไพรินยับยั้ง IL-1 โดยที่ชักนำการปลดปล่อยเป็นแอลกอฮอล์เอธอกซิเลตเตดเพิ่มเติมแบบวิธีสำหรับการเติบโตของ HEK ไว้ภายใต้ 1 ตัวอย่าง รักษา 20 ดำเนินการ โดยคณะทันตแพทยศาสตร์ของ HEK กับเอธอกซิเลตเตดแอลกอฮอล์ (pg/ml สำหรับการชักนำของ IL-1 1000 ตัว ตามที่กำหนดไว้ในตัวอย่างที่ 3) 16 ชั่วโมงในอยู่ในช่วงของความเข้มข้นของ Recentia ® CS หรือแอสไพรินดังแสดงในรูปที่ 6 แอสไพรินไม่สามารถยับยั้ง IL 1a การปลดปล่อยที่ชักนำโดย25 เอธอกซิเลตเตดแอลกอฮอล์ จู่ ๆ Recentia ® CS มีประสิทธิภาพห้ามแอลกอฮอล์เอธอกซิเลตเตด-IL-1 เหนี่ยวนำให้เป็นรุ่นในรูปแบบที่ขึ้นอยู่กับขนาดยา ด้วย IC50 ประเมินของประมาณ 560 pg/ml ใน HEK ข้อมูลนี้ชัดเจนบ่งชี้ว่า Recentia ® CS สามารถบรรเทา IL 1a การปลดปล่อยเวย์ที่ชักนำโดยแตกต่างกัน เรียนของ surfactants30 ในรูปที่ 6 "หลัก" หมายถึงความเข้มข้นของ IL-1 ส่วนลอยในของไม่ถูกรักษาHEK "การชักนำ" หมายถึงความเข้มข้นของ IL-1 ส่วนลอยในของ HEK ถือว่ามี 1000 pg/ml แอลกอฮอล์ เอธอกซิเลตเตดซึ่งเป็นยาการชักนำที่ถูกกำหนดในตัวอย่างที่ 3 เนื่องจากการเปลี่ยนแปลงในระบบการทดสอบทางชีวภาพเช่นวัฒนธรรม HEK ที่ผลิตจากเซลล์เก็บเกี่ยวจากผู้บริจาคต่าง ๆ หรือสถานต่าง ๆ บริจาคร่างกาย การตอบสนองของ HEK 35 แสดงความเข้มข้นของไซโตไคน์ (เช่น IL-1a) และ คีโมไคน์s (เช่น IL-8) อาจแตกต่างกัน ระหว่างทดลอง โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่ "พื้นฐาน" และ "การชักนำ" ความเข้มข้นตัวอย่างที่ 6 การเตรียมชาดำและชาเขียวจากแหล่งทั่วไปเหมือนกับซีรัมส่วนแยกของ Camellia sinensis (เช่น Recentia ® CS), ไม่ยับยั้ง IL-1a และ IL-8 เกิดจากองค์กรที่มี5แสดงให้เห็นถึงกิจกรรมห้องของ Recentia ® CS สำหรับบรรเทาการปล่อยตัวไซโตไคน์อักเสบ IL-1a และ IL-8 เกิดจาก SDS เราไม่ได้เปรียบเทียบเคียงข้างกันธรรม ของการเตรียมปกติใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ชาเขียวและชาดำจากแหล่ง เหมือนกับวัสดุที่ใช้สำหรับการรับ Recentia ® CS ใช้ในนี้การประดิษฐ์ ที่ เตรียมชาธรรมดา 10 ทำตามผู้ผลิตแนะนำ วิธีที่อธิบายไว้ด้านล่างเตรียมชาเขียวแบบดั้งเดิมได้รับจาก cultivar เดียวของโรงงานชา grown and harvested under the same conditions and at the same time as that used for 15 obtaining ส่วนแยก ซีรัม of Camellia sinensis (Recentia® CS). 2 grams of "Island Green Premium Tea" from Charleston Tea Plantation, Wadmalaw Island, South Carolina, USA, were steeped in 200 grams of deionized water at 85°C on a magnetic stirrer for 2 minutes. Resulting liquid was strained, allowed to cool to room temperature, divided into aliquots in cryogenic vials and stored at -30°C for further experimental use.20Conventional black tea preparation was obtained from the same cultivar of tea plant grown and harvested under the same conditions and at the same time as that used for obtaining ส่วนแยก ซีรัม of Camellia sinensis (Recentia® CS). 2 grams of "Limited Edition Exceptional Quality 100% First Flush Loose Tea" from Charleston Tea Plantation, 25 Wadmalaw Island, South Carolina, USA, were steeped in 200 grams of deionized water at 99°C on a magnetic stirrer for 4 minutes. Resulting liquid was strained, allowed to cool to room temperature, divided into aliquots in cryogenic vials and stored at -30°C for further experimental use.30 ส่วนแยก ซีรัม of Camellia sinensis (Recentia® CS) was obtained from freshCamellia sinensis (tea plant) by process described in, for example, US patents 7473435, 8043635, and 8318220.The แบบวิธี for the growth of HEK are described under Example 1. Treatment was 35 conducted by incubation of HEK with SDS (25 lag/ml for การชักนำ of IL-1 a or 6 tag/ml for การชักนำ of IL-8 as determined in Example 1) for 16 hours in presence of a range of concentrations of Recentia® CS, or conventional green tea preparation, or conventional black tea preparation.As shown in the Figure 7A-B, Recentia® CS ในรูปแบบ ที่ขึ้นอยู่กับ ขนาดยา inhibited SDS-5 induced release of IL-1a (A) with estimated IC50 of about 0.39% (with notable inhibitionstarting at the concentration of about 0.1%), and release of IL-8 (B) with estimated 1050 ofabout 0.043% (with notable inhibition starting at the concentration of about 0.04%). While the highest concentration of Recentia® CS tested was 1°/0, this should not be construed as the high limit of concentration range effective for inhibition. The concentrations of Recentia® CS, 10 or conventional green tea preparation, or conventional black tea preparation indicated in Figure 7A-B are percent by volume in HEK growth medium, assuming "as is" material as 100%. However, neither green tea nor black tea at the same concentrations showed notable inhibition. The data indicate that Recentia® CS, processed by patented Zeta ส่วนแยก TM technology, has unique and diverse composition of natural constituents that exhibit superior 15 multifunctional benefits than preparations of green tea and black tea.In Figure 7A, "Baseline" refers to the concentration of IL-1a in ส่วนลอย ofuntreated HEK. "การชักนำ" refers to the concentration of IL-1a in ส่วนลอย of HEK treated with 25 pg/ml of SDS, which is the การชักนำ dose determined in Example 1. 20In Figure 7B, "Baseline" refers to the concentration of IL-8 in ส่วนลอย of untreated HEK. "การชักนำ" refers to the concentration of IL-8 in ส่วนลอย of HEK treated with 6 lag/ml of SDS, which is the การชักนำ dose determined in Example 1. Due to variations inherent in biolo
การแปล กรุณารอสักครู่..
