Experimental animals: 8 kinds of chicken included 7
Chinese indigenous chicken breeds and an alien species:
44 Zhangzhou gamecocks, 66 Henan gamecocks, 53
Huainan chickens, 38 Wannan chickens, 66 Wenchang
chickens, 88 Rugao chickens, 88 Anka chickens, which
were obtained from Poultry Institute of Chinese,
Academy of Agricultural Science, 32 Red Jungle Flow,
which were obtained from the Yunnan Wild Animal
Rescue Center of China, the body weight of Wenchang
Luan D. et al./ Thai J. Vet. Med. 2010. 40(3): 303-310. 305
chicken and Anka chicken were weighed every 2 weeks,
body measurements, slaughter traits and meat traits were
also determined at 12 weeks old.
Genomic DNA of all kinds of chickens was
extracted from chicken venous blood through
conventional phenol-chloroform extraction method.
DNA was dissolved in TE buffer and stored at -20℃ until
use.
Primers design and restriction enzyme selection: The
mutations between G and A of Mx cDNA nucleotide
sequence at 2032 site resulted in that Ser (AGT) changed
into Asn (AAT) of Mx protein at 631 sites (Ko et al., 2002).
Primers were designed according to The chicken Mx
gene sequence (Z23168) in GenBank F:5'-
CCTTCAGCCTGTTTTTCTCCTTTAGGAA-3' (intron 13),
and R1: 5'-CAGAGGAATCTGA TTGCTCAGGCGTGTA-
3' (exon14), the restriction enzyme cutting site of RsaⅠ
(Figure 1) was introduced, primers were ordered from
the Shanghai Public Health and Bio-Engineering Services
Limited (Sangon, Shanghai, China), and restriction
enzymes were purchased from Po Biological Engineering
(Dalian, China) Co., Ltd. (TaKaRa, Japan).
สัตว์ทดลอง: ไก่ 8 ชนิดรวม 7สายพันธุ์ไก่พื้นเมืองจีนและเป็นพันธุ์ที่คนต่างด้าว:44 จางโจว gamecocks, 66 เหอหนาน gamecocks, 53ไก่หวยหนาน 38 Wannan ไก่ เหวินจาง 66ไก่ ไก่เพรสนา 88, 88 ไก่ Anka ซึ่งได้รับมาจากสัตว์ปีกสถาบันของจีนสถาบันเกษตรวิทยาศาสตร์ 32 ป่าไหลที่ได้รับจากสัตว์ป่าของมณฑลยูนนานกู้ภัยศูนย์จีน น้ำหนักของเหวินจาง โรงแรมลวน D. et al. / เรื่องน่ารู้ของไทยเจ ประ 2010 40(3): 303-310 305ไก่และไก่ Anka ได้ชั่งน้ำหนักทุกสัปดาห์ที่ 2วัดร่างกาย ฆ่าลักษณะ และลักษณะเนื้อนอกจากนี้ยัง กำหนดใน 12 สัปดาห์ Genomic DNA ทุกชนิดของไก่ได้สกัดจากไก่เลือดดำผ่านวิธีสกัดธรรมดาวางคลอโรฟอร์มดีเอ็นเอถูกละลายในบัฟเฟอร์ TE และเก็บไว้ที่ - 20℃ จนถึงใช้งานไพรเมอร์ออกและเอนไซม์จำกัดการเลือก: การระหว่างนิวคลี cDNA อย่าง G และ A Mx โอไทด์ที่กลายพันธุ์ลำดับที่ 2032 ผลที่ Ser (AGT) การเปลี่ยนแปลงใน Asn (AAT) โปรตีน Mx ที่ไซต์ 631 (เกาะและ al., 2002)ไพรเมอร์ออกแบบมาตามไก่ Mxลำดับยีน (Z23168) ใน GenBank F:5'-CCTTCAGCCTGTTTTTCTCCTTTAGGAA-3' (intron 13),และ R1: 5'-CAGAGGAATCTGA TTGCTCAGGCGTGTA -3' (exon14), เว็บไซต์การตัดเอนไซม์จำกัดของ RsaⅠ(รูปที่ 1) ถูกนำมาใช้ ไพรเมอร์ที่สั่งจากเซี่ยงไฮ้สาธารณสุขและบริการด้านวิศวกรรมชีวภาพจำกัด(มหาชน) (Sangon เซี่ยงไฮ้ จีน), และข้อจำกัดซื้อเอนไซม์จาก Po ชีวภาพวิศวกรรม(ต้าเหลียน จีน) Co., Ltd. (TaKaRa ญี่ปุ่น)
การแปล กรุณารอสักครู่..
สัตว์ทดลอง: 8 ชนิดของไก่รวม 7
จีนสายพันธุ์ไก่พื้นเมืองและชนิดพันธุ์ต่างถิ่น:
44 Zhangzhou gamecocks 66 เหอหนาน gamecocks 53
ไก่ Huainan 38 ไก่ Wannan 66 Wenchang
ไก่ไก่ 88 Rugao 88 ไก่แองก้าซึ่ง
ได้รับจาก สัตว์ปีกสถาบันจีน,
สถาบันวิทยาศาสตร์การเกษตร, 32 สีแดงป่าไหล
ซึ่งได้จากยูนนานสัตว์ป่า
ศูนย์กู้ภัยของจีนน้ำหนักตัวของ Wenchang
ล้วน D. et al. / ไทยเจสัตวแพทย์ Med 2010 40 (3): 303-310 305
ไก่และไก่แองก้าได้รับการชั่งน้ำหนักทุก 2 สัปดาห์,
การวัดร่างกายลักษณะการฆ่าฟันและลักษณะเนื้อถูก
กำหนดยังที่ 12 สัปดาห์.
ดีเอ็นเอจีโนมของทุกชนิดของไก่ที่ถูก
สกัดจากไก่เลือดดำผ่าน
วิธีการสกัดฟีนอลคลอโรฟอร์มธรรมดา.
ดีเอ็นเอเป็น ละลายในบัฟเฟอร์ TE และเก็บไว้ที่ -20 ℃จนถึง
การใช้งาน.
การออกแบบไพรเมอร์และข้อ จำกัด การคัดเลือกเอนไซม์:
การกลายพันธุ์ระหว่าง G และเบื่อหน่ายของยีน Mx
ลำดับที่ 2032 ส่งผลให้เว็บไซต์ที่ Ser (AGT) การเปลี่ยนแปลง
เข้าสู่ Asn (AAT) ของโปรตีน Mx (. เกาะ, et al, 2002). ที่ 631 เว็บไซต์
ไพรเมอร์ได้รับการออกแบบตามไก่ Mx
ยีน (Z23168) ใน GenBank F: 5'-
CCTTCAGCCTGTTTTTCTCCTTTAGGAA-3 (intron 13),
และ R1: 5'-CAGAGGAATCTGA TTGCTCAGGCGTGTA-
3 '(exon14) เอนไซม์ จำกัด ตัดเว็บไซต์ของRsaⅠ
(รูปที่ 1) ได้รับการแนะนำไพรเมอร์ได้รับคำสั่งจาก
เซี่ยงไฮ้สาธารณสุขและไบโอวิศวกรรมบริการ
จำกัด (Sangon, เซี่ยงไฮ้, ประเทศจีน) และข้อ จำกัด
เอนไซม์ที่ซื้อมาจากปอชีวภาพ วิศวกรรม
(ต้าเหลียนประเทศจีน) จำกัด (Takara ญี่ปุ่น)
การแปล กรุณารอสักครู่..
สัตว์ทดลอง : 8 ชนิดของไก่รวม 7
จีนพันธุ์ไก่พื้นเมืองและชนิดพันธุ์ต่างถิ่น :
44 Zhangzhou ไก่ชนไก่ชน , 66 . 53
huainan ไก่ , 38 wannan 66 เวนชาง
ไก่ ไก่ ไก่ ไก่ 88 88 Rugao , ค้นหา ซึ่งหาได้จากสถาบันสัตว์ปีก
สถาบันวิทยาศาสตร์จีน การเกษตร , 32 แดง
ป่าไหลซึ่งได้มาจากยูนนานสัตว์ป่า
กู้ภัยศูนย์จีน น้ำหนักตัวของเวนชาง
ลวน . et al . ( J / สัตวแพทย์ ทางการแพทย์ 2010 40 ( 3 ) : 303-310 . 305
ไก่และไก่ถูกค้นหาหนักทุก 2 สัปดาห์ ,
การวัดตัว ลักษณะการฆ่าและลักษณะเนื้อเป็น
ยังมุ่งมั่นที่ 12 สัปดาห์
ดีเอ็นเอของทุกชนิดของไก่ที่ถูกสกัดจากเลือดจากหลอดเลือดดำผ่านไก่
ปกติฟีนอลด้วยวิธีสกัดดีเอ็นเอ .
ละลายใน TE buffer และเก็บไว้ที่ - 20 ℃จน
ออกแบบไพรเมอร์และการเลือกใช้ เอนไซม์ จำกัด :
การกลายพันธุ์ของยีนระหว่าง g และ MX นิวคลีโอไทด์
ลำดับที่เว็บไซต์ 2558 ส่งผลให้เซอร์ ( agt ) เปลี่ยน
เป็นขึ้น ( AAT ) ของโปรตีน เ มเ กซ์ที่คุณเว็บไซต์ ( เกาะ et al . , 2002 ) .
โดยออกแบบตามไก่ MX
ลำดับของยีน ( z23168 ) บริเวณ f : 5 ' -
' ( ccttcagcctgtttttctcctttaggaa-3 iNtRON 13 ) R1
5 ' - cagaggaatctga และ ttgctcaggcgtgta -
3 ' ( exon14 ) , เอนไซม์ตัดเว็บไซต์ของ RSA Ⅰ
( รูปที่ 1 ) ใช้โดยสั่งจาก
เซี่ยงไฮ้สาธารณสุขและบริการ วิศวกรรมชีวภาพ
จำกัด ( ประเทศจีนแสงอ่อน , Shanghai ) , และข้อ จำกัด เอนไซม์ ซื้อมาจาก Po
วิศวกรรมชีวภาพ( Dalian , จีน ) Co . , Ltd . ( ทาคาระ ญี่ปุ่น )
การแปล กรุณารอสักครู่..