validates and provides evidence tha

validates and provides evidence that both the biolistics
and the Agrobacterium-mediated gene transfer technologies
are equally effective and reliable methods for incorporating blackheart
resistance based on RNA silencing transgenic constructs into
‘Smooth Cayenne’, a cultivar that has been difficult to improve
by conventional breeding. Using these technologies and based on
the results from our field studies, 15 of 39 (38%) transgenic lines
under evaluation were regarded as blackheart resistant, having no
blackheart symptoms in two or more trials. Further selection was
required to remove unwanted off-types or poor performing lines,
however 5 blackheart resistant lines were selected that performed
as well or better than the control in terms of fruit characteristics and
quality. These included V59(1) and V61(1), both developed through
Agrobacterium-mediated transfer of the ppo gene construct, as well
as 140-10.1 and 158-2, both developed through biolistics with
the former containing an opp.ppo gene construct and the latter
an opp.i.ppo construct. A fifth blackheart resistant line with suitable
fruit characteristics was 161-19, developed through biolistic
gene transfer of the opp.cca.i.acc.ppo construct, but requires further
evaluation to determine if natural flowering is also controlled.
Blackheart resistant lines were produced at a higher frequency
for Agrobacterium-mediated transformation, even though there
have been reports that Agrobacterium traditionally has a limited
host range, whereby monocotyledonous crops and cereals in particular
appear to be more recalcitrant to Agrobacterium infection
than dicotyledons (Yang and Christou, 1994). Nevertheless other
workers (Firoozabady et al., 2006) have successfully transformed
‘Smooth Cayenne’ pineapple using Agrobacterium-mediated transformation
with an efficiency of up to 60%. The reported efficiency
for Agrobacterium-mediated transformation may be attributed to
a more targeted incorporation of the introduced gene construct
in the plant’s genome compared to the more random and incomplete
integration through the use of biolistics. This is supported by
the work of Cheng et al. (2001), who compared the two transformation
methods in rice, using several plasmids. It was found that
irrespective of the plasmid used, the re-arrangement frequency of
the transgene (consisting of the promoter, specific gene of interest
and terminator) was six times lower in transgenic plants obtained
through Agrobacterium-mediated transformation as compared to
biolistics resulting in higher transformation efficiency.
Blackheart resistant plants were obtained regardless of the
transgenes used. Constructs based on sense (ppo), antisense-sense
(opp.ppo) and hairpin RNA with a spliceable intron (opp.i.ppo;
opp.cca.i.acc.ppo) were all capable of causing gene silencing and

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตรวจสอบ และแสดงหลักฐานที่ทั้งสอง biolisticsและเทคโนโลยีการถ่ายโอนยีน mediated อโกรแบคทีเรียมเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพ และเชื่อถือได้สำหรับเว็บ blackheart อย่างเท่าเทียมกันความต้านทานตาม silencing ถั่วเหลืองโครงสร้างเป็นอาร์เอ็นเอ'เรียบป่น' cultivar ที่แล้วยากที่จะปรับปรุงโดยพันธุ์ธรรมดา ใช้เทคโนโลยีเหล่านี้ และตามผลจากการศึกษาของฟิลด์ 15 บรรทัดถั่วเหลือง (38%) 39ภายใต้การประเมินก็ถือว่าเป็น blackheart ทน ไม่มีอาการ blackheart ในการทดลองอย่าง น้อย 2 อาหารเพิ่มเติมต้องเอาออกไม่ต้องปิดชนิดหรือรายการประสิทธิภาพต่ำอย่างไรก็ตาม บรรทัด 5 blackheart ทนได้เลือกที่ดำเนินการเช่นกัน หรือดีกว่าการควบคุมในลักษณะผลไม้ และคุณภาพการ เหล่านี้รวม V59(1) และ V61(1) ทั้งพัฒนาผ่านอโกรแบคทีเรียม mediated โอน ppo ยีนโครงสร้าง เช่นทั้งพัฒนาผ่าน biolistics กับ 140-10.1 และ 158-2อดีตที่ประกอบด้วยการสร้างยีน opp.ppo และหลังโครงสร้างเป็น opp.i.ppo บรรทัด blackheart ทนห้า ด้วยเหมาะสมผลไม้ลักษณะเป็น 161-19 พัฒนาผ่าน biolisticการถ่ายโอนยีนการสร้าง opp.cca.i.acc.ppo แต่ต้องการเพิ่มเติมการประเมินผลเพื่อตรวจสอบถ้าดอกไม้ธรรมชาติจะถูกควบคุมบรรทัด Blackheart ทนผลิตความถี่สูงสำหรับแปลง mediated อโกรแบคทีเรียม แม้มีมีรายงานว่า อโกรแบคทีเรียมซึ่งมีการจำกัดจัดช่วง โดย monocotyledonous พืชและธัญพืชโดยเฉพาะต้อง recalcitrant มากกว่าการติดเชื้ออโกรแบคทีเรียมกว่า dicotyledons (ยางและ Christou, 1994) อื่น ๆ อย่างไรก็ตามคน (Firoozabady และ al., 2006) ได้แปลงเรียบร้อยแล้ว'เรียบป่น' สับปะรดใช้แปลง mediated อโกรแบคทีเรียมมีประสิทธิภาพถึง 60% รายงานประสิทธิภาพสำหรับ mediated อโกรแบคทีเรียมการเปลี่ยนแปลงอาจเกิดจากจดทะเบียนมากขึ้นเป้าหมายของก่อสร้างนำยีนในกลุ่มของพืชเปรียบเทียบกับการสุ่มมากกว่า และไม่สมบูรณ์รวมโดยใช้ biolistics นี้ได้รับการสนับสนุนโดยการทำงานของ Cheng et al. (2001), ที่เปรียบเทียบการเปลี่ยนแปลง 2วิธีการในข้าว ใช้ plasmids หลาย จะพบว่าไม่ plasmid ที่ใช้ ความถี่ในการจัดเรียงใหม่ของtransgene (ประกอบด้วยโปรโมเตอร์ ยีนเฉพาะที่น่าสนใจและเทอร์มิเนเตอร์) ถูกล่าง 6 ครั้งในพืชถั่วเหลืองที่ได้รับผ่านแปลง mediated อโกรแบคทีเรียมเป็น compared เพื่อbiolistics ในการแปลงประสิทธิภาพสูงพืชทน Blackheart ได้รับไม่ว่าจะtransgenes ใช้ ตามความรู้สึก (ppo), โครงสร้าง antisense รู้สึก(opp.ppo) และอาร์เอ็นเอกิ๊บ มี intron spliceable (opp.i.ppoopp.cca.i.acc.ppo) ก็สามารถทำให้เกิดยีน silencing และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตรวจสอบและมีหลักฐานว่าทั้ง biolistics
และเทคโนโลยีการถ่ายโอนยีน Agrobacterium พึ่ง
เป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพเท่าเทียมกันและเชื่อถือได้สำหรับการใช้มาตรการ Blackheart
ต้านทานขึ้นอยู่กับการห้ามไม่ให้พูด RNA โครงสร้างยีนเข้าไปใน
'Smooth Cayenne' พันธุ์ที่ได้รับความยากในการปรับปรุง
พันธุ์โดยทั่วไป การใช้เทคโนโลยีเหล่านี้และขึ้นอยู่กับ
ผลที่ได้จากการศึกษาภาคสนามของเรา 15 39 (38%) สายพันธุ์
ภายใต้การประเมินผลถูกมองว่าเป็นทน Blackheart, ไม่มี
อาการ Blackheart ในสองหรือการทดลองมากขึ้น เลือกต่อถูก
ต้องที่จะลบออกชนิดที่ไม่พึงประสงค์หรือสายที่มีประสิทธิภาพไม่ดี
แต่ 5 สายทน Blackheart ได้รับการคัดเลือกที่ดำเนินการ
เช่นกันหรือดีกว่าการควบคุมในแง่ของลักษณะและผลไม้
ที่มีคุณภาพ เหล่านี้รวมถึง V59 (1) และ V61 (1) ทั้งการพัฒนาผ่าน
การถ่ายโอน Agrobacterium สื่อของยีนที่สร้าง ppo รวม
เป็น 140-10.1 และ 158-2 ทั้งการพัฒนาผ่าน biolistics กับ
อดีตที่มีการสร้างยีน opp.ppo และหลัง
opp.i.ppo สร้าง สายทน Blackheart ห้าเหมาะสม
ลักษณะเป็นผลไม้ 161-19, การพัฒนาผ่าน biolistic
การถ่ายโอนยีนของโครงสร้าง opp.cca.i.acc.ppo แต่ต้องต่อ
การประเมินผลเพื่อตรวจสอบว่าการออกดอกตามธรรมชาตินอกจากนี้ยังมีการควบคุม.
สายทน Blackheart ผลิต ที่ความถี่ที่สูงขึ้น
สำหรับเชื้อ Agrobacterium แม้ว่าจะมี
การรายงานว่า Agrobacterium ประเพณีมี จำกัด
ช่วงโฮสต์โดยพืชใบเลี้ยงเดี่ยวและธัญพืชโดยเฉพาะอย่างยิ่ง
ดูเหมือนจะมากขึ้นบิดพลิ้วการติดเชื้อ Agrobacterium
กว่า dicotyledons (ยางและ Christou, 1994) แต่คนอื่น ๆ
คนงาน (Firoozabady et al., 2006) ได้เปลี่ยนประสบความสำเร็จ
สับปะรด 'Smooth Cayenne' โดยใช้เชื้อ Agrobacterium
มีประสิทธิภาพสูงถึง 60% รายงานที่มีประสิทธิภาพ
สำหรับเชื้อ Agrobacterium อาจจะประกอบกับ
การรวมตัวกันตรงเป้าหมายมากขึ้นของการสร้างยีนแนะนำ
ในจีโนมของพืชเมื่อเทียบกับแบบสุ่มสมบูรณ์มากขึ้นและ
บูรณาการผ่านการใช้ biolistics นี้ได้รับการสนับสนุนโดย
การทำงานของเฉิง et al, (2001) ซึ่งเมื่อเทียบกับสองการเปลี่ยนแปลง
วิธีการในการปลูกข้าวโดยใช้พลาสมิดหลาย พบว่า
โดยไม่คำนึงถึงพลาสมิดที่ใช้ความถี่การจัดเรียงใหม่ของ
ยีน (ประกอบด้วยก่อการยีนเฉพาะที่น่าสนใจ
และเทอร์มิ) เป็นครั้งที่หกที่ต่ำกว่าในพืชดัดแปรพันธุกรรมที่ได้รับ
ผ่านเชื้อ Agrobacterium เมื่อเทียบกับ
biolistics ส่งผลให้ การเปลี่ยนแปลงที่มีประสิทธิภาพที่สูงขึ้น.
Blackheart พืชทนได้รับโดยไม่คำนึงถึง
transgenes ใช้ สร้างอยู่บนพื้นฐานของความรู้สึก (PPO) antisense ความรู้สึก
(opp.ppo) และ RNA กิ๊บกับ spliceable intron (opp.i.ppo;
opp.cca.i.acc.ppo) ทุกคนมีความสามารถในการก่อให้เกิดของยีนและห้ามไม่ให้พูด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตรวจสอบและมีหลักฐานว่าทั้ง biolistics
และ Agrobacterium โดยเทคโนโลยีการถ่ายโอนยีน
เท่าเทียมกันที่มีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้วิธีการผสมผสานต้านทาน blackheart
ขึ้นอยู่กับยีน silencing RNA โครงสร้างเป็น
'smooth Cayenne ' , เป็นพันธุ์ที่ได้รับยากที่จะปรับปรุง
โดยการปรับปรุงพันธุ์แบบดั้งเดิม การใช้เทคโนโลยีเหล่านี้ และขึ้นอยู่กับ
ผลลัพธ์จากการศึกษาภาคสนามของเรา 15 39 ( 38 % ) ต้นสาย
ภายใต้การประเมินถือว่า blackheart ทนไม่มี
blackheart อาการในสองคนหรือมากกว่าการทดลอง การเลือกครั้งต่อไปคือ ต้องลบที่ไม่พึงประสงค์ออก

แสดงประเภทหรือสายไม่ดี แต่ 5 blackheart ทนสายสุ่มที่แสดง