All embryos used in this study were

All embryos used in this study were from wild-type Drosophila
flies (Canton S). Embryos were collected at 2 h intervals and aged
until the desired developmental stage on yeast juice agar plates
at 25 C. The 0–2-hr embryos and 3–5-hr embryos were dechorionated with 5% sodium hypochlorite in water for 1.5 min and then
frozen in liquid nitrogen. After 500 ll of TRIzol Reagent (Invitrogen) was added to the frozen embryos on ice, the embryos were
homogenized quickly, and 500 ll TRIzol Reagent and 200 ll chloroform/isoamyl alcohol (49/1, v/v) were added, followed by vigorous shaking. After incubation on ice for 5 min, the suspension was
centrifuged at 12,000 rpm at 4 C for 15 min. RNA in the aqueous
phase was transferred to a sterilized tube. After addition of
500 ll of isopropanol to the tube, the solution was stored on ice
for 5 min followed by centrifugation at 12,000 rpm at 4 C for
10 min. Isopropanol was exchanged with 75% aq ethanol and the
ethanol solution was centrifuged at 7500 rpm at 4 C for 3 min
three times. The precipitate, RNA, was suspended in 75% aq ethanol
and stored at 20 C for more than 12 h. The RNA suspension was
collected by centrifugation and dissolved in PBS buffer, followed by
treatment with an oligo (dT)-cellulose column (GE Healthcare)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอ่อนทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษานี้ได้จากแมลงป่าชนิดแมลงวัน (Canton S) ถูกรวบรวมไว้ในช่วงเวลา 2 ชม. และมีอายุจนถึงขั้นตอนการพัฒนาที่ต้องการบนแผ่นวุ้นน้ำผลไม้ยีสต์ที่ 25 c 0 – 2 ชั่วโมงตัวอ่อนและตัวอ่อน 3-5 ชม.ได้ dechorionated ด้วย 5% โซเดียมไฮเปอร์คลอไรด์ในน้ำ 1.5 นาทีแล้วแช่แข็งในไนโตรเจนเหลว หลังจาก 500 ll ของ TRIzol เอเจนต์ (Invitrogen) ถูกโคลนแช่น้ำแข็ง การโคลนได้ll homogenized อย่างรวดเร็ว และ 500 TRIzol เอเจนต์และแอลกอฮอล์ คลอโรฟอร์ม/isoamyl ll 200 (49/1, v/v) ตาม ด้วยการเขย่าคึกคักเพิ่ม หลังจากบ่มน้ำแข็ง 5 นาที ระบบกันสะเทือนได้จากที่ 12,000 rpm 4 c เป็นเวลา 15 นาทีอาร์เอ็นเอในการละลายขั้นตอนการโอนย้ายไปหลอดฆ่าเชื้อ หลังจากเพิ่ม500 ของ isopropanol ไปหลอด การแก้ปัญหาจะถูกเก็บไว้บนน้ำแข็งตาม ด้วยหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 rpm 4 c เป็นเวลา 5 นาที10 นาที Isopropanol ถูกแลกเปลี่ยนกับ aq 75% เอทานอลและแก้ปัญหาเอทานอลคือผลิตภัณฑ์ที่ 7500 รอบต่อนาที 4 c เป็นเวลา 3 นาทีสามครั้ง ตะกอน RNA ถูกระงับใน aq 75% เอทานอลและเก็บไว้ที่ 20 C สำหรับมากกว่า 12 ชม แก้ไขระงับ RNAรวบรวม โดยหมุนเหวี่ยง และละลายใน PBS บัฟเฟอร์ ตามด้วยการรักษา ด้วยการบำรุงยกกระชับ (dT) -คอลัมน์เซลลูโลส (GE ดูแลสุขภาพ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอ่อนทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้มาจากป่าชนิดแมลงหวี่
บิน (Canton S) ตัวอ่อนที่ถูกเก็บรวบรวมในช่วง 2 ชั่วโมงและอายุ
จนถึงขั้นตอนการพัฒนาที่ต้องการบนน้ำยีสต์แผ่นวุ้น
อยู่ที่ 25 องศาเซลเซียส ตัวอ่อน 0-2 ชั่วโมง 3-5 ชั่วโมงตัวอ่อนถูก dechorionated กับโซเดียมไฮโปคลอไรต์ 5% ในน้ำเป็นเวลา 1.5 นาทีแล้ว
แช่แข็งในไนโตรเจนเหลว หลังจาก 500 LL ของ Trizol? รีเอเจน (Invitrogen) ถูกบันทึกอยู่ในตัวอ่อนแช่แข็งบนน้ำแข็งตัวอ่อนที่ถูก
ปั่นได้อย่างรวดเร็วและ 500 LL Trizol? น้ำยาและ 200 LL คลอโรฟอร์ม / isoamyl เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ (49/1, v / v) ถูกเพิ่มตามด้วยพลังสั่น หลังจากการบ่มบนน้ำแข็งเป็นเวลา 5 นาทีระงับถูก
หมุนเหวี่ยงที่ 12,000 รอบต่อนาทีที่ 4 องศาเซลเซียสนาน 15 นาที อาร์เอ็นเอในน้ำ
ขั้นตอนที่ถูกย้ายไปยังหลอดฆ่าเชื้อ หลังจากที่นอกเหนือจาก
500 LL ของ isopropanol หลอด, การแก้ปัญหาที่ถูกเก็บไว้ในน้ำแข็ง
เป็นเวลา 5 นาทีตามด้วยการหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา
10 นาที isopropanol ถูกแลกกับ AQ เอทานอล 75% และ
การแก้ปัญหาเอทานอลได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 7500 รอบต่อนาทีที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 นาที
สามครั้ง ตะกอน, RNA ถูกระงับใน AQ เอทานอล 75%
และเก็บไว้ที่ 20 องศาเซลเซียสเป็นเวลานานกว่า 12 ชั่วโมง ระงับ RNA ถูก
เก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงและละลายในบัฟเฟอร์พีบีเอสตามด้วย
การรักษาด้วยการ Oligo (dT) คอลัมน์ -cellulose (GE Healthcare)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทุกตัวที่ใช้ในการศึกษานี้ได้แก่ ของแมลงหวี่แมลงวัน ( Canton ด้วย ) ตัวเก็บรวบรวมในช่วงเวลา 2 ชั่วโมง และอายุจนบรรลุที่ต้องการเวทียีสต์น้ำวุ้นแผ่นที่อุณหภูมิ 25 C 0 – 2 ชั่วโมงและ 3 ตัวอ่อนตัวอ่อน 5-hr –เป็น dechorionated 5% โซเดียมไฮโปคลอไรด์ในน้ำ 1.5 มินแล้วแช่แข็งในไนโตรเจนเหลว หลังจาก 500 จะ trizol Reagent ( Invitrogen ) ถูกเพิ่มไปยังตัวอ่อนแช่แข็งในน้ำแข็ง ตัวอ่อนคือโฮโมอย่างรวดเร็วและ 500 จะ trizol รีเอเจนต์และ 200 จะคลอโรฟอร์ม / แอลกอฮอล์ในปริมาณ ( 49 / 1 v / v ) ถูกเพิ่มตามแรงสั่น หลังจากบ่มแข็งนาน 5 นาทีถูกระงับระดับที่ 12 , 000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที ซึ่งในน้ำระยะคือ ย้ายไปฆ่าเชื้อหลอด หลังจากเพิ่ม500 จะของไอโซโพรพานอลกับรถไฟใต้ดินทางออกที่ถูกเก็บไว้ในน้ำแข็ง5 นาทีตามด้วยการปั่นเหวี่ยงที่ 12 , 000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 4 C สำหรับ10 นาที ไอโซโพรพานอลถูกแลกด้วยเอทานอล AQ 75% และสารละลายเอทานอลอยู่ที่ระดับ 7 , 500 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 นาทีสามครั้ง ที่พักใน RNA คือ 75% AQ เอทานอลเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียส เป็นเวลากว่า 12 ชั่วโมง ซึ่งถูกระงับรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงและละลายใน PBS buffer , ตามมาด้วยการรักษาด้วยโอลิโก ( DT ) - คอลัมน์เซลลูโลส ( GE Healthcare )