3.5. Cysteine residuesThe fluoresce

3.5. Cysteine residues
The fluorescence emission of mBrB was used to determine the
number of cysteines residues present in PV2. The emission of mBrB
displayed a clear kinetic behavior with t50=35±1 min. A similar
experiment using BSA, produced a similar kinetic with t50=37±1. A
comparison of the fluorescence saturation value between BSA (with
ca. 35 cysteine residues) and PV2 renders a value of 32 cysteine
residues for the latter.
3.6. Fluorescence quenching experiments
To gain insight about the environment of tryptophan residues in
PV2, fluorescence quenching experiments were performed by
monitoring the acrylamide-induced fluorescence quenching of tryptophan
emission. Increasing amounts of acrylamide scaled down the
emission spectra without any noticeable blue shift as would be
expected for the presence of tryptophan residues with different
solvent exposure [26] (Fig. 3A). To quantify the degree of solvent
exposure of the indole rings, the “sphere of action” quenching model
[26,27] and Eq. (1), a modified form of the Stern-Volmer model, were
Fig. 5. Proteinase K digestion of PV2. The PV2 protein solution (0.25 mM) was incubated
with the indicated concentrations of proteinase K. Products were analyzed on a SDS
polyacrylamide gel (4–15%) and visualized with Coomassie blue.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.5. cysteine ตก
มลพิษ fluorescence ของ mBrB ถูกใช้เพื่อกำหนด
cysteines ตกใน PV2 จำนวน มลพิษของ mBrB
แสดงพฤติกรรมเดิม ๆ ชัดเจนกับ t50 = 35±1 นาที คล้าย
ทดลองใช้บีเอสเอ ผลิตคล้ายเดิม ๆ กับ t50 = 37±1 A
เปรียบเทียบค่าความเข้ม fluorescence ระหว่างบีเอสเอ (ด้วย
ca 35 ตก cysteine) PV2 สภาพค่า 32 cysteine
ตกทัน
3.6 Fluorescence ชุบทดลอง
การเข้าใจเกี่ยวกับสิ่งแวดล้อมของการตกค้างของทริปโตเฟนใน
PV2 ดำเนินโดยทดลองชุบ fluorescence
ติดตามชุบอะคริลาไมด์เกิด fluorescence ของทริปโตเฟน
เล็ดรอด เพิ่มจำนวนของอะคริลาไมด์ที่ปรับลงใน
แรมสเป็คตราเล็ดรอด โดยใด ๆ กะสีน้ำเงินเห็นได้ชัดเป็นจะ
ที่คาดไว้สำหรับของตกค้างทริปโตเฟนพร้อม
สัมผัสตัวทำละลาย [26] (Fig. 3A) วัดปริมาณระดับของตัวทำละลาย
แสงของอินโดลแหวน แบบ quenching "ทรงกลมของการดำเนินการ"
[26,27] และ Eq. (1), แบบฟอร์มแก้ไขรุ่น Volmer สเติร์น
Fig. 5 ย่อยอาหาร proteinase K ของ PV2 โซลูชันโปรตีน PV2 (0.25 mM) ถูก incubated
ด้วยความเข้มข้นที่ระบุของผลิตภัณฑ์คุณถูกวิเคราะห์ใน SDS เป็น proteinase
polyacrylamide เจ (4-15%) และ visualized ด้วย Coomassie บลู

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.5 cysteine ​​ตกค้าง
ปล่อยแสงของ mBrB ถูกใช้ในการกำหนด
จำนวนของสารตกค้างอยู่ใน cysteines PV2 ปล่อย mBrB
แสดงพฤติกรรมการเคลื่อนไหวที่ชัดเจนด้วย T50 = 35 ± 1 นาที คล้าย
การทดลองใช้บีเอสเอที่ผลิตการเคลื่อนไหวในลักษณะเดียวกับ T50 = 37 ± 1
การเปรียบเทียบค่าความอิ่มตัวของแสงระหว่างบีเอสเอ (มี
แคลิฟอร์เนีย. 35 cysteine ​​ตกค้าง) และ PV2 ทำให้ค่าของ 32 cysteine
​​ตกค้างสำหรับหลัง
3.6 การทดลองการเรืองแสงดับ
เพื่อให้ได้รับความรู้ความเข้าใจเกี่ยวกับสภาพแวดล้อมของโพรไบโอตกค้างใน
PV2 ทดลองเรืองแสงดับได้ดำเนินการโดย
การตรวจสอบ acrylamide เกิดดับเรืองแสงของโพรไบโอ
ก๊าซ จำนวนที่เพิ่มขึ้นของ acrylamide ลดขนาดลง
สเปกตรัมการปล่อยโดยไม่ต้องเปลี่ยนสีใด ๆ ที่เห็นได้ชัดเจนจะเป็น
ที่คาดหวังสำหรับการปรากฏตัวของโพรไบโอตกค้างที่แตกต่างกันด้วย
การสัมผัสตัวทำละลาย [26] (รูปที่ 3A) ปริมาณระดับของตัวทำละลาย
สัมผัสของวงอินโดลที่ "ทรงกลมของการกระทำ" รูปแบบการดับ
[26,27] และสมการ (1) รูปแบบการปรับเปลี่ยนรูปแบบของสเติร์น-Volmer เป็น
รูปที่ 5. โปร K ย่อย PV2 การแก้ปัญหาโปรตีน PV2 (0.25 มม. ) ได้รับการบ่ม
ด้วยความเข้มข้นที่ระบุไว้ของโปรเคโปรดักส์ได้รับการวิเคราะห์ใน SDS
polyacrylamide เจล (4-15%) และมองเห็นด้วย Coomassie สีฟ้า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.5 . ซิสเตอีนตกค้างจากการปล่อย mbrb

ศึกษาจำนวน cysteines ตกค้างอยู่ใน pv2 . การปล่อย mbrb
แสดงพฤติกรรมการเคลื่อนไหวที่ชัดเจนกับ t50 = 35 ± 1 นาทีเหมือนกัน
การทดลองใช้บีเอสเอ ผลิตที่คล้ายกันพลังงานจลน์กับ t50 = 37 ± 1 มีการเปรียบเทียบการอิ่มตัว
ค่าระหว่างกลุ่มด้วย
.35 ซิสเตอีนตกค้าง ) และ pv2 แสดงมูลค่า 32 8-12
ตกค้างสำหรับหลัง
3.6 การทดลองการชุบ
เพื่อให้ได้ข้อมูลเชิงลึก เกี่ยวกับสภาพแวดล้อมของทริปตกค้างใน
pv2 เรืองแสงดับทดลองโดยการกระตุ้นสารอะคริลาไมด์

ทริปดับของค่า ปริมาณที่เพิ่มขึ้นของลดขนาดลง
อะคริลาไมด์การปล่อยสเปกตรัม กะสีฟ้า ๆโดยไม่สามารถจะคาดหวังการปรากฏตัวของทริป

ตัวทำละลายตกค้างที่มีการเปิดรับ [ 26 ] ( รูปที่ 3 ) ที่มีระดับของการสัมผัสตัวทำละลาย
ของอินโดลแหวน " วงของการ " ดับนางแบบ
[ 26,27 ] และอีคิว ( 1 ) , แก้ไขรูปแบบโมเดล volmer ท้ายเรือถูก
รูปที่ 5 โปรตีนย่อย pv2 K .การ pv2 โปรตีนโซลูชั่น ( 0.25 มม. ) คือบ่ม
กับพบความเข้มข้นของโปรตีนเคผลิตภัณฑ์วิเคราะห์บน SDS polyacrylamide gel (
4 – 15 % ) และมองเห็นกับเหล่านี้น่าจะเป็นสีฟ้า