Plant regeneration. Colonies of pro

Plant regeneration. Colonies of protoplast-derived calli were freed from alginate layers according to the protocol of Damm and Willmitzer (1988). Callus colonies were transferred separately from each layer to 250 ml jars containing regeneration media, of which three were used: MS medium consisting of MS micro- and macro-elements and vitamins with 20 gl−1 sucrose, free of plant growth regulators (PGRs); R1—consisting of MS micro- and macroelements and vitamins with 0.4 mg l−1 calcium panthothenate, 0.1 mg l−1 gibberelic acid (GA3), 3.0 mg l−1 kinetin, and 30 gl−1 sucrose; R2—consisting of MS micro- and macroelements, and modified vitamin composition; 0.5 mg l−1 nicotinic acid, 0.1 mg l−1 pyridoxine and thiamine, 3.0 mg l−1 glycine, and 20 gl−1 sucrose. The media were adjusted to a pH of 5.7–5.8 and 0.25% (w/v) Phytagel was added (Sigma) prior to autoclaving (20 min at 121°C; 1.4× 104 kg m−2). Developing shoots were transferred to fresh medium every 3–4 wk. Cultures were maintained at 26±2°C with 16 h photoperiod at a light intensity of 55 μmol m−2 s−1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปลูกฟื้นฟู อาณานิคมของ calli protoplast มาได้รอดจากชั้นแอลจิเนตตามโพรโทคอลอยู่และ Willmitzer (1988) อาณานิคมให้มีการถ่ายโอนแยกต่างหากจากแต่ละชั้นจะประกอบด้วยฟื้นฟูสื่อ ที่สามใช้ขวด 250 ml: MS ปานกลางประกอบด้วย MS ไมโครแมองค์ประกอบและวิตามินกับซูโครส gl−1 20 ฟรีของหน่วยงานกำกับดูแลการเจริญเติบโตของพืช (PGRs); R1 ซึ่งประกอบด้วยไมโคร MS - macroelements และวิตามิน panthothenate แคลเซียม l−1 มิลลิกรัม 0.4, 0.1 mg l−1 gibberelic กรด (GA3), kinetin 3.0 มิลลิกรัม l−1 และ 30 ซูโครส gl−1 R2-ประกอบด้วยไมโคร MS - macroelements และวิตามินปรับเปลี่ยนองค์ ประกอบ กรด nicotinic l−1 0.5 mg, 0.1 mg l−1 ไพริดอกซีน และไทอามีน glycine l−1 3.0 mg และซูโครส gl−1 20 สื่อถูกปรับ pH 5.7-5.8 และ 0.25% (w/v) Phytagel เพิ่ม (ซิกมา) ก่อน autoclaving (20 นาทีที่ 121 ° C; 1.4 × 104 กิโลกรัม m−2) พัฒนายอดถูกโอนย้ายไปสดกลางได้รักษาวัฒนธรรมทุก 3-4 wk. ที่ 26±2 ° C กับ 16 h ชั่วโมงที่ความเข้มแสงของ 55 μmol m−2 s−1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การฟื้นฟูโรงงาน อาณานิคมของโปรโตพลาแคลลัสที่ได้มาเป็นอิสระจากชั้นอัลจิเนตตามโปรโตคอลของ Damm และ Willmitzer นี้ (1988) อาณานิคมของแคลลัสถูกย้ายแยกต่างหากจากแต่ละชั้น 250 มล. ขวดที่มีสื่อการฟื้นฟูที่สามถูกนำมาใช้: สูตร MS ซึ่งประกอบด้วย MS ไมโครและองค์ประกอบมหภาคและวิตามินที่มี 20 GL-1 ซูโครสฟรีควบคุมการเจริญเติบโต (PGRs) ; R1-ประกอบด้วย MS ไมโครและ macroelements และวิตามินที่มี 0.4 มิลลิกรัมต่อลิตร-1 แคลเซียม panthothenate 0.1 mg l-1 กรด gibberelic (GA3) 3.0 mg l-1 kinetin และ 30 GL-1 ซูโครส; R2-ประกอบด้วยไมโคร MS และ macroelements และองค์ประกอบวิตามินปรับเปลี่ยน; 0.5 mg l-1 กรด nicotinic 0.1 mg l-1 และไพริดอกซิวิตามินบี, 3.0 mg l-1 glycine และ 20 GL-1 ซูโครส สื่อที่จะมีการปรับค่า pH ของ 5.7-5.8 และ 0.25% (w / v) phytagel ถูกบันทึก (ซิกม่า) ก่อนที่จะนึ่งฆ่าเชื้อ (20 นาทีที่ 121 ° C; 1.4 × 104 กก. ม 2) ยอดการพัฒนามีการถ่ายโอนไปยังสื่อที่สดใหม่ทุก 3-4 สัปดาห์ วัฒนธรรมที่ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 26 ± 2 ° C ที่มีแสง 16 ชั่วโมงที่ความเข้มของแสง 55 ไมโครโมลของ m-2 s-1