AbstractAnaplasma marginale (Ricket

Abstract
Anaplasma marginale (Rickettsiales: Anaplasmataceae) is an obligate intracellular bacterium that multiplies exclusively within membrane-bound vacuoles in the cytoplasm of host cells. A number of A. marginale isolates can be propagated in the Ixodes scapularis IDE8 tick cell line, which provides a reliable source of antigens for a wide variety of studies. However, because of its intracellular nature, separation of bacteria from host cell materials remains an important constraint for researchers. In the present study, we evaluated the use of Percoll gradients for purification of two Brazilian strains of A. marginale grown in IDE8 tick cells. The purified A. marginale monitored in Giemsa-stained smears contained only minimal amounts of IDE8 cell stroma. The total protein yields were 1.2 mg and 1.7 mg, while the DNA titers quantified with real-time PCR were 6.4 × 109 for UFMG1 and 4.87 × 109 for UFMG2 copies in the purified material, respectively. Additionally, we confirmed the viability of purified bacteria by infecting tick cells after being freshly purified and after retrieval from long-term storage. Importantly, the viability of the organisms is preserved after use of this separation method, and therefore the purified organisms can be used in enzymatic assays and other research approaches where live organisms would be preferred.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อAnaplasma marginale (Rickettsiales: Anaplasmataceae) เป็นแบคทีเรีย intracellular obligate ที่คูณเฉพาะภายในเมมเบรนแบบผูก vacuoles ในไซโทพลาซึมของเซลล์โฮสต์ จำนวน A. marginale ที่แยกได้สามารถเผยแพร่ใน scapularis Ixodes IDE8 ขีดเซลล์บรรทัด ซึ่งเป็นแหล่งเชื่อถือได้ของ antigens สำหรับหลากหลายของการศึกษา อย่างไรก็ตาม เนื่องจากลักษณะ intracellular แยกแบคทีเรียจากโฮสต์เซลล์วัสดุยังคง มีข้อจำกัดที่สำคัญสำหรับนักวิจัย ในการศึกษาปัจจุบัน เราประเมินการใช้ Percoll ไล่ระดับสีสำหรับฟอกของสองสายพันธุ์บราซิลของ A. marginale ที่เติบโตในเซลล์ขีด IDE8 Marginale A. บริสุทธิ์ตรวจสอบในสี Giemsa smears อยู่เพียงน้อยที่สุดจำนวน stroma เซลล์ IDE8 ผลผลิตรวมโปรตีนได้ 1.2 มิลลิกรัมและ 1.7 มิลลิกรัม ขณะ titers DNA quantified กับ PCR แบบเรียลไทม์ 6.4 × 109 สำหรับ UFMG1 และ 4.87 × 109 สำหรับสำเนา UFMG2 ในวัสดุบริสุทธิ์ ตามลำดับ นอกจากนี้ เรายืนยันศักยภาพของแบคทีเรียบริสุทธิ์เล็ดขีดเซลล์หลัง จากที่บริสุทธิ์สด และหลัง จากเรียกเก็บระยะยาว สำคัญ ชีวิตของสิ่งมีชีวิตที่เป็นรักษาหลังจากใช้วิธีนี้แยก และดังนั้น สิ่งมีชีวิตที่บริสุทธิ์สามารถใช้ assays เอนไซม์ในระบบและแนวทางการวิจัยอื่น ๆ ซึ่งสิ่งมีชีวิตอยู่จะต้อง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นามธรรม
anaplasma marginale ( rickettsiales : anaplasmataceae ) เป็น obligate intracellular โดยเฉพาะภายในแวคิวโอลมีแบคทีเรียที่เพิ่มจำนวนใน cytoplasm ของเซลล์โฮสต์ จำนวนของ A marginale ไอโซเลทสามารถขยายพันธุ์ใน ixodes scapularis เซลล์ ide8 ขีดเส้น ซึ่งมีแหล่งที่เชื่อถือได้ของแอนติเจนสำหรับความหลากหลายของการศึกษา อย่างไรก็ตามเนื่องจากธรรมชาติของการแยกแบคทีเรียจากวัสดุเซลล์เจ้าบ้านยังคงเป็นข้อจำกัดที่สำคัญสำหรับนักวิจัย ในการศึกษา เราประเมินการใช้ percoll ไล่สีให้บริสุทธิ์ของทั้งสองสายพันธุ์ของบราซิล . marginale โตใน ide8 ติ๊กเซลล์ และ . marginale การเปรอะเปื้อนละเลงจิมซามีเพียงยอดเงินน้อยที่สุดของสโตรเซลล์ ide8 .ปริมาณโปรตีนทั้งหมด คือ 1.2  และ  1.7 มิลลิกรัม มิลลิกรัม ในขณะที่ DNA PCR แบบเรียลไทม์ โดยวัดด้วยจำนวน 6.4  ×  109 สำหรับ ufmg1 และ 4.87  ×  109 สำหรับ ufmg2 เล่มและวัสดุ ตามลำดับ นอกจากนี้ เรายืนยันความบริสุทธิ์ของแบคทีเรียโดยการติดเห็บเซลล์หลังจากถูกสดบริสุทธิ์และหลังจากสืบค้นจากการจัดเก็บข้อมูลระยะยาว ที่สำคัญชีวิตของสิ่งมีชีวิตจะถูกเก็บรักษาไว้ หลังจากใช้วิธีนี้ การแยก และดังนั้นจึง ทำให้สิ่งมีชีวิตสามารถใช้เอนไซม์ในเลือดและแนวทางการวิจัยที่อาศัยสิ่งมีชีวิตอื่น ๆ จะชอบ