2. MATERIALS AND METHODS2.1 Chemica

2. MATERIALS AND METHODS
2.1 Chemicals and Reagents
Standards of benzoic acids and sorbic
acid with purity greater than 99% were
purchased from Sigma/Fluka (Schnelldorf,
Germany). Ammonium acetate and acetic acid
was from Univar Ajax Finechem (Australia).
The HPLC-grade methanol and acetonitrile
were purchased from Merck (Darmstadt,
Germany). Other chemicals used were of
analytical grade. High purity water was
prepared by using Milli-Q RO system
(Millipore, Bedford, MA, USA).
2.2 Noodle Samples
Five kinds of noodles; Rice spaghettini,
Rice fettuccine, Rice vermicelli, Mung bean
vermicelli and Ramen, were purchased from
6 noodle shops around Silpakorn University
in Amphur Muang, Nakorn prathom
province, Thailand. A total of 150 samples
were collected incessantly for 5 weeks and
kept at 4°C in a refrigerator.
2.3 Instrumention and Chromatographic
Conditions
The HPLC-DAD system consisted of an
Agilent 1100 series pump, an on-line solvent
degasser, an autosampler, a diode-array
detector (DAD) and a Chemstation software
version A.08.01 (Agilent Technologies, USA).
A reversed-phase column, 50 mm × 4.6 mm
packed with 5 μm, Germini-C18 modified
silica (Phenomenex, USA) and a guard
column, 20 mm × 3.9 mm packed with
5 μm, C18 were used. The column was
operated at ambient temperature. The
separation was carried out under isocratic
elution with 0.05 M ammonium acetate
buffer (pH 4.4 with acetic acid) and methanol
in the ratio of 60:40 (% v/v). The flow rate
was 1 mL/min and the wavelength was
monitored at 234 nm. The injection volume
was 10 μL. The mobile phase was filter
through 0.45 mm Chrom Tech Nylon-66
filter and degassed in an ultrasonic bath
prior to use. The samples were analyzed
using a DAD detector in scan mode covering
the range of 200-400 nm.
2.4 Preparation of Stock and Standard
Solutions
Stock solutions of benzoic acid and
sorbic acid in methanol were prepared at a
concentration of 2.5 and 1.25 mg/mL,
respectively. A series of standard mixture
solutions was prepared by the appropriate
dilution of the stock standard solutions with
methanol to concentration range of 5-200 μg/
mL for benzoic acid and 1-50 μg/mL for
sorbic acid.
2.5 Preparation of Analytical Sample
Noodle samples were cut into small
pieces and dried in a hot air oven at 50°C
for 30 min. The dried samples were then
homogenized to fine powder. One gram of
powdered sample was accurately weighed
into a 10 mL volumetric flask and added a
part of extraction solvent; methanol: water
(60:40, v/v). The mixture solution was shaken
vigorously for 1 min by vortex mixing and
made up to volume with extraction solvent.
Chiang Mai J. Sci. 2014; 41(2) 373
The mixture solution was then placed in
a sonicator bath for 30 min to affect
complete extraction. The extracted solution
was centrifuged for 5 min at 4,000 rpm.
An aliquot supernatant was filtered through a
0.45 μm nylon membrane filter and subjected
into HPLC column. For concentrated
samples, further dilution with mobile phase
was performed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 สารเคมีและ Reagentsมาตรฐาน ของกรด benzoic และ sorbicมีกรด มีความบริสุทธิ์มากกว่า 99%ซื้อจาก Fluka ซิก (Schnelldorfเยอรมนี) Acetate แอมโมเนียและกรดอะซิติกได้จาก Univar อาแจ็กซ์ Finechem (ออสเตรเลีย)HPLC เกรดเมทานอลและ acetonitrileซื้อจากบริษัทเมอร์ค (ดาร์มสเยอรมนี) สารเคมีอื่น ๆ ที่ใช้ได้เกรดวิเคราะห์ น้ำบริสุทธิ์สูงโดยใช้ระบบ RO Q(มาก กลาสโกว์ MA สหรัฐอเมริกา)2.2 ตัวอย่างก๋วยเตี๋ยวห้าชนิดของเส้น ข้าว spaghettiniข้าว fettuccine กลอนประตู เมล็ดถั่วซื้อจากเผ็ดสำเร็จรูปและราเม็งร้านก๋วยเตี๋ยว 6 รอบมหาวิทยาลัยศิลปากรในอำเภอเมือง นครประถมจังหวัด ประเทศไทย จำนวน 150 ตัวอย่างถูกรวบรวมไว้ incessantly ในสัปดาห์ที่ 5 และเก็บที่ 4° C ในตู้เย็น2.3 instrumention และ Chromatographicเงื่อนไขระบบ HPLC พ่อประกอบด้วยการAgilent 1100 ชุดปั๊ม ตัวทำละลายง่ายดายdegasser, autosampler ตัว ไดโอดอาร์เรย์เครื่องตรวจจับ (พ่อ) และซอฟต์แวร์ Chemstationรุ่น A.08.01 (Agilent เทคโนโลยี สหรัฐอเมริกา)คอลัมน์ย้อนกลับเฟส 50 มม. × 4.6 มม.เต็มไป ด้วย 5 μm, Germini-C18 ปรับเปลี่ยนซิลิก้า (Phenomenex สหรัฐอเมริกา) และการรักษาคอลัมน์ 20 มม. × 3.9 มม.เต็มไปด้วยมีใช้ 5 μm, C18 คอลัมน์ได้ดำเนินการ ณอุณหภูมิ ที่แยกเป็นดำเนินการภายใต้ isocratic คิดelution ด้วย 0.05 M acetate แอมโมเนียบัฟเฟอร์ (pH 4.4 มีกรดอะซิติก) และเมทานอลอัตราส่วนของ 60:40 (% v/v) อัตราการไหลมี 1 mL/min และมีความยาวคลื่นตรวจสอบที่ 234 nm ปริมาตรฉีด10 μL ได้ เฟสเคลื่อนกรองผ่าน 0.45 มม. Chrom เทคไนลอน-66กรอง และ degassed ในการอัลตราโซนิกก่อนที่จะใช้ มีวิเคราะห์ตัวอย่างใช้จับพ่อครอบคลุมโหมดการสแกนช่วง 200-400 nm2.4 การเตรียม Stock และมาตรฐานโซลูชั่นโซลูชั่นของกรด benzoic ตลาดหลักทรัพย์ และsorbic กรดในเมทานอลได้เตรียมพร้อมในการความเข้มข้น 2.5 และ 1.25 mg/mLตามลำดับ ชุดผสมมาตรฐานโซลูชั่นที่เตรียม โดยการที่เหมาะสมเจือจางในโซลูชั่นมาตรฐานหุ้นด้วยเมทานอลช่วงความเข้มข้นของ μg 5-200 /mL กรด benzoic และ μg/mL สำหรับ 1-50sorbic กรด2.5 การเตรียมตัวอย่างวิเคราะห์ตัวอย่างก๋วยเตี๋ยวถูกตัดเป็นขนาดเล็กชิ้น และอบแห้งในเตาอบอากาศร้อนที่ 50 องศาเซลเซียสสำหรับ 30 นาที ตัวอย่างแห้งดีแล้วhomogenized เป็นกลุ่มกับฝุ่นละออง หนึ่งกรัมของตัวอย่างผงถูกชั่งน้ำหนักได้อย่างถูกต้องในความหนาว volumetric 10 mL และเพิ่มการส่วนของตัวทำละลายสกัด เมทานอล: น้ำ(60:40, v/v) การแก้ปัญหาส่วนผสมถูกเขย่าโยคะใน 1 นาทีโดยผสม vortex และขึ้นกับปริมาณด้วยตัวทำละลายสกัดเชียงใหม่เชียงใหม่เจ Sci. 2014 41(2) 373โซลูชั่นส่วนผสมมีอยู่ในsonicator อาบน้ำ 30 นาทีมีผลต่อทำแยก การแก้ปัญหาแยกมี centrifuged ใน 5 นาทีที่ 4000 รอบต่อนาทีการ supernatant aliquot ถูกกรองผ่านตัวกรองเยื่อไนล่อน μm 0.45 และในคอลัมน์ HPLC สำหรับเข้มข้นตัวอย่าง เจือจางต่อ ด้วยระยะเคลื่อนที่ดำเนินการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1
สารเคมีและการวิเคราะห์สารมาตรฐานกรดเบนโซอิกของซอร์บิกและกรดที่มีความบริสุทธิ์มากกว่า
99%
ได้รับการสั่งซื้อจากซิกม่า/ Fluka (Schnelldorf,
เยอรมนี) แอมโมเนียมอะซิเตทและกรดอะซิติกมาจากอาแจ็กซ์ Univar Finechem (ออสเตรเลีย). เมทิลแอลกอฮอล์ HPLC เกรดและ acetonitrile ที่ซื้อมาจากเมอร์ค (ดาร์มสตัด, เยอรมนี) สารเคมีอื่น ๆ ที่ใช้เป็นของชั้นประถมศึกษาวิเคราะห์ น้ำมีความบริสุทธิ์สูงได้รับการจัดทำขึ้นโดยใช้ระบบ Milli-Q RO (คฟอร์ด, MA, USA). 2.2 ตัวอย่างบะหมี่ห้าชนิดของก๋วยเตี๋ยว; spaghettini ข้าวFettuccine ข้าวข้าววุ้นเส้นถั่วเขียววุ้นเส้นและราเมนที่ถูกซื้อมาจาก6 ร้านค้าก๋วยเตี๋ยวรอบมหาวิทยาลัยศิลปากรในอำเภอเมืองนครปฐมจังหวัดประเทศไทย ทั้งหมด 150 ตัวอย่างที่ถูกเก็บรวบรวมอย่างไม่หยุดหย่อนเป็นเวลา5 สัปดาห์และเก็บไว้ที่4 องศาเซลเซียสในตู้เย็น. 2.3 Instrumention และโครมาสภาพระบบHPLC-DAD ประกอบด้วยของAgilent 1100 ปั๊มชุดตัวทำละลายในบรรทัดdegasser, ฉีดตัวอย่างอัตโนมัติา, ไดโอดอาร์เรย์เครื่องตรวจจับ(DAD) และซอฟแวร์ ChemStation รุ่น A.08.01 (Agilent Technologies, USA). คอลัมน์เฟสกลับ 50 มม× 4.6 มมเต็มไปด้วย5 ไมครอน Germini-C18 ปรับเปลี่ยนซิลิกา(Phenomenex สหรัฐอเมริกา) และ ยามคอลัมน์20 มิลลิเมตร× 3.9 มมเต็มไปด้วย5 ไมครอน C18 ถูกนำมาใช้ คอลัมน์ที่ได้รับการดำเนินการที่อุณหภูมิห้อง แยกได้ดำเนินการภายใต้ isocratic ชะ 0.05 M แอมโมเนียมอะซิเตตบัฟเฟอร์(pH 4.4 ที่มีกรดอะซิติก) และเมทานอลในอัตราส่วน60:40 (% ต่อ v / v) อัตราการไหล1 มิลลิลิตร / นาทีและความยาวคลื่นได้รับการตรวจสอบที่234 นาโนเมตร ปริมาณการฉีด10 ไมโครลิตร ขั้นตอนถือเป็นตัวกรองผ่าน 0.45 มม Chrom เทคไนล่อน-66 กรองและ degassed ในห้องอาบน้ำล้ำก่อนที่จะใช้ กลุ่มตัวอย่างที่ได้มาวิเคราะห์โดยใช้เครื่องตรวจจับ DAD ในโหมดการสแกนครอบคลุมช่วง200-400 นาโนเมตร. the 2.4 การจัดทำหุ้นและมาตรฐานโซลูชั่นโซลูชั่นตลาดหลักทรัพย์แห่งกรดเบนโซอิกและกรดซอร์บิกในเมทานอลได้จัดทำที่มีความเข้มข้นของ2.5 และ 1.25 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรตามลำดับ ชุดของส่วนผสมมาตรฐานการแก้ปัญหาที่ถูกจัดทำขึ้นโดยความเหมาะสมการลดสัดส่วนของหุ้นโซลูชั่นมาตรฐานที่มีเมทานอลในช่วงความเข้มข้นของ5-200 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรสำหรับกรดเบนโซอิกและ 1-50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรสำหรับกรดซอร์บิก. 2.5 การจัดทำตัวอย่างการวิเคราะห์ตัวอย่างก๋วยเตี๋ยวถูกตัดเป็นขนาดเล็กชิ้นและแห้งในเตาอบลมร้อนที่ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา30 นาที กลุ่มตัวอย่างแห้งจากนั้นก็หดหายไปผงละเอียด หนึ่งกรัมตัวอย่างผงถูกชั่งน้ำหนักอย่างถูกต้องลงไปในขวด10 มิลลิลิตรปริมาตรและเพิ่มส่วนหนึ่งของตัวทำละลายสกัด; เมทานอล: น้ำ(60:40, v / v) วิธีการแก้ปัญหาส่วนผสมที่ถูกเขย่าอย่างจริงจังเป็นเวลา 1 นาทีโดยการผสมน้ำวนและสร้างขึ้นมาจากปริมาณที่มีตัวทำละลายสกัด. เชียงใหม่เจวิทย์ 2014; 41 (2) 373 การแก้ปัญหาส่วนผสมที่ถูกวางไว้ในห้องอาบน้ำคลื่นเสียงเป็นเวลา 30 นาทีจะมีผลต่อการสกัดสมบูรณ์ วิธีการแก้ปัญหาที่สกัดได้ปั่นเป็นเวลา 5 นาทีที่ 4,000 รอบต่อนาที. ใส aliquot ถูกกรองผ่านตัวกรองเมมเบรนไนลอน0.45 ไมโครเมตรและยัดเยียดลงในคอลัมน์HPLC สำหรับความเข้มข้นตัวอย่างเจือจางต่อกับเฟสเคลื่อนที่ได้ดำเนินการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 สารเคมีและสารเคมีมาตรฐานของกรดเบนโซอิก

กรดซอร์บิคมีความบริสุทธิ์สูงกว่า 99% ถูก
ซื้อจาก Sigma / fluka ( schnelldorf
, เยอรมนี ) แอมโมเนียมกรดอะซิเตทและ
จาก UNIVAR AJAX finechem ( ออสเตรเลีย )
2 ชั้นเมทานอลและไน
ซื้อจากเมอร์ค ( ดาร์มสตัดท์
, เยอรมนี ) สารเคมีที่ใช้อื่น ๆของ
วิเคราะห์เกรดน้ำบริสุทธิ์สูงที่เตรียมโดยใช้ระบบ RO milli-q

( มิลลิ , ฟอร์ด , MA , USA )
2
5 ชนิดของเส้นก๋วยเตี๋ยว บะหมี่ ข้าว spaghettini ,
ข้าว Fettuccine , เส้นหมี่ , ถั่วเขียว
วุ้นเส้นและราเมน ซื้อมาจากร้านหมี่รอบมหาวิทยาลัยศิลปากร
6
ในอำเภอเมือง นครปฐม
จังหวัด , ประเทศไทย รวมจำนวน 150 คน

อย่างไม่หยุดหย่อนเป็นเวลา 5 สัปดาห์ และเก็บที่อุณหภูมิ 4 ° C ในตู้เย็น
2.3 เครื่องมือและเงื่อนไขและ

ระบบ hplc-dad ประกอบด้วย
Agilent 1100 ชุดปั๊มออนไลน์ละลาย
degasser , autosampler , ไดโอดเรย์
ตรวจจับ ( พ่อ ) และ chemstation ซอฟต์แวร์
รุ่น a.08.01 ( Agilent Technologies , USA ) reversed-phase คอลัมน์ : 50 มม. × 4.6 มม. บรรจุμ
5 M germini-c18 แก้ไข
( phenomenex ซิลิกา ,สหรัฐอเมริกา ) และการ์ด
คอลัมน์ 20 มิลลิเมตร× 3.9 มม. บรรจุμ
5 M c18 มาใช้ คอลัมน์คือ
ดำเนินการที่อุณหภูมิ
แยกได้ดําเนินการภายใต้ Isocratic
( 0.05 M แอมโมเนียมอะซิเตทบัฟเฟอร์ pH 4.4

ด้วยกรดอะซิติก ) และเมทานอล ในอัตราส่วน 60 : 40 ( % v / v ) อัตราการไหล
1 มิลลิลิตรต่อนาทีและที่ความยาวคลื่นคือ
ติดตามที่ 234 nm . การฉีดปริมาณ
10 μ Lระยะที่เคลื่อนที่ผ่าน 0.45 มม. กรอง
โคลมเทค nylon-66
กรองและ degassed ใน
นํ้าเครื่องก่อนใช้งาน ตัวอย่างวิเคราะห์
ใช้พ่อตรวจจับในโหมดการสแกนครอบคลุม
ช่วง 200-400 nm .
2.4 การเตรียม Stock และมาตรฐาน

หุ้นโซลูชั่น โซลูชั่นของกรดเบนโซอิก และกรดซอร์บิคในเมทานอลเตรียม

ที่ความเข้มข้น 2.5 และ 1.25 mg / mL
ตามลำดับชุดของโซลูชั่นผสม
มาตรฐานถูกเตรียมโดยการเจือจางที่เหมาะสมของหุ้นมาตรฐานโซลูชั่นด้วย

เมทานอลความเข้มข้นในช่วง 5-200 μ g /
ml กรดเบนโซอิกμ 10-30 กรัมต่อมิลลิลิตรกรดซอร์บิคสำหรับ
.
2.5 เตรียมตัวอย่างวิเคราะห์ตัวอย่าง
ก๋วยเตี๋ยวถูกหั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆ
และแห้งใน เตาอบลมร้อนที่อุณหภูมิ 50 องศา C
เป็นเวลา 30 นาที อบแห้ง แล้วบดให้เป็นผง จำนวน
ดีหนึ่งกรัมของผงตัวอย่างถูกต้องหนัก

เป็น 10 มล. ปริมาตรขวด แล้วเพิ่ม
ส่วนหนึ่งของการสกัดด้วยตัวทำละลาย ; เมทานอล : น้ำ
( 60 : 40 , v / v ) ผสมสารละลายเขย่า
อย่างแข็งขัน 1 นาทีโดย Vortex ผสมและ
ขึ้นปริมาณการสกัดด้วยตัวทำละลาย .
เชียงใหม่ J . Sci . 2014 ; 41 ( 2 ) 373
ผสมสารละลายถูกวางไว้แล้วใน
เป็นเครื่องเขย่าแบบเสียงอาบน้ำ 30 นาที จะมีผลต่อ
การสกัดที่สมบูรณ์ แยกสารละลาย
คือระดับสำหรับ 5 นาทีที่ 4 , 000 รอบต่อนาที มีการเทศนาถูกกรองผ่านสูง

μไนลอน 0.45 เมตรเป็นเยื่อกรองและยัดเยียด
เป็นคอลัมน์ HPLC . สำหรับความเข้มข้น
ตัวอย่างเพิ่มเติมเจือจางกับเฟสเคลื่อนที่
กำหนด