DISCUSSION Previous studies on K+ t

DISCUSSION Previous studies on K+ transport by S. cerevisiae have been performed with fresh bakers' yeast previously aerated for several hours in deionized water. Under such conditions, yeast cells display a single K+ transport system with simple Michelis kinetics and a Km of approximately 0.5 mM (1). In the present study, we show that the kinetics oftransport can vary significantly depending upon the growth and assay conditions. Our experiments have been carried out with cells grown in a medium in which NH4+ and Na+ were replaced by arginine. When a relatively high K+ concentration (2 mM) was present during growth, the kinetics of transport were similar to those described previously: a single system following Michaelis kinetics, with Kms of 2 mM K+ and 6 mM Rb+. By contrast, when the K+ concentration during growth was reduced to 2 jiM, the kinetics of transport became complex, and the apparent Kms decreased to 20 ,uM K+ and 80 ,uM Rb+ In addition to the different affinities for substrate, the two modes of K+ transport were also different in temperature dependence, sensitivity to CCCP, and response to ATP depletion. Of these differences, the break in the Arrhenius plot was the most significant. Breaks in Arrhenius plots at the lipid-phase transition temperature are commonly found with transport systems, but they usually involve a change in the increase in transport rate rather than a decrease above the breakpoint. One example ofdeactivation above 30°C has been described for D-xylose transport in Rhodotorula glutinis and has been interpreted in terms of structural changes above the breakpoint (9). If one invokes a similar explanation for the break observed in micromolar K+ transport in S. cerevisiae, the results shown in Fig. 6 suggest structural or mechanistic differences in Rb+ transport between 2-,uM- and 2-mM-K+ cells. Further work will be required to establish the relationship

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การศึกษาก่อนหน้านี้สนทนา K + ขนส่งโดย S. cerevisiae มียีสต์สด bakers ก่อนหน้านี้ อากาศเวลาหลายชั่วโมงในน้ำ deionized ภายใต้เงื่อนไขดังกล่าว ยีสต์เซลล์แสดง K + ขนส่งระบบเดียวกับเรื่อง Michelis จลนพลศาสตร์และ Km ประมาณ 0.5 มม. (1) ในการศึกษาปัจจุบัน เราแสดงว่า oftransport จลนพลศาสตร์อาจแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญขึ้นอยู่กับสภาพการเจริญเติบโตและวิเคราะห์ การทดลองของเรามีการดำเนินการกับเซลล์ที่เติบโตในสื่อที่ NH4 + และ Na + ถูกแทนที่ ด้วยอาร์จินีน เมื่อค่อนข้างสูง K + เข้มข้น (มม. 2) อยู่ในระหว่างการเจริญเติบโต จลนพลศาสตร์ของการขนส่งได้เช่นเดียวกับที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้: ระบบเดียวต่อจลนพลศาสตร์ขั้น กับกม. 2 มม. K + และมม. 6 Rb + โดยคมชัด K + ความเข้มข้นในระหว่างการเจริญเติบโตลดลงเป็น 2 จิม จลนพลศาสตร์ของการขนส่งเป็นซับซ้อน และกม.ชัดลดลงไป 20 อุ่ม K + และ 80 อุ่ม Rb + นอกจาก affinities ต่าง ๆ สำหรับพื้นผิว สองโหมดของ K + ขนส่งก็ยังแตกต่างกันในการพึ่งพาอุณหภูมิ ไว CCCP และตอบสนองต่อการลดลงของ ATP ของความแตกต่างเหล่านี้ การหยุดพักในพล็อตอาร์เรเนียสได้ที่สำคัญ แบ่งในผืนอาร์เรเนียสอุณหภูมิเปลี่ยนเฟสไขมันโดยทั่วไปพบกับระบบขนส่ง แต่พวกเขามักจะเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงเพิ่มขึ้นในอัตราขนส่งลดลงเหนือจุดเปลี่ยน Ofdeactivation อย่างหนึ่งข้างต้น 30° C มีอธิบายไว้สำหรับขนส่ง D xylose ใน Rhodotorula glutinis และแปลความหมายในแง่ของการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างด้านบนเบรกพอยต์ (9) ถ้าหนึ่งจะอธิบายคล้ายกันสำหรับการหยุดพักใน micromolar K + ขนส่งใน S. cerevisiae ผลลัพธ์ที่แสดงใน Fig. 6 แนะนำโครงสร้าง หรือกลไกการทำความแตกต่างใน Rb + ขนส่งระหว่าง 2- อุ่ม- 2 -mM-K + เซลล์ การจะต้องสร้างความสัมพันธ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อภิปรายเกี่ยวกับการศึกษาก่อนหน้านี้ K + การขนส่งโดย S. cerevisiae ได้รับการดำเนินการกับยีสต์ขนมปังสด 'มวลเบาก่อนหน้านี้เป็นเวลาหลายชั่วโมงในน้ำปราศจากไอออน ภายใต้เงื่อนไขเช่นเซลล์ยีสต์แสดง K + เดียวกับระบบการขนส่งทางจลนศาสตร์ Michelis ง่ายและกิโลเมตรที่ประมาณ 0.5 มิลลิ (1) ในการศึกษาปัจจุบันเราแสดงให้เห็นว่าจลนศาสตร์ oftransport แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญสามารถขึ้นอยู่กับการเจริญเติบโตและเงื่อนไขการทดสอบ การทดลองของเราได้รับการดำเนินการกับเซลล์ที่ปลูกในสื่อที่ NH4 + และ + นาถูกแทนที่ด้วยอาร์จินี เมื่อ K ค่อนข้างสูง + เข้มข้น (2 มิลลิเมตร) เป็นของขวัญระหว่างการเจริญเติบโตจลนพลศาสตร์ของการขนส่งมีความคล้ายคลึงกับที่ระบุไว้ก่อนหน้านี้: เป็นระบบเดียวต่อไปนี้จลนศาสตร์ Michaelis ด้วยกม 2 มิลลิ K + และ 6 มิลลิ Rb + ในทางตรงกันข้ามเมื่อความเข้มข้นของ K + ระหว่างการเจริญเติบโตลดลงถึง 2 จิมจลนพลศาสตร์ของการขนส่งกลายเป็นความซับซ้อนและกิโลเมตรที่เห็นได้ชัดลดลงถึง 20 um K + และ 80, Um Rb + นอกจากความพอใจที่แตกต่างกันสำหรับพื้นผิวทั้งสองรูปแบบของการ การขนส่ง k + ก็มีความแตกต่างกันในการพึ่งพาอุณหภูมิความไวในการ CCCP และการตอบสนองต่อการสูญเสียเอทีพี ความแตกต่างเหล่านี้แบ่งในพล็อตอาร์เรเนียเป็นที่สำคัญที่สุด แบ่งในแปลง Arrhenius ที่การเปลี่ยนแปลงของไขมันเฟสอุณหภูมิจะพบกับระบบการขนส่ง แต่พวกเขามักจะเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงในการเพิ่มขึ้นของอัตราการขนส่งมากกว่าการลดลงดังกล่าวข้างต้นที่จุดพัก ตัวอย่างหนึ่ง ofdeactivati​​on สูงกว่า 30 องศาเซลเซียสได้รับการอธิบายสำหรับการขนส่ง D-ไซโลสใน glutinis Rhodotorula และได้รับการตีความในแง่ของการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างดังกล่าวข้างต้นเบรกพอยต์ (9) หากหนึ่งจะเรียกเป็นคำอธิบายที่คล้ายกันสำหรับการพักผ่อนที่สังเกตในการขนส่ง micromolar K + ในเอส cerevisiae ผลที่แสดงในรูป 6 แสดงให้เห็นความแตกต่างของโครงสร้างหรือกลไกในการขนส่ง + Rb ระหว่าง 2, uM- และ 2-MM-K + เซลล์ การทำงานต่อไปจะต้องสร้างความสัมพันธ์