An 5mm disc of mycelium from positi

An 5mm disc of mycelium from positive agar plate was used as inoculum for asparaginase production under liquid
state using modified Czapex dox’s broth, for 120 h at 370C with shaking at 200 rpm. The activity of enzyme was
determine in filtrate by means of Nesslerization as described by Imada [7].The substrate was prepared in 0.05M tris
(hydroxymethyl) amino methane (tris HCl) (pH 7.2), giving final concentration of 0.04M. The reaction mixture
contains 200μl of 0.04 M asparagine in 0.05 M tris HCl buffer, 100μl of 0.05 M tris HCl buffer (PH 7.2), 100μl
distilled water and 100μl of crude enzyme which was obtained from the culture filtrate .The samples were incubated
at 370C for 60 min and to stop reaction 100μl of 1.5M tichloroacetic acid (TCA) was added.100μl of mixture was
than mixed with 750μl distilled water and than nesslers reagent was added and for all incubation was allowed at
200C for 20 min. All reactions were measured spectrophotometrically at 450nm.One unit of asparaginase is the
amount of enzyme which catalyses the formation of 1μmol of ammonia per min at 370C. Asparaginase was partially
purified by following steps (A-D)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้แผ่นดิสก์การ 5 มม.ของเส้นใยของมันจากแผ่นวุ้นบวกเป็น inoculum asparaginase ผลิตภายใต้ของเหลวโดยแก้ไขซุป Czapex dox สำหรับ h 120 ที่ 370C กับเขย่าที่ 200 รอบต่อนาที กิจกรรมของเอนไซม์ได้กำหนดระบบการกรองโดยวิธี Nesslerization ตามที่อธิบายไว้ โดย Imada [7] จัดเตรียมพื้นผิวในทริ 0.05Mก๊าซมีเทนและกรดอะมิโน (hydroxymethyl) (บริษัททริสเรทติ้ง HCl เข้มข้นสุดท้ายให้ (pH 7.2), 0.04 เมตร ส่วนผสมของปฏิกิริยาประกอบด้วย 200μl ของ asparagine 0.04 M ในบัฟเฟอร์ 0.05 M ทริสเรทติ้ง HCl, 100μl 0.05 M ทริสเรทติ้ง HCl บัฟเฟอร์ (PH 7.2), 100μlกลั่นน้ำและ 100μl ของเอนไซม์ดิบซึ่งมาจากการกรองวัฒนธรรม ตัวอย่างได้รับการกกที่ 370C สำหรับ 60 นาที และหยุดปฏิกิริยา 100μl รด tichloroacetic 1.5M (TCA) แก้ไขเป็น added.100μl ส่วนผสมกว่าที่ผสมกับน้ำกลั่น 750μl และ กว่าเพิ่ม nesslers รีเอเจนต์ และกกไข่ทั้งหมดได้รับอนุญาตที่200C 20 นาที ปฏิกิริยาทั้งหมดที่วัด spectrophotometrically ที่ 450nm เป็นหน่วยหนึ่งของ asparaginaseปริมาณของเอนไซม์ catalyses ซึ่งการก่อตัวของ 1μmol ของแอมโมเนียต่อนาทีที่ 370 c Asparaginase แก้ไขบางส่วนบริสุทธิ์ โดยทำตามขั้นตอน (A-D)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แผ่น 5mm ของเส้นใยจากจานเลี้ยงเชื้อบวกถูกใช้เป็นหัวเชื้อในการผลิตแอสปาราภายใต้ของเหลว
รัฐใช้การแก้ไขน้ำซุป Czapex Dox ของ 120 ชั่วโมงที่ 370C เขย่าที่ 200 รอบต่อนาที กิจกรรมของเอนไซม์เป็น
ตัวกำหนดในการกรองโดยวิธีการของ nesslerization ตามที่อธิบาย Imada [7] พื้นผิวได้โดยง่ายถูกจัดทำขึ้นใน 0.05M ทริสเรทติ้ง
(hydroxymethyl) ก๊าซมีเทนอะมิโน (ทริสเรทติ้ง HCl) (pH 7.2) ทำให้ความเข้มข้นสุดท้ายของ 0.04M ผสมปฏิกิริยา
มี200μl 0.04 M asparagine ในทริสเรทติ้ง 0.05 M HCl บัฟเฟอร์100μl 0.05 M HCl ทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์ (PH 7.2) 100μl
น้ำกลั่นและ100μlของเอนไซม์ที่ได้รับจากการกรองวัฒนธรรมตัวอย่างได้โดยเริ่มต้นถูกบ่ม
ที่ 370C สำหรับ 60 นาทีและจะหยุด100μlปฏิกิริยาของกรด 1.5M tichloroacetic (TCA) เป็นadded.100μlของส่วนผสมที่ถูก
กว่าผสมกับ750μlน้ำกลั่นและกว่า nesslers น้ำยาถูกเพิ่มเข้ามาและการบ่มทั้งหมดได้รับอนุญาตที่
200C เป็นเวลา 20 นาที ปฏิกิริยาทั้งหมดถูกวัด spectrophotometrically ที่ 450nm.One หน่วยของแอสปาราเป็น
ปริมาณของเอนไซม์ที่เร่งการก่อตัวของ1μmolของแอมโมเนียต่อนาทีที่ 370C แอสปาราถูกบางส่วน
บริสุทธิ์โดยทำตามขั้นตอน (AD)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มี 5 แผ่นของเส้นใยจากจานวุ้นบวกมาใช้เป็นเชื้อผลิตเอนไซม์แอสพาราจิเนสในของเหลวรัฐใช้ดัดแปลงซุป czapex Dox , 120 H ที่ 370c เขย่า 200 รอบต่อนาที กิจกรรมของเอนไซม์คือกำหนดในการกรองโดยใช้วิธีเนสเลอไรเซชัน ตามที่อธิบายไว้โดยมาดะ [ 7 ] . ( เตรียมใน 0.05m ทริส( ซี ) มีก๊าซมีเทน ( ทริส HCl ) ( pH 7.2 ) ให้ความเข้มข้นสุดท้าย 0.04m ปฏิกิริยาผสมมี 200 μผม 0.04 M asparagine ใน 0.05 M HCl จากบัฟเฟอร์ 100 μ 0.05 M หรือ L ไฮโดรคลอไรด์บัฟเฟอร์ pH 7.2 ) 100 μ lน้ำกลั่นและ 100 μ L ของเอนไซม์ที่ได้จากการเพาะบ่ม กลุ่มตัวอย่างที่ 370c 60 นาที และหยุดปฏิกิริยาμ 100 ลิตร 1.5 เมตร tichloroacetic acid ( TCA ) เพิ่ม 100 μลิตรผสมกว่า 750 μลิตรผสมกับน้ำกลั่นและกว่า nesslers รีเอเจนต์ถูกเพิ่มสำหรับการบ่มได้รับอนุญาตที่200 องศาเซลเซียส 20 นาที ทุกวัดในปฏิกิริยานี้ 450nm หนึ่งหน่วยของเอนไซม์แอสพาราจิเนส คือปริมาณของเอนไซม์ซึ่งพันธุ์ เกิด 1 μโมลของแอมโมเนียต่อนาทีที่ 370c . นกฟิวแฟร์บางส่วนบริสุทธิ์ โดยขั้นตอนต่อไปนี้ ( AD )