The viruses were propagated in epithelioma papulosum cyprini (EPC) cells maintained a 15 C in supplemented Eagle's minimum essential medium (MEM10), which consisted of Eagle's MEM (Gibco®, Invitrogen Co., USA) supplemented with 10% bovine serum (FBS, Gibco®, Invitrogen Co., USA), 100 IU mL 1 penicillin and 100 kig mL streptomycin sulfate. The viruses were harvested after observation of cytopathic effects (CPEs) and centrifuged 12.000 for 10 min at A oc. The culture supernatants were divided into aliquots and stored at -80 oc. viral infectivity was determined in 96-well microplates seeded with EPc cells. After propagating the EPC cells at 15 oC for 14 d, the viral was quantified by determining the 50% tissue culture infective dose (TCID50)
ไวรัสที่ถูกแพร่กระจายในเซลล์ Epithelioma papulosum cyprini (EPC) เซลล์รักษา 15 C ในสื่อที่จำเป็นเสริมอินทรีขั้นต่ำ (MEM10) ซึ่งประกอบไปด้วยนกอินทรี MEM (Gibco®, Invitrogen Co. , USA) เสริมด้วยซีรั่มวัว 10% (FBS, Gibco®, Invitrogen Co. , USA) 100 IU มล 1 penicillin และ 100 มล KIG ซัลเฟต streptomycin ไวรัสที่ถูกเก็บเกี่ยวหลังจากการสังเกตของผล cytopathic (CPEs) และหมุนเหวี่ยง 12.000 เป็นเวลา 10 นาทีที่ A OC supernatants วัฒนธรรมถูกแบ่งออกเป็น aliquots และเก็บไว้ที่ -80 OC การติดเชื้อไวรัสที่ถูกกำหนดใน 96 หลุม microplates เมล็ดกับเซลล์ EPC หลังจากการแพร่กระจายของเซลล์ EPC ที่ 15 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 14 D, ไวรัสที่ถูกวัดโดยกำหนด 50% การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อติดเชื้อยา (TCID50)
การแปล กรุณารอสักครู่..
