The
cleavage reaction was initiated at 25 °C by addition of 50 μl of MgCl2
in buffer for a final concentration of 0.6 mM. At appropriate times,
aliquots of 35 μl (~400 ng of RNA) were withdrawn, the reaction was
quenched with 35 μl of stop solution (50 mM EDTA, 7 M urea, 0.01%
xylene cyanol) and the mixture was subjected to denaturing 15%
PAGE. RNA bandswere revealed using ethidiumbromide and quantified
with Image J (Rasband, W.S., ImageJ, U.S. National Institutes of Health,
Bethesda,Maryland, USA, http://imagej.nih.gov/ij/, 1997–2012).
ปฏิกิริยาความแตกแยกก็เริ่มที่ 25 ° C โดยนอกเหนือจาก 50 ไมโครลิตรของ MgCl2
ในบัฟเฟอร์สำหรับความเข้มข้นสุดท้ายของ 0.6 มิลลิ ในช่วงเวลาที่เหมาะสม
ในรูปส่วนลงตัวจาก 35 ไมโครลิตร (~ 400 เส้นทางของอาร์เอ็นเอ) ถูกถอนปฏิกิริยาถูก
ดับ 35 ไมโครลิตรของโซลูชั่นแบบครบวงจร (EDTA 50 มิลลิเมตร, 7 M ยูเรีย 0.01%
cyanol ไซลีน) และส่วนผสมที่ถูกยัดเยียดให้ denaturing 15 %
หน้า อาร์เอ็นเอ bandswere เปิดเผยโดยใช้ ethidiumbromide และวัด
ด้วยภาพ J (ราสแบนด์ WS, ImageJ สหรัฐสถาบันสุขภาพแห่งชาติ,
Bethesda, Maryland, USA, http://imagej.nih.gov/ij/, 1997-2012)
การแปล กรุณารอสักครู่..
ตัวริเริ่มปฏิกิริยาที่อุณหภูมิ 25 องศา C โดยเพิ่ม 50 μ L ไอโซโทป
ในบัฟเฟอร์สำหรับความเข้มข้นสุดท้าย 0.6 มิลลิเมตร ในเวลาที่เหมาะสม ,
เฉยๆ 35 μ L ( ~ 400 นาโน RNA ) ถูกถอน ปฏิกิริยาที่ถูกดับด้วย 35 μ
l หยุดโซลูชั่น ( 50 mM EDTA , 7 M ยูเรีย , 0.01 %
ไซลีน cyanol ) และส่วนผสมที่ถูกยัดเยียดให้ี่ 15 %
หน้าอาร์เอ็นเอ bandswere เผยใช้ ethidiumbromide และ quantified
ด้วยภาพ J ( rasband W.S ImageJ , , , สหรัฐสถาบันสุขภาพแห่งชาติ
, Bethesda , Maryland , USA , http://imagej.nih.gov/ij/ , 1997 – 2012 )
การแปล กรุณารอสักครู่..