2.4. Root dippingDue to the shortag

2.4. Root dipping
Due to the shortage of pine seedlings, only one fungal isolate
(F668) was used in this experiment. Root dip coatings were prepared
with either Xan (0.2%) or MC (2%) as described above. In total,
four root dip treatments were prepared: 1. F668 Xan, 2. F668
MC, 3. Control Xan (no fungi), 4. Control MC (no fungi).
Batches of 10 surface sterilised P. radiata seeds were placed on
sterile filter paper moistened with sterile distilled water in 55 mm
Petri dishes. Dishes were placed in the dark at 20 C for 2–3 weeks
until the seeds germinated. When the radicle on germinated seeds
was 2–3 cm long, they were inoculated with F668 or the blank
coatings described above. Each radicle was inoculated by holding
seeds in sterilised forceps and dipping the root into the coating
suspension for 10 s, after which the seedlings were placed in a sterile
Petri dish to allow the coating to air-dry. Treated seedlings were
individually planted into 6-Paks containing Garden Grow compost
(South-Hort, NZ) and grown in a greenhouse at approximately
20 C, transplanting into PB bags at 8 weeks old. Seedlings were
watered weekly for the remainder of the trial.
Radicle loadings were determined by placing a coated root into
5 mL of sterile 0.01% Triton X-100 in a sterile 20 mL plastic tube.
Roots were allowed to soak for 10 min to rehydrate the coating,
and tubes were then shaken on a wrist shaker set at maximum
for a further 10 min. Serial dilutions were prepared from the stock
suspension and 100 lL aliquots plated onto BSM. Two repli-plates
were prepared for each dilution. Plates were incubated at 20 C and
cfus counted after 10 days. Radicle loadings for the F668 treatments
were 1.3 107 conidia for the MC treatment and
2.13 106 for the Xan treatment. At 2, 4 and 9 months after germination
five seedlings from each treatment were randomly chosen
and destructively sampled as described below.
2.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การจุ่มรากเนื่องจากขาดแคลนของกล้าไม้สน เพียงหนึ่งเชื้อราเพราะ(F668) ถูกใช้ในการทดลองนี้ รากแช่น้ำเคลือบเตรียมไว้Xan (0.2%) หรือ MC (2%) ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น รวม4 รากแช่น้ำรักษาได้เตรียม: 1. F668 Xan, 2. F668MC, 3 ควบคุม Xan (ไม่เชื้อรา), 4 ควบคุม MC (ไม่เชื้อรา)ชุดของพื้นผิว 10 sterilised radiata P. เมล็ดใส่ในกระดาษกรองใส่ moistened ด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อใน 55 มม.จาน petri อาหารไว้ในมืดที่ 20 C 2 – 3 สัปดาห์เมล็ดเปลือกงอกจนกว่า เมื่อ radicle บนเปลือกงอกเมล็ดมี 2-3 ซม.ยาว จะได้ inoculated กับ F668 หรือว่างเปล่าไม้แปรรูปที่อธิบายไว้ข้างต้น แต่ละ radicle ถูก inoculated โดยถือsterilised คีมและจุ่มรากเป็นการเคลือบเมล็ดหยุด 10 s หลังจากกล้าไม้ถูกวางในการฆ่าเชื้อจานเพาะเชื้อให้เคลือบเพื่อ air-dry กล้าไม้ที่บำบัดได้แยกปลูกเป็นปุ๋ยปลูกสวนที่มี 6-Paks(Hort ใต้ นิวซีแลนด์) และปลูกในเรือนกระจกที่ประมาณ20 C, transplanting เป็นถุง PB ที่อายุ 8 สัปดาห์ กล้าไม้ได้ผู้รายสัปดาห์ส่วนที่เหลือของการทดลองRadicle loadings ถูกกำหนดด้วยเคลือบรากเป็น5 mL ของกอซ 0.01% 100 X ไตรตั้นในพลาสติก 20 mL ใส่หลอดรากได้รับอนุญาตให้แช่ใน 10 นาทีการ rehydrate เคลือบและท่อถูกเขย่าในเชคเกอร์ข้อมือการตั้งค่าที่สูงสุดแล้วสำหรับ 10 นาทีเติม dilutions ประจำถูกเตรียมจากหุ้นระงับและ aliquots จะ 100 ชุบลงในเรา Repli แผ่นสองถูกเตรียมไว้สำหรับเจือจางแต่ละ แผ่นก็ incubated ที่ 20 C และcfus นับหลังจากวันที่ 10 Radicle loadings สำหรับรักษา F668ได้ 1.3 conidia 107 MC รักษา และ2.13 106 รักษา Xan ที่ 2, 4 และ 9 เดือนหลังจากการงอกกล้าไม้ 5 จากทรีตเมนท์ที่ถูกเลือกแบบสุ่มและตัวอย่างแก่ชีวิตตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง2.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 จุ่มราก
เนื่องจากปัญหาการขาดแคลนต้นกล้าสนเพียงหนึ่งเชื้อราไอโซเลต
(F668) ที่ใช้ในการทดลองนี้ รากไม้แปรรูปแช่ได้จัดทำ
กับทั้ง Xan (0.2%) หรือ MC (2%) ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ทั้งหมด
สี่การรักษาจุ่มรากได้จัดทำ 1. F668 Xan 2. F668
. MC, 3. ควบคุม Xan (เชื้อราไม่) 4. ควบคุม MC (เชื้อราไม่มี)
แบทช์ 10 พื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อ P. เมล็ด radiata ถูกวางไว้บน
กระดาษกรองหมันชุบน้ำกลั่นปลอดเชื้อใน 55 มม
จานเลี้ยงเชื้อ อาหารถูกวางไว้ในที่มืดที่ 20 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2-3 สัปดาห์
จนกว่าเมล็ดงอก เมื่อ radicle เมล็ดงอก
เป็น 2-3 เซนติเมตรยาวพวกเขาได้รับเชื้อด้วย F668 หรือเปล่า
เคลือบอธิบายไว้ข้างต้น radicle แต่ละคนได้รับเชื้อโดยถือ
เมล็ดในคีมผ่านการฆ่าเชื้อและจุ่มรากลงไปในการเคลือบ
ระงับสำหรับ 10 วินาทีหลังจากที่ต้นกล้าถูกวางไว้ในการฆ่าเชื้อ
จานเลี้ยงเชื้อเพื่อให้การเคลือบที่มีอากาศแห้ง ต้นกล้าที่ได้รับการรักษาที่ถูก
ปลูกเป็นรายบุคคลเป็น 6-Paks มีสวนเติบโตปุ๋ยหมัก
(South-Hort, NZ) และที่ปลูกในเรือนกระจกที่ประมาณ
20 C, ปลูกลงในถุง PB ที่ 8 สัปดาห์ ต้นกล้าถูก
รดน้ำสัปดาห์สำหรับส่วนที่เหลือของการพิจารณาคดี.
loadings Radicle ถูกกำหนดโดยการวางรากเคลือบเป็น
5 มิลลิลิตรหมัน 0.01% Triton X-100 ในการฆ่าเชื้อ 20 มิลลิลิตรหลอดพลาสติก.
รากได้รับอนุญาตให้แช่เป็นเวลา 10 นาทีเพื่อ rehydrate เคลือบ
และท่อถูกเขย่าจากนั้นในการปั่นข้อมือชุดที่สูงสุด
ไปอีก 10 นาที เจือจางอนุกรมที่เตรียมจากหุ้น
ระงับและ 100 ส่วนลงตัว lL ชุบบน BSM สองแผ่น Repli
กำลังเตรียมพร้อมสำหรับการเจือจางแต่ละ แผ่นบ่มที่อุณหภูมิ 20 C และ
CFUs นับหลังจาก 10 วัน แรง radicle สำหรับการรักษา F668
เป็น 1.3 107 สปอร์สำหรับการรักษาพิธีกรและ
2.13 106 สำหรับการรักษา Xan ที่ 2, 4 และ 9 เดือนหลังจากงอก
ห้าต้นกล้าจากการรักษาแต่ละถูกสุ่มเลือก
ตัวอย่างและทำลายตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง.
2.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . รากจุ่ม
เนื่องจากการขาดแคลนของต้นสนต้นเดียวแยกเชื้อรา
( f668 ) เป็นเครื่องมือที่ใช้ในการทดลองครั้งนี้ เคลือบรากจุ่มเตรียม
กับแซน ( 0.2% ) หรือ MC ( 2% ) ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น รวม ,
4 รากจุ่มทรีทเม้นต์เตรียม : 1 f668 แซน 2 f668
MC 3 แซนควบคุม ( ไม่มีเชื้อรา ) , 4 . พิธีกรควบคุม ( ไม่มีเชื้อรา ) .
ชุด 10 พื้นผิว sterilised radiata เมล็ดวางบน
Pกระดาษกรองชุบน้ำกลั่นฆ่าเชื้อฆ่าเชื้อใน 55 mm
จานเพาะเลี้ยง อาหารถูกวางไว้ในที่มืดที่อุณหภูมิ 20 C 2 – 3 สัปดาห์
จนกว่าเมล็ดงอก . เมื่อรากบนเมล็ดงอก
ยาว 2 – 3 เซนติเมตร พวกเขาใส่ f668 หรือเปล่า
เคลือบที่อธิบายข้างต้น แต่ละรากเป็นเชื้อถือ
เมล็ดใน sterilised คีมและจุ่มรากลงไปเคลือบ
ระงับ 10 หลังจากที่ต้นกล้าถูกวางไว้ในจาน Petri เป็นหมัน
ให้เคลือบกับอากาศแห้ง รักษาต้นกล้าถูก
แบบปลูกลง 6-paks ที่มีสวนปลูกปุ๋ยหมัก
( ใต้ปากช่อง , NZ ) และปลูกในเรือนกระจกที่
20 C ประมาณ ปลูกลงในถุงดินที่อายุ 8 สัปดาห์ ต้นกล้าถูก
รดน้ำรายสัปดาห์สำหรับส่วนที่เหลือของการทดลอง .
รากแรกเกิดภาระถูกกำหนดโดยวางรากเคลือบใน
5 มิลลิลิตร หมัน 0.01 % Triton X-100 ในหลอดพลาสติกปลอดเชื้อ 20 ml .
รากได้รับอนุญาตให้แช่เป็นเวลา 10 นาที เพื่อให้น้ำเกลือเคลือบ
และหลอดแล้วเขย่าบนข้อมือ Shaker ชุดสูงสุด
สำหรับอีก 10 นาที วิธีการเตรียมอนุกรม จากหุ้น
ระงับและ 100 จะเฉยๆ ชุบลงบนเรา . repli
2 แผ่นถูกเตรียมไว้สำหรับแต่ละเจือจาง จานถูกบ่มที่อุณหภูมิ 20 C
cfus นับหลังจาก 10 วัน ราก loadings สำหรับ f668 รักษา
เป็น 1.3 107 โคนิสำหรับพิธีกรและการรักษา
2.13 106 สำหรับการรักษาแซน . ที่ 2 , 4 และ 9 เดือนหลังจากที่งอก
5 ต้นกล้าจากการรักษาแต่ละวิธีทำลายตัวอย่างและสุ่มเลือก

2.5 ตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง