Apoptotic events were measured by t

Apoptotic events were measured by terminal deoxynucleotidyl
transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) assay (Roche
Diagnostics, Mannheim, Germany), according to the manufacturer’s
protocol. Briefly, RA FLS were incubated with 0.1 and 1 M
of gallic acid for 48 h, and were fixed with 4% paraformaldehyde
for 30 min at room temperature. After washing with PBS, permeabilization
solution (0.1% sodium citrate, 0.1% Triton X-100) was
added for 2 min and cells were incubated for 1 h at 37 ◦C in a
terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) and biotin-11-dUTP
reactions. The nuclear morphology was examined by fluorescence
microscopy (Nikon, Mississauga, ON, Canada). The apoptosis index
was calculated based on the percentage of TUNEL-positive cells in
1000 RA FLS.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เหตุการณ์ Apoptotic ถูกวัด โดย deoxynucleotidyl เทอร์มินัลสิ้นสุดนิค transferase mediated dUTP ที่ติดฉลาก (TUNEL) วิเคราะห์ (โรวินิจฉัย มา เยอรมนี), ตามของผู้ผลิตโพรโทคอลการ สั้น ๆ RA FLS มี incubated ด้วย 0.1 1 Mของกรด gallic สำหรับ 48 h และก็คง มี paraformaldehyde 4%ใน 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลังจากล้างด้วย PBS, permeabilizationโซลูชั่น (0.1% โซเดียมซิเตรต 0.1% ไตรตั้น X-100) ได้เพิ่มสำหรับ 2 นาทีและเซลล์ถูก incubated สำหรับ h 1 ที่ ◦C 37 ในการเทอร์มินัล deoxynucleotidyl transferase (TdT) และไบโอติน 11 dUTPปฏิกิริยาการ สัณฐานวิทยานิวเคลียร์ถูกตรวจสอบ โดย fluorescencemicroscopy (Nikon, Mississauga, ON แคนาดา) ดัชนี apoptosisคำนวณตามเปอร์เซ็นต์ของ TUNEL บวกเซลล์ในFLS 1000 RA

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เหตุการณ์ที่เกิดขึ้นในกระบวนการตายถูกวัดโดยขั้ว deoxynucleotidyl
transferase พึ่งการติดฉลากปลาย dUTP นิค (TUNEL) การทดสอบ (Roche
Diagnostics, ไฮม์, เยอรมนี)
ตามที่ผู้ผลิตของโปรโตคอล สั้น ๆ , RA FLS ถูกบ่ม 0.1 และ 1 M
ของกรดฝรั่งเศสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงและได้รับการแก้ไขด้วย paraformaldehyde 4%
เป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลังจากล้างด้วยพีบีเอส permeabilization
การแก้ปัญหา (โซเดียมซิเตรท 0.1%, 0.1% Triton X-100)
ได้รับการเพิ่มเวลา2 นาทีและเซลล์ถูกบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง 37
◦Cในขั้วdeoxynucleotidyl transferase (TDT) และไบโอติน-11-dUTP
ปฏิกิริยา สัณฐานนิวเคลียร์ได้รับการตรวจสอบโดยการเรืองแสงกล้องจุลทรรศน์ (Nikon, Mississauga, ON, แคนาดา)
ดัชนีการตายที่คำนวณได้ในอัตราร้อยละของเซลล์ TUNEL บวกใน 1000 RA FLS

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรมกลุ่มที่มีวัดจากปลาย deoxynucleotidyl
ทรานสเฟอเรส ( โดยนิคจบการติดฉลาก ( อุโมงค์ ) assay ( โรช
วินิจฉัย Mannheim , เยอรมัน ) , ตามโปรโตคอลของ
ผู้ผลิต สั้น ๆ , รา FLS ถูกบ่มด้วย 0.1 และ 1  M
ของเพิ่มขึ้น 48 ชั่วโมง และถูกกำหนดด้วย 4% พาราฟอร์มาลดิไฮด์
30 นาที ที่อุณหภูมิห้อง หลังจากล้างด้วย permeabilization
พีบีเอสวิธีแก้ปัญหา ( 0.1 % โซเดียมซิเตรท 0.1 % Triton X-100 ) คือ
เพิ่มสำหรับ 2 นาทีและเซลล์ถูกบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ◦ใน
terminal deoxynucleotidyl ทรานสเฟอเรส ( TDT ) และปฏิกิริยา biotin-11-dutp

ทางนิวเคลียร์ถูกตรวจสอบโดยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์
( Nikon , Mississauga , แคนาดา ) การเกิด apoptosis index
คำนวณตามค่าของอุโมงค์บวกเซลล์
1000 รา FLS .