2.6. Free radical scavenging activi

2.6. Free radical scavenging activity

In order to determine the free radical scavenging activity of the extracts the following parameters were assayed. DPPH Radical scavenging was determined by the method of Gadow et al. (1997) with minor modifications. Hydroxyl radical scavenging activity was measured by studying the competition between deoxyribose and the extract for hydroxyl radicals generated from the Fe3+/ascorbate/EDTA/H2O2 system. The hydroxyl radicals attack deoxyribose, which result in thio barbituric acid reacting substance (TBARS) formation (Elizabeth and Rao, 1990).

2.7. Hepatoprotective activity

A total of 35 animals were equally divided into 7 groups of five each. Group I served as normal control without any treatment. Animals of groups II, III, IV, V, VI and VII were administered with paracetamol (150 mg/kg orally after 18 h starvation) as single dose to induce hepatotoxicity, Group II served as paracetamol control. One hour after the paracetamol treatment, Group III served as positive control and received silymarin (75 mg/kg body weight) orally, Group IV and Group V were orally administered with APE 100 and 200 mg/kg and group VI and VII with SCE 100 and 200 mg/kg, respectively. Paracetamol was made into a suspension in 0.1% carboxy methyl cellulose. The plant extracts and silymarin were dissolved in sterile distilled water for oral administration to animals. A group exclusively treated with carboxy methyl cellulose was not kept, since it was reported to be non toxic (Eberhardt et al., 2006). It may be noted that higher doses (300–1000 mg/kg) of paracetamol were used to induce hepatotoxicity in mice in several reports (Chengelis et al., 1986 and Xia et al., 2009). In our laboratory, our earlier studies showed induction of mortality in mice following paracetamol administration at doses 200 mg/kg or above. The differences in the responses of mice observed in our study from that of the previously reported ones could be due to the 18 h starvation prior to administration of paracetamol or due to the strain difference. After 24 h of the paracetamol treatment, blood was collected and serum was separated for the biochemical investigations. The liver was removed for investigations on oxidative stress (antioxidant profiles) and histopathological alterations.

2.7.1. Assessment of liver marker enzymes and antioxidants

Serum biochemical parameters such as glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT) (Reitman and Frankal, 1975), alkaline phosphatase (ALP) (Kind and King, 1954) and serum bilirubin (Malloy and Evelyn, 1937) were analyzed according to the reported methods. The liver homogenates (10% w/v) prepared in phosphate-buffered saline (PBS containing 137 mM NaCl, 2.68 mM KCl, 10.14 mM Na2HPO4 and 1.76 mM KH2PO4 in 1000 ml distilled water) were used for antioxidant studies such as lipid peroxidation (LPO) (Buege and Aust, 1978), superoxide dismutase (SOD) (McCord and Fridovich, 1969), glutathione peroxidase (GPx) (Hafemann et al., 1974) and reduced glutathione (GSH) (Moron et al., 1979).

2.7.2. Histopathological studies

Liver slices were fixed in 10% formalin and embedded in paraffin wax. Sections of 5 micron thickness were made using a microtome and stained with haematoxylin-eosin and observed under microscope. Photographs of each of the slides were taken at 40× magnification.

2.8. Statistical analysis

The results are presented as mean ± SD of the studied group. Statistical analyses of the results were performed using ANOVA with Tukey–Kramer multiple comparisons test.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6. อนุมูลอิสระ scavenging กิจกรรมเพื่อกำหนดกิจกรรม scavenging อนุมูลอิสระของสารสกัดจากพารามิเตอร์ต่อไปนี้ถูก assayed รุนแรงของ DPPH scavenging ถูกกำหนด โดยวิธีของ Gadow et al. (1997) มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย กิจกรรม scavenging รุนแรงไฮดรอกซิลถูกวัด โดยศึกษาการแข่งขันระหว่าง deoxyribose และสารสกัดสำหรับอนุมูลไฮดรอกซิลที่สร้างขึ้นจาก Fe3 + /mts ascorbate EDTA/H2O2 ระบบ อนุมูลไฮดรอกซิลโจมตี deoxyribose ซึ่งทำให้กรด barbituric thio ปฏิกิริยาการก่อตัวของสาร (TBARS) (เอลิซาเบธและราว 1990)2.7 กิจกรรม Hepatoprotectiveเท่า ๆ กันจำนวน 35 สัตว์ถูกแบ่งให้กลุ่ม 7 ห้าละ กลุ่มที่ผมทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมปกติโดยไม่มีการรักษาใด ๆ สัตว์กลุ่ม II, III, IV, V, VI และ VII ได้จัดการกับพาราเซตามอล (150 mg/kg หลังจากความอดอยาก 18 h เนื้อหา) เป็นยาเดี่ยวชวน hepatotoxicity กลุ่ม II เป็นพาราเซตามอลควบคุม หนึ่งชั่วโมงหลังการรักษาพาราเซตามอล กลุ่ม III เป็นควบคุมบวก และรับ silymarin (75 mg/kg น้ำหนักตัว) เนื้อหา กลุ่ม IV และ V กลุ่มมีเนื้อหาจัดการกับ APE 100 และ 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม และกลุ่ม VI และ VII SCE 100 และ 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ตามลำดับ พาราเซตามอลทำการเข้าระงับใน 0.1% carboxy methyl เซลลูโลส สารสกัดจากพืช และ silymarin มีละลายในน้ำกลั่นฆ่าเชื้อในปากจัดการสัตว์ กลุ่มโดยเฉพาะรักษา ด้วย carboxy methyl เซลลูโลสมีการเก็บไว้ ไม่เนื่องจากมีรายงานต้อง ไม่เป็นพิษ (Eberhardt และ al., 2006) มันอาจบันทึกว่า ใช้ปริมาณสูง (300 – 1000 mg/kg) ของพาราเซตามอลเพื่อก่อให้เกิด hepatotoxicity ในหนูในหลายรายงาน (Chengelis et al., 1986 และเซี่ย et al., 2009) ในห้องปฏิบัติการของเรา ของเราเหนี่ยวนำแสดงให้เห็นว่าการศึกษาก่อนหน้านี้ของการตายในหนูต่อด้านบริหารพาราเซตามอลปริมาณ 200 mg/kg หรือสูงกว่า ความแตกต่างในการตอบสนองของหนูที่พบในการศึกษาของเราจากที่รายงานไปก่อนหน้านี้อาจจะเนื่อง จากความอดอยาก 18 h ก่อนของพาราเซตามอล หรือต่างต้องใช้ หลังจาก 24 ชมของการรักษาพาราเซตามอล เลือดรวบรวม และซีรั่มที่แยกสำหรับการสืบสวนเชิงชีวเคมี ตับถูกเอาออกสำหรับตรวจสอบในความเครียด oxidative (ส่วนกำหนดค่าของสารต้านอนุมูลอิสระ) และการเปลี่ยนแปลง histopathological2.7.1 การประเมินเครื่องตับเอนไซม์และสารต้านอนุมูลอิสระเซรั่มพารามิเตอร์ชีวเคมีเช่น glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT) (Reitman และ Frankal, 1975), อัลคาไลน์ฟอสฟาเตส (แอลป์) (ชนิดและคิง 1954) และ serum bilirubin (Malloy และ Evelyn, 1937) ได้วิเคราะห์ตามวิธีการรายงานการ ตับ homogenates (10% w/v) เตรียมใน buffered ฟอสเฟตน้ำเกลือ (PBS ประกอบด้วย 137 มม. NaCl, 2.68 mM KCl, 10.14 มม. Na2HPO4 และ 1.76 มม. KH2PO4 ในน้ำ 1000 ml กลั่น) ใช้สำหรับการศึกษาสารต้านอนุมูลอิสระเช่น peroxidation ของไขมัน (LPO) (Buege และบริษัท 1978), ซูเปอร์ออกไซด์ dismutase (SOD) (McCord และ Fridovich, 1969), ไธ peroxidase (GPx) (Hafemann et al., 1974) และกลูตาไธโอน (GSH) (ปัญญาอ่อน et al ลดลง , 1979)2.7.2. histopathological ศึกษาตับชิ้นถาวรใน 10% formalin และฝังในพาราฟิน ส่วนของความหนา 5 ไมครอนถูกทำโดยใช้การ microtome และสีกับ haematoxylin eosin และสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์ ภาพแต่ละภาพนิ่งที่ถ่ายที่ขยาย× 402.8. สถิติวิเคราะห์ผลลัพธ์จะแสดงเป็นหมายถึง ± SD ของกลุ่ม studied วิเคราะห์ทางสถิติของผลได้ดำเนินการโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนกับ Tukey – Kramer ทดสอบเปรียบเทียบหลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 ฟรีต้านอนุมูลอิสระเพื่อตรวจสอบกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดจากพารามิเตอร์ต่อไปนี้ถูก assayed DPPH ไล่หัวรุนแรงถูกกำหนดโดยวิธีการ Gadow et al, (1997) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ไฮดรอกซิต้านอนุมูลอิสระโดยวัดจากการศึกษาการแข่งขันระหว่าง Deoxyribose และสารสกัดอนุมูลไฮดรอกสร้างขึ้นจาก Fe3 + / ascorbate / EDTA / ระบบ H2O2 อนุมูลไฮดรอกซิโจมตี Deoxyribose ซึ่งส่งผลให้เกิดกรด thio barbituric ปฏิกิริยาสาร (TBARS) การสร้าง (ลิซาเบ ธ และราว 1990). 2.7 กิจกรรมตับรวม 35 สัตว์ที่ถูกแบ่งเป็น 7 กลุ่มห้าแต่ละ กลุ่มที่ทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุมตามปกติโดยไม่ต้องรักษาใด ๆ สัตว์ในกลุ่มที่สองที่สามสี่ห้าหกและปกเกล้าเจ้าอยู่หัวเป็นยาที่มียาพาราเซตามอล (150 mg / kg รับประทานหลังจากอดอาหาร 18 ชั่วโมง) เป็นครั้งเดียวที่จะทำให้เกิดพิษต่อตับ, กลุ่มที่สองทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุมยาพาราเซตามอล หนึ่งชั่วโมงหลังการรักษายาพาราเซตามอลที่กลุ่มที่สามทำหน้าที่ควบคุมบวกและได้รับ silymarin (75 มิลลิกรัม / กิโลกรัมน้ำหนักตัว) ปากเปล่ากลุ่ม IV และกลุ่ม V ถูกปากเปล่ากับ APE 100 และ 200 มก. / กก. และกลุ่มที่หกและเจ็ดกับ SCE 100 และ 200 มิลลิกรัม / กิโลกรัมตามลำดับ พาราเซตามอลกลายเป็นระงับใน 0.1% เซลลูโลสเมธิล Carboxy สารสกัดจากพืชและ silymarin ละลายในน้ำกลั่นปลอดเชื้อสำหรับการบริหารช่องปากกับสัตว์ กลุ่มที่ได้รับการรักษาเฉพาะกับเมธิลเซลลูโลส Carboxy ไม่ได้เก็บไว้เพราะมันก็จะไม่เป็นพิษ (Eberhardt et al., 2006) มันอาจจะตั้งข้อสังเกตว่าปริมาณที่สูงขึ้น (300-1000 มิลลิกรัม / กิโลกรัม) ของยาพาราเซตามอลถูกนำมาใช้เพื่อก่อให้เกิดพิษต่อตับในหนูในรายงานหลายคน (Chengelis et al., 1986 และเซี่ย et al., 2009) ในห้องปฏิบัติการของเรา, การศึกษาก่อนหน้าของเราแสดงให้เห็นว่าการเหนี่ยวนำของการตายในหนูต่อไปนี้การบริหารยาพาราเซตามอลในปริมาณ 200 มก. / กก. หรือสูงกว่า ความแตกต่างในการตอบสนองของหนูตั้งข้อสังเกตในการศึกษาของเราจากที่ของคนที่รายงานก่อนหน้านี้อาจจะเป็นเพราะความอดอยาก 18 ชั่วโมงก่อนที่จะมีการบริหารงานของยาพาราเซตามอลหรือเนื่องจากความแตกต่างสายพันธุ์ หลังจาก 24 ชั่วโมงของการรักษายาพาราเซตามอลเลือดถูกเก็บรวบรวมและซีรั่มถูกแยกออกมาสำหรับการตรวจสอบทางชีวเคมี ตับจะถูกลบออกสำหรับการตรวจสอบในความเครียดออกซิเดชัน (โปรไฟล์สารต้านอนุมูลอิสระ) และการเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยา. 2.7.1 การประเมินผลของเอนไซม์เครื่องหมายตับและสารต้านอนุมูลอิสระพารามิเตอร์ทางชีวเคมีเซรั่มเช่นกลูตาเมต oxaloacetate transaminase (GOT) ไพรูกลูตาเมต transaminase (GPT) (Reitman และ Frankal, 1975), ด่าง phosphatase (ALP) (ชนิดและพระมหากษัตริย์, 1954) และบิลิรูบินในซีรั่ม (ลอย และ Evelyn, 1937) ถูกนำมาวิเคราะห์ตามวิธีการรายงาน homogenates ตับ (10% w / v) จัดทำขึ้นน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอสที่มี 137 มิลลิโซเดียมคลอไรด์, 2.68 มิลลิ KCl, 10.14 มิลลิ Na2HPO4 และ 1.76 มิลลิ KH2PO4 1000 มล. น้ำกลั่น) ถูกนำมาใช้เพื่อการศึกษาสารต้านอนุมูลอิสระเช่นไขมัน peroxidation ( LPO) (Buege และ Aust, 1978), superoxide dismutase (SOD) (McCord และ Fridovich, 1969), peroxidase กลูตาไธโอน (GPx) (Hafemann et al., 1974) และกลูตาไธโอนที่ลดลง (GSH) (Moron et al., 1979) . 2.7.2 การศึกษาทางจุลพยาธิวิทยาชิ้นตับได้รับการแก้ไขในฟอร์มาลิน 10% และฝังตัวอยู่ในขี้ผึ้งพาราฟิน ในส่วนของความหนา 5 ไมครอนถูกสร้างขึ้นมาโดยใช้ microtome และย้อมด้วยสี haematoxylin-Eosin และสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์ ภาพของแต่ละภาพนิ่งถูกถ่ายที่ 40 ×ขยาย. 2.8 การวิเคราะห์ทางสถิติผลที่แสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD ของกลุ่มการศึกษา การวิเคราะห์ทางสถิติของผลลัพธ์ที่ได้ดำเนินการโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนด้วย Tukey-เครเมอหลายการทดสอบเปรียบเทียบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 กำจัดอนุมูลอิสระ

ในการกำจัดอนุมูลอิสระของสารสกัดพารามิเตอร์ต่อไปนี้ถูก assayed . dpph เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาได้ถูกกำหนดโดยวิธีการของ gadow et al . ( 1997 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยเอชทีทีพีการกิจกรรมวัดโดยการศึกษาการแข่งขันระหว่าง ดีออกซีไรโบส และหมู่ไฮดรอกซิลที่สร้างจากสารสกัดสำหรับ fe3 / เปลี่ยนแปลง / EDTA / แบตเตอรี่ระบบ อนุมูลไฮดรอกซิลโจมตีดีออกซีไรโบส ซึ่งส่งผลให้ทิวกรดบาร์บิทูริกปฏิกิริยาสาร ( ปกติ ) รูปแบบ ( อลิซาเบ็ธ และ Rao , 1990 ) .

2.7 . ป้องกันกิจกรรม

ทั้งหมด 35 สัตว์ถูกแบ่งออกเป็น 7 กลุ่มๆ ละ 5 คน กลุ่มผมทำหน้าที่ควบคุมปกติ โดยไม่มีการรักษาใด ๆ สัตว์กลุ่มที่ II , III , IV , V , VI VII และศึกษากับพาราเซตามอล ( 150 มิลลิกรัม / กิโลกรัม รับประทานหลัง 18 ชั่วโมงความอดอยาก ) เป็นครั้งเดียวที่ทำให้เกิดพิษต่อตับในกลุ่มทำหน้าที่เป็นยาควบคุม หนึ่งชั่วโมงหลังจากการรักษาด้วยพาราเซตามอล3 กลุ่มควบคุมได้รับหน้าที่เป็นบวกและซิลิมาริน ( 75 มิลลิกรัมต่อน้ำหนักตัว 1 กิโลกรัม ) โดย กลุ่ม 4 และกลุ่มที่ 5 คือ รับประทานได้รับ APE 100 และ 200 มิลลิกรัม / กิโลกรัม และ 6 กลุ่ม และ 7 กับ SCE 100 และ 200 มิลลิกรัม / กิโลกรัม ตามลำดับ พาราเซตามอลก็ทำให้ระงับใน 0.1% คาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลสสารสกัดจากพืช และไซลิมารินถูกละลายในน้ำกลั่นปราศจากเชื้อในช่องปากดูแลสัตว์ กลุ่ม โดยเฉพาะการรักษาด้วยคาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลสไม่เก็บ เพราะมีรายงานต้องปลอดสารพิษ ( eberhardt et al . , 2006 ) อาจจะสังเกตได้ว่าปริมาณสูง ( 300 และ 1000 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม ) ของยาถูกใช้เพื่อก่อให้เกิดพิษในหนูในรายงานต่าง ๆ ( chengelis et al . ,1986 และ Xia et al . , 2009 ) ในห้องปฏิบัติการของเรา การศึกษาก่อนหน้านี้พบว่าอัตราการตายในหนูที่เหนี่ยวนำของเราต่อไปนี้พาราเซตามอลการบริหารในขนาด 200 มก. / กก. ขึ้นไป ความแตกต่างในการตอบสนองของหนูที่พบในการศึกษาของเราจากที่รายงานก่อนหน้านี้ที่อาจจะเกิดจาก 18 H การอดอาหารก่อนการบริหารยาพาราเซตามอลหรือเนื่องจากสายพันธุ์ต่างหลังจาก 24 ชั่วโมงของการรักษา ยาพาราเซตามอล เลือดที่ถูกเก็บรวบรวมและเซรั่มแยกการสอบสวนทางชีวเคมี ตับจะถูกลบออกเพื่อตรวจสอบภาวะเครียดออกซิเดชัน ( โปรไฟล์ของสารต้านอนุมูลอิสระ ) และศึกษาการเปลี่ยนแปลง

การพัก . การประเมินของตับเอนไซม์และสารต้านอนุมูลอิสระ เครื่องหมาย

เซรั่มชีวเคมีพารามิเตอร์เช่นผงชูรสซาโลอะซิเตตทรานซามิเนส ( ได้ )กรดไพรูเวท 4 ( GPT ) ( ไรท์แมน และ frankal , 1975 ) , อัลคาไลน์ฟอสฟาเตส ( ALP ) ( ชนิดและกษัตริย์ , 1954 ) และ serum bilirubin ( ลอยและ Evelyn , 1937 ) มาวิเคราะห์ตามรายงานวิธีการ ตับ homogenates ( % w / v 10 ) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์เตรียมน้ำเกลือ ( PBS ) 137 mM NaCl KCl , 2.68 มม. , na2hpo4 10.14 มม. และ 176 มิลลิเมตร kh2po4 ใน 1000 มล. น้ำกลั่นที่ใช้เพื่อการศึกษา เช่น การเกิด lipid peroxidation อนุมูลอิสระ ( LPO ) ( buege and Aust , 1978 ) , Superoxide Dismutase ( SOD ) ( McCord และ fridovich 1969 ) , glutathione peroxidase ( GPX ) ( hafemann et al . , 1974 ) และลดลงกลูตาไธโอน ( GSH ) ( บ้าและ al . , 1979 )

2.7.2 . การศึกษาการศึกษา

ตับถูกกำหนดใน 10% ฟอร์มาลินและฝังอยู่ในขี้ผึ้งพาราฟินส่วนที่ 5 ความหนาถูกสร้างโดยใช้เครื่องตัดชิ้นเนื้อ และย้อมด้วยฮีมาท๊อกซีลิน eosin และสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์ ภาพถ่ายของแต่ละภาพนิ่งถ่ายที่ 40 ×ขยาย

2.8 . สถิติวิเคราะห์

ผลจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD ของกลุ่มศึกษา . การวิเคราะห์สถิติของผลวิเคราะห์โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทดสอบเปรียบเทียบพหุคูณ และในการทดสอบ