Three procedures for the transester

Three procedures for the transesterification of yeast lipid into
fatty acid methyl ester (FAME) were attempted. Procedure I was lipid
extraction from dried cell followed by transesterification; Procedure
II and III were direct transesterification using dried cell and
wet cell, respectively (Fig. 1). The three procedures and variants
were all preformed in triplicate and are described as follows: Procedure
I, yeast cells were harvested by centrifugation at 1585g for
15 min and dried at 60 C to constant weight in vials; then the
dried yeast was added to a mixture of chloroform:methanol (2:1,
v/v) and sonicated (Transsonic model 460/H, Elma, Singen, Germany)
for 1 h (Folch et al., 1957) to extract the lipid; the total lipid
extracts were recovered by evaporation of the solvent and then
transesterified by adding a fresh mixture of chloroform:methanol
(2:1, v/v) in the presence of sulfuric acid (0.4 M) and shaken at
1000 rpm and 50 C in an eppendorf thermomixer (Eppendorf, Germany)
for 24 h. Procedure II: yeast cells were harvested and dried
as described in Procedure I; the dried yeast was added with glass
beads as abrasives (Schneiter and Daum, 2006) and directly transesterified
as described in Procedure I without the lipid extraction
step. Procedure III: yeast cells were harvested, mixed with glass
beads, and directly transesterified without the cell drying and lipid
extraction steps. For the time course studies, 5 ll of reaction medium
was taken at various time intervals and diluted in 50 ll of
chloroform for analysis of the composition of the products.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สามขั้นตอนสำหรับการเพิ่มของไขมันยีสต์เป็นกรดไขมัน methyl เอส (เฟม) ได้มีความพยายาม ขั้นตอนที่ได้ไขมันสกัดจากเซลล์แห้งตาม ด้วยเพิ่ม ขั้นตอนการII และ III ถูกเพิ่มโดยตรงโดยใช้เซลล์แห้ง และเปียกเซลล์ ตามลำดับ (Fig. 1) ขั้นตอนที่สามและตัวแปรมีทั้งซับ preformed ใน triplicate และมีอธิบายดังนี้: ขั้นตอนผม เซลล์เก็บเกี่ยว โดย centrifugation ที่ 1585g สำหรับยีสต์15 นาที และอบแห้งที่ 60 C ถึง vials น้ำหนักคง นั้นยีสต์แห้งที่เพิ่มส่วนผสมของคลอโรฟอร์ม: เมทานอล (2:1v/v) และ sonicated (Transsonic รุ่น 460/H, Elma, Singen เยอรมนี)สำหรับ h 1 (Folch et al., 1957) เพื่อแยกไขมัน ไขมันทั้งหมดบางส่วนถูกกู้คืน โดยการระเหยของตัวทำละลายแล้วtransesterified โดยการเพิ่มส่วนผสมสดของคลอโรฟอร์ม: เมทานอล(2:1, v/v) ในต่อหน้าของกรดซัลฟิวริก (0.4 M) และเขย่าที่1000 rpm และ C 50 ในการ eppendorf thermomixer (Eppendorf เยอรมนี)สำหรับ 24 h. ขั้นตอน II: เซลล์ยีสต์ได้เก็บเกี่ยว และตากแห้งเป็นอธิบายในขั้นตอนฉัน ยีสต์แห้งเพิ่มด้วยลูกปัด เป็นการกัดกร่อน (Schneiter และ Daum, 2006) และตรง transesterifiedเป็นอธิบายในขั้นตอนฉันโดยไม่สกัดไขมันขั้นตอนการ ขั้นตอนที่ III: เซลล์ยีสต์ได้เก็บเกี่ยวผลผลิต ผสมกับแก้วลูกปัด และตรง transesterified โดยเซลล์แห้งและไขมันขั้นตอนการสกัด ศึกษาเวลาเรียน 5 จะปฏิกิริยาปานกลางดำเนินการในช่วงเวลาต่าง ๆ และผสมใน 50 จะของคลอโรฟอร์มสำหรับการวิเคราะห์ส่วนประกอบของผลิตภัณฑ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สามขั้นตอนการ transesterification ของยีสต์ไขมันเป็น
ไขมันเมทิลเอสเตอร์ของกรด (FAME) ได้รับการพยายาม ขั้นตอนที่ผมยังเป็นไขมัน
สกัดจากเซลล์แห้งตามด้วย transesterification; ขั้นตอน
ที่สองและสามเป็น transesterification โดยตรงโดยใช้เซลล์แห้งและ
เปียกเซลล์ตามลำดับ (รูปที่ 1). สามขั้นตอนและสายพันธุ์ที่
ถูก preformed ในเพิ่มขึ้นสามเท่าและจะมีคำอธิบายดังต่อไปนี้ขั้นตอน
ที่ผมเซลล์ยีสต์ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 1585g สำหรับ
? 15 นาทีและอบแห้งที่อุณหภูมิ 60 C ถึงน้ำหนักคงที่ในขวด; แล้ว
ยีสต์แห้งถูกบันทึกอยู่ในส่วนผสมของคลอโรฟอร์ม: เมทานอล (2: 1,
v / v) และ sonicated (โมเดล Transsonic 460 / H, Elma, Singen, เยอรมนี)
เป็นเวลา 1 ชั่วโมง (. Folch et al, 1957) ในการสกัด ไขมัน; ไขมันรวม
สารสกัดจากหายจากการระเหยของตัวทำละลายแล้ว
transesterified โดยการเพิ่มส่วนผสมสดใหม่ของคลอโรฟอร์ม: เมทานอล
(2: 1, v / v) ในการปรากฏตัวของกรดซัลฟูริก (0.4 เมตร) และเขย่าที่
1000 รอบต่อนาทีและ 50? ซีใน thermomixer Eppendorf (Eppendorf, เยอรมนี)
เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ขั้นตอนที่สอง: เซลล์ยีสต์ถูกเก็บเกี่ยวและแห้ง
ตามที่อธิบายไว้ในขั้นตอนที่ฉัน; ยีสต์แห้งที่ถูกเพิ่มเข้ามาด้วยแก้ว
ลูกปัดเป็นสารกัดกร่อน (Schneiter และ Daum 2006) และโดยตรง transesterified
ตามที่อธิบายไว้ในขั้นตอนที่ฉันโดยไม่ต้องสกัดไขมัน
ขั้นตอน ขั้นตอนที่สาม: เซลล์ยีสต์เก็บเกี่ยวผสมกับแก้ว
ลูกปัดและ transesterified โดยตรงโดยไม่ต้องอบแห้งของเซลล์และไขมัน
ขั้นตอนการสกัด ในขณะนี้การศึกษาหลักสูตร 5 LL ของกลางปฏิกิริยา
ถูกนำมาในช่วงเวลาต่างๆและเจือจางใน 50 LL ของ
คลอโรฟอร์มสำหรับการวิเคราะห์องค์ประกอบของผลิตภัณฑ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สามขั้นตอนสำหรับกระบวนการทรานส์เอสเทอริฟิเคชั่นของลิปิดในยีสต์
กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ ( ชื่อเสียง ) พยายาม ขั้นตอนการสกัดลิปิด
ผมจากแห้งเซลล์ตามขั้นตอนกระบวนการทรานส์เอสเทอริฟิเคชั่น ;
2 และ 3 มีกระบวนการทรานส์เอสเทอริฟิเคชั่นโดยตรงโดยใช้เซลล์และเซลล์เปียกแห้ง
ตามลำดับ ( รูปที่ 1 ) สามขั้นตอนและตัวแปร
ถูก preformed ทั้งหมดทั้งสามใบ และอธิบายไว้ดังนี้ขั้นตอน
ผม , เซลล์ยีสต์ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 1585g สำหรับ
15 นาทีและอบแห้งที่อุณหภูมิ 60  C น้ำหนักคงที่ในหลอดแก้ว แล้ว
ยีสต์แห้งเติมส่วนผสมของคลอโรฟอร์ม : เมทานอล ( 2 : 1
v / v ) และ sonicated ( transsonic รุ่น 460 / ชั่วโมง เอ็ลม่าซินเกน , เยอรมนี )
1 H ( ฟอล์ช et al . , 1957 ) เพื่อสกัดไขมัน ; สารสกัดจากทั้งหมดที่พบไขมัน
โดยการระเหยของตัวทำละลายแล้ว
transesterified โดยการเพิ่มส่วนผสมที่สดใหม่ของคลอโรฟอร์ม : เมทานอล
( 2 : 1 v / v ) ในการแสดงตนของกรดซัลฟูริก ( 0.4 M ) และหวั่นไหวที่
1000 รอบ / นาทีและ 50  C ในเพนดอร์ฟ thermomixer ( เพนดอร์ฟ , เยอรมนี )
เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ขั้นตอนที่ 2 : เก็บเซลล์ยีสต์แห้ง
ตามที่อธิบายไว้ใน ขั้นตอนผม ; ยีสต์แห้งเพิ่มด้วยลูกปัดแก้ว
เป็นเชี่ยว ( schneiter ดอมและ ,2006 ) โดยตรง และ transesterified
ตามที่อธิบายไว้ในขั้นตอนที่ผมไม่มีการสกัดไขมัน
ขั้นตอน ขั้นตอนที่ 3 : เก็บเซลล์ยีสต์ผสมกับลูกปัดแก้ว
, และโดยตรง transesterified ปราศจากเซลล์แห้งและไขมัน
แยกขั้นตอน สำหรับเวลาหลักสูตรการศึกษา 5 จะ
กลางปฏิกิริยาถูกถ่ายในช่วงเวลาต่าง ๆ และใน 50 ของ
จะเจือจางคลอโรฟอร์มในการวิเคราะห์องค์ประกอบของผลิตภัณฑ์