2. Materials and methods2.1. Peptid

2. Materials and methods
2.1. Peptide synthesis
The peptide antigens for immunoassays and the peptide
immunogens for vaccines were produced by synthesis on
a solid-phase support using an Applied Biosystems Peptide
Synthesiser Model 430A, and Fmoc protection for
the -NH2 terminus and side chain protecting groups of
trifunctional amino acids. Peptides having combinatorial
library Th epitopes were prepared by providing a mixture
of the desired amino acids at the specified positions.
Completed peptides were cleaved from the solid support
and side chain protecting groups removed by 90% trifluoroacetic
acid. Synthetic peptide preparations, except for the
library immunogens, were characterised for correct composition
by matrix-assisted laser desorption time-of-flight
mass spectrometry using a PerSeptive Biosystems/Vestec
LaserTec Benchtop 11 mass spectrometer, and by reverse
phase HPLC. The library immunogen for the vaccine was
characterised by size exclusion chromatography to a speci-
fication that requires 90% of the integrated area to exceed
a mass threshold limit value, and by Edman degradation
for N-terminal amino acid analysis. Liquid phase cyclisation
of the peptide immunogens was accomplished by
dissolving the peptides in water at 0.8 mg/ml, pH 3, adding
DMSO to 1% (v/v) and adjusting to pH 7.5 with NH4OH.
The solution was incubated at ambient temperature in air
and checked daily for 3 days by colorimetric assay using
Ellman’s reagent until disulphide bond formation was at
least 90% complete.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. เปปไทด์สังเคราะห์แอนติเจนของเปปไทด์ immunoassays และเปปไทด์immunogens สำหรับวัคซีนผลิต โดยการสังเคราะห์จากการสนับสนุนเฟสของแข็งใช้เป็นเปปไทด์ใช้ศาสตร์เชิงชีวภาพSynthesiser รุ่น 430A และปกป้อง Fmoc-NH2 เทอร์มินัสและด้านโซ่ป้องกันกลุ่มกรดอะมิโน trifunctional เปปไทด์ที่มี combinatorialไลบรารี Th epitopes วจัดทำขึ้น โดยการให้ส่วนผสมกรดอะมิโนที่ต้องการระบุตำแหน่งซึ่งเปปไทด์ที่เสร็จสมบูรณ์ถูกแหวกจากการสนับสนุนของแข็งและโซ่ด้านข้างป้องกันกลุ่มถูกเอาออก โดย 90% trifluoroaceticกรด การเตรียมการสังเคราะห์เปปไทด์ ยกเว้นสำหรับการไลบรารี immunogens มีลักษณะสำหรับองค์ประกอบที่ถูกต้องเลเซอร์ช่วยเมตริกซ์ราคาเวลาของเที่ยวบินรเมทใช้เป็นศาสตร์เชิง ชีวภาพ/Vestec PerSeptive11 เครื่อง LaserTec มวลสเปกโตรมิเตอร์ และย้อนกลับโดยเฟส HPLC เป็น immunogen ไลบรารีสำหรับวัคซีนโดดเด่น ด้วยขนาดยกเว้น chromatography speci-fication ที่ 90% ของพื้นที่รวมเกินมีมวลค่าจำกัด และ โดยการลด Edmanสำหรับการวิเคราะห์กรดอะมิโน N-เทอร์มินัล เฟสของเหลว cyclisationของเปปไทด์ immunogens ทำได้โดยละลายในน้ำที่ 0.8 mg/ml เปปไทด์เพิ่มค่า pH 3DMSO 1% (v/v) และการปรับค่า pH 7.5 กับ NH4OHโซลูชันมี incubated ที่อุณหภูมิในอากาศและตรวจสอบทุกวัน 3 วันโดยวิเคราะห์เทียบเคียงรีเอเจนต์ของ Ellman จนไดซัลไฟด์ผูกพันก่อตัวท่านอย่างน้อย 90% เสร็จสมบูรณ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 เปปไทด์สังเคราะห์
แอนติเจนเปปไทด์สำหรับ immunoassays และเปปไทด์
ภูมิคุ้มกันสำหรับวัคซีนที่ผลิตโดยการสังเคราะห์ใน
การสนับสนุนเฟสของแข็งโดยใช้แอพพลายด์เปปไทด์
Synthesiser รุ่น 430A และการป้องกัน Fmoc สำหรับ
ปลายทาง -NH2 และด้านห่วงโซ่การปกป้องกลุ่มของ
กรดอะมิโน trifunctional เปปไทด์ที่มี combinatorial
ห้องสมุด Th epitopes ได้จัดทำขึ้นโดยการให้มีส่วนผสม
ของกรดอะมิโนที่ต้องการที่ตำแหน่งที่ระบุ.
เปปไทด์ที่เสร็จสมบูรณ์ถูกตัดจากการสนับสนุนที่แข็งแกร่ง
และโซ่ด้านการปกป้องกลุ่มลบออกโดย TRIFLUOROACETIC 90%
กรด เตรียมเปปไทด์สังเคราะห์ยกเว้น
immunogens ห้องสมุดมีลักษณะองค์ประกอบที่ถูกต้อง
โดย Matrix ช่วยเลเซอร์คายเวลาของเที่ยวบิน
มวลสารใช้ Biosystems PerSeptive / Vestec
Lasertec แบบตั้งโต๊ะ 11 มวลสเปกโตรมิเตอร์และกลับ
HPLC เฟส แอนติเจนห้องสมุดสำหรับการฉีดวัคซีนก็
โดดเด่นด้วยขนาดยกเว้นโครมาโตไป speci-
การตรวจที่ต้องใช้ 90% ของพื้นที่แบบบูรณาการที่จะเกิน
ค่าขีด จำกัด เกณฑ์มวลและการย่อยสลาย Edman
สำหรับ n- ขั้ววิเคราะห์กรดอะมิโน cyclisation ของเหลว
ของ immunogens เปปไทด์ก็ประสบความสำเร็จโดย
การละลายเปปไทด์ในน้ำที่ 0.8 mg / ml, พีเอช 3 เพิ่ม
DMSO 1% (v / v) และการปรับค่าพีเอช 7.5 กับ NH4OH.
ทางออกที่ถูกบ่มที่อุณหภูมิห้องใน อากาศ
และการตรวจสอบทุกวันเป็นเวลา 3 วันโดยการทดสอบสีโดยใช้
น้ำยา Ellman จนก่อพันธบัตร disulphide อยู่ที่
อย่างน้อย 90% เสร็จสมบูรณ์