To test the sensitivity of the PCR

To test the sensitivity of the PCR in the presence of fish tissue,
การทดสอบความไวของ PCR ในเนื้อเยื้อของปลา
Samples spiked with the bacterium were used. Two healthy goldfish were
sacrificed and their spleens were aseptically removed, trimmed, and
weighed. A culture of M. marinum (NCIMB 1297) was harvested as
described in Section 2.1 and the resulting suspension adjusted to
OD610 = 1.0 in a spectrophotometer. To confirm this concentration, the
turbidity of the suspension was adjusted to McFarland 1.0. Ten-fold serial
dilutions of this Mycobacterium culture were prepared in 1 ml of TE buffer and then added to 25 mg samples of spleen prior to homogenisation
using autoclaved pestles. Purified DNA was extracted from each suspension
using a NucleoSpin® Tissue kit (Macherey-Nagel, Düren, Germany)
following the manufacturer's instructions. Using the above primer sets,
PCR was carried out on the DNA extracted from the tissue spiked with
of Mycobacterium marinum (NCIMB 1297)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อทดสอบความไวของ PCR ในการปรากฏตัวของเนื้อเยื่อปลา,
การทดสอบความไวของ PCR ในเนื้อเยื้อของปลา
ตัวอย่างถูกแทงด้วยแบคทีเรียถูกนำมาใช้ สองปลาทองมีสุขภาพดีได้รับการ
เสียสละและม้ามของพวกเขาที่ถูกถอดออกปลอดเชื้อตัดและ
ชั่งน้ำหนัก วัฒนธรรมของเอ็ม Marinum (NCIMB 1297) คือการเก็บเกี่ยว
ที่อธิบายไว้ในมาตรา 2.1 และระงับส่งผลให้มีการปรับเพื่อ
OD610 = 1.0 ในสเปก เพื่อยืนยันความเข้มข้นนี้
ความขุ่นของการระงับปรับ McFarland 1.0 อนุกรมสิบเท่า
เจือจางของวัฒนธรรมเชื้อนี้ได้จัดทำขึ้น 1 มิลลิลิตรของ TE บัฟเฟอร์แล้วเพิ่มถึง 25 ตัวอย่าง mg ของม้ามก่อนที่จะ homogenisation
ใช้ pestles อิฐ ดีเอ็นเอบริสุทธิ์ถูกสกัดจากแต่ละระงับการ
ใช้ชุดเนื้อเยื่อNucleoSpin® (Macherey-แจคกี้Düren, เยอรมนี)
ทำตามคำแนะนำของผู้ผลิต โดยใช้ไพรเมอร์ชุดข้างต้น
PCR ได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับดีเอ็นเอที่สกัดจากเนื้อเยื่อถูกแทงด้วย
ของเชื้อ Marinum (NCIMB 1297)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อทดสอบความไวของเชื้อต่อเนื้อเยื่อของปลาการทดสอบความไวของ PCR ในเนื้อเยื้อของปลาตัวอย่าง C ในการใช้ ปลาทองเป็นสองมีสุขภาพดีเสียสละและม้ามของ aseptically ลบออก , ตัดออก , และชั่งน้ำหนัก วัฒนธรรมของ marinum ( ncimb 871 ) เก็บเกี่ยว เช่นอธิบายไว้ในมาตรา 2.1 และผลการระงับการปรับod610 = 1.0 ในวัสดุ เพื่อยืนยันว่าสมาธินี้ความขุ่นของช่วงล่างปรับให้แมคฟาร์แลนด์ 1.0 สิบเท่า อนุกรมวิธีการนี้ให้ผลวัฒนธรรมเตรียมใน 1 มิลลิลิตรของ TE บัฟเฟอร์แล้วเพิ่ม 25 มิลลิกรัม ตัวอย่างของม้ามก่อนการโฮโมจีไนเซชั่นใช้สังเคราะห์ pestles . แยกดีเอ็นเอจากแต่ละระงับใช้ nucleospin ®เนื้อเยื่อ Kit ( macherey นาเกล , D üเรน , เยอรมนีตามคำแนะนำของผู้ผลิต ใช้ชุดหลักข้างต้นโดยได้ดำเนินการในดีเอ็นเอที่สกัดจากเนื้อเยื่อที่ถูกแทงด้วยของเชื้อ marinum ( ncimb 871 )