3.3. Challenge tests
The results of the single and multiple infection tests are shown
in Fig. 1. No death was observed in the PS group. In the WSSV and
V. anguillarum single infection groups, the cumulative mortality
was 25% at 7 dpi. In the multiple infection group with WSSV and
V. anguillarum, the cumulative mortality was 37.5% at 7 dpi. The
shrimps in multiple infection groups died more quickly with a
higher mortality than those in single infection groups (Fig. 1).
3.4. Immune-related genes mRNA expression in shrimp under
different infection conditions
The mRNA expression of PPAF, PPAE1, PPAE2, Mas and Ran is
shown in Figs. 2e5.
3.4.1. Expression of PPAF
The expression of the PPAF gene was significantly higher in
shrimp infected with multiple pathogens at 3 hpi compared to
shrimp infected only with PS, bacteria or virus (Fig. 2). These higher
expressions were sustained until 24 hpi in multiply infected shrimp
compared to the baseline expression (time ¼ 0 h). The peak
expression was reached at 6 hpi in PS injection group, at 12 hpi in
bacteria injection group, at 6 hpi and 48 hpi in virus injection group
(Fig. 2).
3.4.2. Expression of PPAE 1 and PPAE 2
The time-course expression of PPAE1 and PPAE2 is shown in
Fig. 3. In PS injection group, the expression of PPAE1 and PPAE2 was
highest at 6 hpi, and then returned to the baseline level after 6 hpi.
In the bacteria injection group, the expression of PPAE1 was upregulated
at 12 hpi, and PPAE2 transcriptional level was
enhanced at 12, 24 and 48 hpi. Both PPAE1 and PPAE2 declined to
baseline after 48 hpi. In the virus injection group, the expression of
PPAE1 and PPAE2 was up-regulated at 6 hpi, then declined until
48 hpi. The transcriptional level of PPAE1 and PPAE2 was lower in
virus injection group than in bacteria or PS injection groups. In the
multiple-injection group, the expression of PPAE1 was downregulated
until 7 dpi, and the transcriptional level of PPAE2 was
up-regulated in various degrees at different time points until 7 dpi.
3.4.3. Expression of Mas gene
The transcriptional level of Mas was highest at 6 hpi in PS injection
group and then returned to the baseline level (Fig. 4). In the
bacteria injection group, the expression was up-regulated at 12 hpi
and returned to the baseline level. In the virus injection group, the
expression was increased from 48 hpi to 72 hpi, and then returned
to the baseline level at 7 dpi. The up-regulation level was lower in
multiple-infection group than that in virus, bacteria and PS injection
groups.
3.4.4. Expression of Ran gene
The transcription level of Ran gene in shrimp under different
infection conditions is shown in Fig. 5. In the PS injection group, the
relative mRNA expression levels of Ran were quickly up-regulated
at 6 hpi and then declined after a short time to the baseline level.
In the bacteria infection group, the transcriptional levels of Ran in
shrimp increased significantly by 9.1- and 2.7-folds at 12 and
24 hpi, respectively. At 48 hpi, the expression began to decrease and
returned to the baseline level at the end of experiment. In the virus
infection group, the expression levels increased by 1.9-folds at 6 hpi
and gradually decreased. At 48 hpi, the expression levels increased
again by 5-folds and then the level declined and remained suppressed
after 72 hpi. In the multiple-infection group, the expression
3.3 ท้าทายการทดสอบผลของการทดสอบการติดเชื้อเดียวและหลายจะแสดงในรูปที่ 1. ไม่มีการตายพบว่าในกลุ่ม PS ในตัวแดงดวงขาวและโวลต์ anguillarum การติดเชื้อกลุ่มเดียวที่มีอัตราการตายสะสมเป็น25% ที่ 7 dpi ในกลุ่มที่มีการติดเชื้อหลายตัวแดงดวงขาวและโวลต์ anguillarum ที่อัตราการตายสะสมเป็น 37.5% ณ 7 dpi กุ้งติดเชื้อหลายกลุ่มเสียชีวิตได้รวดเร็วยิ่งขึ้นกับอัตราการเสียชีวิตสูงกว่าผู้ที่อยู่ในกลุ่มที่ติดเชื้อเดียว (รูปที่ 1).. 3.4 ภูมิคุ้มกันยีนที่เกี่ยวข้องกับการแสดงออกในกุ้งภายใต้เงื่อนไขที่แตกต่างกันการติดเชื้อการแสดงออกของmRNA PPAF, PPAE1, PPAE2, Mas และวิ่งจะแสดงในมะเดื่อ 2e5. 3.4.1 การแสดงออกของ PPAF แสดงออกของยีน PPAF อย่างมีนัยสำคัญที่สูงขึ้นในกุ้งที่ติดเชื้อเชื้อโรคหลายhpi 3 เมื่อเทียบกับกุ้งที่ติดเชื้อเท่านั้นที่มีPS, แบคทีเรียหรือไวรัส (รูปที่. 2) เหล่านี้สูงกว่าการแสดงออกที่ถูกอย่างต่อเนื่องจนถึงวันที่ 24 hpi ในกุ้งที่ติดเชื้อคูณเมื่อเทียบกับการแสดงออกพื้นฐาน(เวลา¼ 0 ชั่วโมง) ยอดเขาที่แสดงออกได้ถึง 6 hpi ในกลุ่มการฉีด PS, 12 hpi ในแบคทีเรียกลุ่มการฉีดที่6 และ 48 hpi hpi ในกลุ่มการฉีดไวรัส(รูปที่. 2). 3.4.2 การแสดงออกของ PPAE ที่ 1 และ 2 PPAE การแสดงออกเวลาหลักสูตรของ PPAE1 และ PPAE2 จะแสดงในรูปที่ 3. ในกลุ่มการฉีด PS, การแสดงออกของ PPAE1 และ PPAE2 ได้สูงสุด6 hpi และจากนั้นกลับไปที่ระดับพื้นฐานหลัง 6 hpi. ในแบคทีเรียกลุ่มที่ฉีดการแสดงออกของ PPAE1 ถูก upregulated ที่ 12 HPI และ PPAE2 ระดับการถอดรหัส ได้รับการเพิ่มขึ้นที่12, 24 และ 48 HPI ทั้งสอง PPAE1 PPAE2 และปฏิเสธที่จะให้พื้นฐานหลังจาก48 HPI ไวรัสในกลุ่มที่ฉีดการแสดงออกของPPAE1 และ PPAE2 ขึ้นควบคุมที่ 6 hpi แล้วลดลงจนถึง48 HPI ระดับการถอดรหัสของ PPAE1 และ PPAE2 ลดลงในกลุ่มที่ฉีดไวรัสกว่าในแบคทีเรียหรือกลุ่มฉีดPS ในกลุ่มหลายฉีดแสดงออกของ PPAE1 ถูก downregulated จนถึงวันที่ 7 dpi และระดับของการถอดรหัส PPAE2 เป็นขึ้นการควบคุมในระดับที่แตกต่างที่จุดเวลาที่แตกต่างกันจนถึงวันที่7 dpi. 3.4.3 การแสดงออกของยีน Mas ระดับการถอดรหัสของ Mas สูงสุด 6 hpi ในการฉีด PS กลุ่มและจากนั้นก็กลับไปที่ระดับพื้นฐาน (รูปที่. 4) ในกลุ่มที่ฉีดเชื้อแบคทีเรีย, การแสดงออกเพิ่มขึ้นการควบคุมที่ 12 HPI และกลับไปที่ระดับพื้นฐาน ไวรัสในกลุ่มการฉีดที่แสดงออกเพิ่มขึ้นจาก 48 ถึง 72 hpi hpi และจากนั้นก็กลับไปที่ระดับพื้นฐานที่7 dpi ระดับขึ้นการควบคุมลดลงในกลุ่มหลายการติดเชื้อกว่าในไวรัสแบคทีเรียและ PS ฉีดกลุ่ม. 3.4.4 การแสดงออกของยีนวิ่งระดับการถอดรหัสของยีนในกุ้งวิ่งที่แตกต่างกันภายใต้เงื่อนไขการติดเชื้อจะแสดงในรูปที่ 5. ในกลุ่มการฉีด PS ที่ระดับการแสดงออกของmRNA ญาติวิ่งได้อย่างรวดเร็วขึ้นควบคุมที่6 hpi แล้วลดลงหลังจากเวลาสั้นในระดับพื้นฐาน. ในกลุ่มที่ติดเชื้อแบคทีเรียในระดับของการถอดรหัสวิ่งในกุ้งเพิ่มขึ้นอย่างมากโดย 9.1- และ 2.7 เท่าในวันที่ 12 และ24 hpi ตามลำดับ 48 hpi แสดงออกเริ่มลดลงและส่งกลับไปยังระดับพื้นฐานในตอนท้ายของการทดลอง ในไวรัสกลุ่มที่ติดเชื้อระดับการแสดงออกเพิ่มขึ้น 1.9 เท่าที่ 6 hpi และค่อยๆลดลง 48 HPI, ระดับการแสดงออกเพิ่มขึ้นอีกครั้งโดยเท่า5 แล้วระดับลดลงและยังคงระงับหลังจาก72 HPI ในกลุ่มหลายการติดเชื้อการแสดงออก
การแปล กรุณารอสักครู่..

3.3 . แบบทดสอบความท้าทาย
ผลเดียวและแบบทดสอบการติดเชื้อจะแสดงในรูปที่ 1
. ไม่มีตาย พบว่าในกลุ่ม PS . ใน anguillarum ีและ
V เดียวการติดเชื้อกลุ่ม
อัตราการตายสะสม 25 % 7 จุดต่อนิ้ว ในกลุ่มที่มีการติดเชื้อหลายีและ
V anguillarum , อัตราการตายสะสมเป็น 37.5 % 7 จุดต่อนิ้ว
กุ้งในกลุ่มที่ติดเชื้อหลายตายอย่างรวดเร็วด้วย
สูงกว่าอัตราการตายสูงกว่ากลุ่มติดเชื้อเดียว ( รูปที่ 1 ) .
3.4 . การแสดงออกของ mRNA ของยีนที่เกี่ยวข้องกับระบบภูมิคุ้มกันในกุ้งกุลาดำภายใต้สภาวะการติดเชื้อต่าง ๆ
ppaf การแสดงออกของ mRNA ppae1 ppae2 , , , แต่ และ รัน
แสดงในผลมะเดื่อ . 2e5 .
3.4.1 . การแสดงออกของ ppaf
การแสดงออกของยีนสูงกว่าใน
ppafกุ้งที่ติดเชื้อหลายโรคที่ 3 ชั่วโมงเมื่อเทียบกับกุ้งที่ติดเชื้อเท่านั้น
ป.ล. แบคทีเรียหรือไวรัส ( รูปที่ 2 ) การแสดงออกสูงกว่า
เหล่านี้อย่างต่อเนื่องจนถึง 24 ชั่วโมงในคูณกุ้งติดเชื้อ
เมื่อเทียบกับพื้นฐานการแสดงออก ( เวลา¼ 0 H ) การแสดงออกถึงจุดสูงสุด
6 ชั่วโมงใน PS ฉีดกลุ่มที่ 12 ชั่วโมงในกลุ่มที่ฉีด
แบคทีเรีย 6 ชั่วโมง และ 48 ชั่วโมงในกลุ่มที่ฉีดไวรัส
( รูปที่ 2 )
3.4.2 . การแสดงออกของ ppae 1 และ 2
ppae แน่นอนเวลาการแสดงและจะแสดงใน ppae1 ppae2
รูปที่ 3 ใน PS ฉีดกลุ่ม และการแสดงออกของ ppae1 ppae2 ถูก
สูงสุด 6 ชั่วโมง แล้วกลับมาที่ระดับพื้นฐานหลังจาก 6 ชั่วโมง .
ในแบคทีเรียฉีดกลุ่ม การแสดงออกของ ppae1 คือ upregulated
ที่ 12 ชั่วโมง และ ppae2 ลองระดับ
เพิ่ม 12 , 24 และ 48 ชั่วโมง .ทั้ง ppae1 ppae2 ลดลงและ
( หลังจาก 48 ชั่วโมง . ในไวรัสที่ฉีดกลุ่ม การแสดงออกของ
ppae1 ppae2 และสามารถที่ 6 ชั่วโมง จากนั้นลดลงจนกระทั่ง
48 ชั่วโมง . ระดับของ ppae1 ppae2 particle และลดลงในกลุ่มไวรัส แบคทีเรีย หรือ ฉีด
กว่าใน PS ฉีดกลุ่ม ใน
กลุ่มฉีดหลาย การแสดงออกของ ppae1 คือ downregulated
จนถึง 7 จุดต่อนิ้ว ,และระดับลอง ppae2 คือ
คาองศาต่างๆที่จุดเวลาที่แตกต่างกันถึง 7 dpi .
3.4.3 . การแสดงออกของยีนที่ระดับ Mas
ลองมาส สูงสุด 6 ชั่วโมงใน PS ฉีด
กลุ่มแล้วกลับไประดับพื้นฐาน ( รูปที่ 4 ) ใน
แบคทีเรียฉีดกลุ่ม การแสดงออกสามารถที่ 12 HPI
และกลับไปที่ระดับพื้นฐานในการฉีดไวรัสกลุ่ม
การแสดงออกเพิ่มขึ้นจาก 48 ชั่วโมง 72 ชั่วโมง แล้วกลับมา
เพื่อพื้นฐานระดับ 7 จุดต่อนิ้ว ขึ้นการควบคุมระดับต่ำกว่า
การติดเชื้อหลายกลุ่มว่าไวรัส แบคทีเรีย และ PS กลุ่มฉีด
.
3.4.4 . การแสดงออกของยีนถอดความรัน
ระดับวิ่งยีนในกุ้งภายใต้สภาวะการติดเชื้อแตกต่างกัน
จะแสดงในรูปที่ 5ในกลุ่ม PS ฉีด
ญาติระดับการแสดงออกของ mRNA สามารถวิ่งได้อย่างรวดเร็ว
ที่ 6 ชั่วโมง จากนั้นลดลงหลังจากเวลาสั้น ๆ ระดับพื้นฐาน
ในแบคทีเรียการติดเชื้อกลุ่ม ลองระดับวิ่ง
กุ้งเพิ่มขึ้น 9.1 - 2.7-folds
ที่ 12 และ 24 ชั่วโมง ตามลำดับ ใน 48 ชั่วโมง , การแสดงออกเริ่มลดลงและ
กลับไปที่พื้นฐานระดับที่สิ้นสุดการทดลอง ในการติดเชื้อไวรัส
กลุ่ม ระดับการแสดงออกเพิ่มขึ้น 1.9-folds
6 ชั่วโมง และค่อย ๆ ลดลง ที่ 48 ชั่วโมง ระดับการแสดงออกเพิ่มขึ้น
อีกครั้งโดย 5-folds แล้วระดับลดลงและยังคงปราบปราม
หลังจาก 72 ชั่วโมง . ในกลุ่มติดเชื้อหลาย การแสดงออก
การแปล กรุณารอสักครู่..
