American Foulbrood (AFB), caused by

American Foulbrood (AFB), caused by the spore-forming Gram-positive bacterium Paenibacillus larvae, is the most severe bacterial disease affecting honeybees worldwide. Two bacterial isolates showing specific inhibitory activity against P. larvae were identified as Bacillus cereus by 16S rDNA sequencing. Antagonistic compounds were obtained from cell-free supernatants of strains m6c and m387 growing on Trypticase Soy Broth and concentrated by NH4 SO4 precipitation, ultrafiltration and butanol extraction. Both compounds were characterized as bacteriocin-like inhibitory substances (BLIS). BLISm6c and BLISm387 were stable at 70°C for 30 min and active in the pH range from 3 to 7. The antibacterial activity was completely lost at pH values higher than 8 or temperatures >80°C. Both BLIS have a narrow activity range and highly inhibit the growth of P. larvae. BLISm6c and BLISm387 differ from each other and other BLIS reportedly produced by B. cereus with regard to their molecular weights, antibacterial activity, minimal inhibitory concentration values and sensitivity to degradative enzymes. The findings of this study suggest that BLISm6c and BLISm387 can potentially be used to control AFB.

Abstract

During intraocular bacterial infections, the primary innate responders are neutrophils, which may cause bystander damage to the retina or perturb the clarity of the visual axis. We hypothesized that cytokine IL-6 and chemokine CXCL1 contributed to rapid neutrophil recruitment during Bacillus cereus endophthalmitis, a severe form of intraocular infection that is characterized by explosive inflammation and retinal damage that often leads to rapid vision loss. To test this hypothesis, we compared endophthalmitis pathogenesis in C57BL/6J, IL-6-/-, and CXCL1-/- mice. Bacterial growth in eyes of CXCL1-/-, IL-6-/-, and C67BL/6J mice was similar. Retinal function retention was greater in eyes of IL-6-/- and CXCL1-/- mice compared with that of C57BL/6J, despite these eyes having similar bacterial burdens. Neutrophil influx into eyes of CXCL1-/- mice was reduced to a greater degree compared with that of eyes of IL6-/- mice. Histology confirmed significantly less inflammation in eyes of CXCL1-/- mice, but similar degrees of inflammation in IL6-/- and C57BL/6J eyes. Because inflammation was reduced in eyes of infected CXCL1-/- mice, we tested the efficacy of anti-CXCL1 in B. cereus endophthalmitis. Retinal function was retained to a greater degree and there was less overall inflammation in eyes treated with anti-CXCL1, which suggested that anti-CXCL1 may have therapeutic efficacy in limiting inflammation during B. cereus endophthalmitis. Taken together, our results indicate that absence of IL-6 did not affect overall pathogenesis of endophthalmitis. In contrast, absence of CXCL1, in CXCL1-/- mice or after anti-CXCL1 treatment, led to an improved clinical outcome. Our findings suggest a potential benefit in targeting CXCL1 to control inflammation during B. cereus and perhaps other types of intraocular infections.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อเมริกา Foulbrood (โร), เกิดจากแบคทีเรียแกรมบวกรูปสปอร์ Paenibacillus อ่อน เป็นโรคแบคทีเรียรุนแรงที่สุด honeybees ทั่วโลกส่งผลกระทบต่อ สองแบคทีเรียแยกแสดงเฉพาะยับยั้งกิจกรรมกับ P. อ่อนถูกระบุว่าเป็น Bacillus cereus โดยลำดับ 16S rDNA ต่อต้านสารที่ได้รับจากเซลล์ฟรี supernatants สายพันธุ์ m6c และ m387 เติบโตในน้ำซุปถั่วเหลือง Trypticase และเข้มข้น โดยสกัดฝน กรอง และบิวทานอ NH4 SO4 สารทั้งสองมีลักษณะเป็นสารยับยั้งคเทคล้าย (ล็อค) BLISm6c และ BLISm387 ได้ 70° C นาน 30 นาที และใช้งานอยู่ในช่วงค่า pH ตั้งแต่ 3 ถึง 7 กิจกรรมการต้านเชื้อแบคทีเรียหายไปอย่างสมบูรณ์ที่ค่า pH สูงกว่า 8 หรืออุณหภูมิ > 80° c ทั้งสองระบบ BLIS มีช่วงกิจกรรมแคบ และสูงยับยั้งการเติบโตของตัวอ่อน P. BLISm6c และ BLISm387 แตกต่างจากกันและระบบ BLIS อื่น ๆ รายงานว่าผลิต โดย B. cereus เกี่ยวกับน้ำหนักโมเลกุล แบคทีเรีย คุณค่าความเข้มข้นที่ยับยั้งที่น้อยที่สุด และไวต่อเอนไซม์ degradative ผลการวิจัยของการศึกษานี้แนะนำว่า BLISm6c และ BLISm387 อาจสามารถใช้การควบคุมโรบทคัดย่อระหว่างลูกตาติดเชื้อแบคทีเรีย ผู้ตอบสนองเหตุการณ์ธรรมชาติหลักคือ นิวโทรฟิล ซึ่งอาจทำให้เกิดความเสียหายช่วยให้จอตา หรือ perturb ความคมชัดของภาพแกน เราตั้งสมมติฐานว่า cytokine IL-6 และ chemokine CXCL1 ส่วนการสรรหา neutrophil อย่างรวดเร็วระหว่าง Bacillus cereus endophthalmitis รูปแบบที่รุนแรงของลูกตาติดเชื้อที่มีลักษณะการอักเสบระเบิดและความเสียหายที่จอประสาทตาที่มักจะนำไปสู่การสูญเสียวิสัยทัศน์อย่างรวดเร็ว การทดสอบสมมติฐานนี้ เราเปรียบเทียบพยาธิ endophthalmitis ใน C57BL/6J, IL - 6 - เทียบ-, และ CXCL1/เมาส์ เชื้อแบคทีเรียเจริญเติบโตในสายตาของ CXCL1- / -, IL - 6 - เทียบ-, และ C67BL/6J หนูคล้าย จอประสาทตาทำงานเก็บข้อมูลได้มากขึ้นในสายตาของ IL 6--/ - และ CXCL1-/ -หนูเมื่อเทียบกับของ C57BL/6J แม้ตาเหล่านี้มีภาระคล้ายแบคทีเรีย ไหลเข้าตา CXCL1/เมาส์ neutrophil เข้าลดลงในระดับที่สูงเมื่อเทียบกับที่สายตาของ IL6/เมาส์ มิญชวิทยายืนยันอักเสบน้อยกว่ามากในสายตาของ CXCL1 / -ไมซ์ แต่องศาคล้ายกับการอักเสบใน IL6- / - และ C57BL/6J ตา เนื่องจากการอักเสบลดลงในสายตาของการติดเชื้อ CXCL1 / -ไมซ์ เราทดสอบประสิทธิภาพของการป้องกัน CXCL1 ใน B. cereus endophthalmitis ฟังก์ชันจอประสาทตาก็ถูกเก็บไว้ในระดับที่สูง และมีการอักเสบน้อยลงโดยรวมในตารับการต่อต้าน-CXCL1 ซึ่งแนะนำที่ต่อต้าน CXCL1 อาจรักษาประสิทธิภาพในการจำกัดการอักเสบระหว่าง B. cereus endophthalmitis นำมารวมกัน ผลของเราระบุว่า ขาดของ IL-6 ไม่มีผลต่อการพัฒนาโดยรวมของ endophthalmitis ตรงกันข้าม การขาดงานของ CXCL1, CXCL1/เมาส์ หรือ หลัง รักษาต่อต้าน-CXCL1 นำไปสู่ผลทางคลินิกดีขึ้น ผลการวิจัยของเราแนะนำเป็นประโยชน์ที่อาจเกิดขึ้นในการกำหนดเป้าหมาย CXCL1 เพื่อควบคุมการอักเสบในระหว่าง B. cereus และบางชนิดอื่น ๆ ของลูกตาติดเชื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อเมริกัน Foulbrood (AFB) ที่เกิดจากการสร้างสปอร์แกรมบวกแบคทีเรีย Paenibacillus ตัวอ่อนเป็นโรคที่รุนแรงที่สุดที่มีผลต่อแบคทีเรียผึ้งทั่วโลก สองแบคทีเรียแสดงฤทธิ์ยับยั้งเฉพาะกับพีตัวอ่อนถูกระบุว่าเป็นเชื้อ Bacillus cereus โดย 16S rDNA ลำดับ สารประกอบปฏิปักษ์ที่ได้รับจาก supernatants มือถือฟรีของสายพันธุ์และ M6C m387 เจริญเติบโตบน Trypticase ถั่วเหลืองและน้ำซุปเข้มข้นโดย NH4 SO4 ตกตะกอนกรองและการสกัดบิวทานอ สารประกอบทั้งสองมีลักษณะเป็นสารยับยั้งแบคเหมือน (BLIS) BLISm6c และ BLISm387 มีเสถียรภาพที่ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีและใช้งานอยู่ในช่วงค่า pH ตั้งแต่ 3 ถึง 7 ฤทธิ์ต้านแบคทีเรียได้หายไปอย่างสมบูรณ์ที่ pH ค่าสูงกว่า 8 หรืออุณหภูมิ> 80 ° C ทั้งสอง BLIS มีช่วงกิจกรรมแคบและสูงยับยั้งการเจริญเติบโตของกุ้งตัวอ่อน BLISm6c และ BLISm387 แตกต่างจากแต่ละอื่น ๆ และอื่น ๆ BLIS ผลิตโดยมีรายงานว่า B. cereus ในเรื่องเกี่ยวกับน้ำหนักโมเลกุลของพวกเขาฤทธิ์ต้านแบคทีเรียน้อยที่สุดค่าความเข้มข้นและความไวในการยับยั้งเอนไซม์ย่อยสลายด้วย ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่า BLISm6c และ BLISm387 สามารถอาจจะใช้ในการควบคุม AFB.

บทคัดย่อ

ในระหว่างการติดเชื้อแบคทีเรียในลูกตาที่ตอบสนองโดยธรรมชาติหลักคือนิวโทรฟิซึ่งอาจทำให้เกิดความเสียหายบ้านใกล้เรือนเคียงม่านตาหรือรบกวนความคมชัดของแกนภาพ เราตั้งสมมติฐานว่าไซโตไคน์ IL-6 และ chemokine CXCL1 ส่วนร่วมในการสรรหาบุคลากร neutrophil อย่างรวดเร็วในช่วง endophthalmitis Bacillus cereus, รูปแบบที่รุนแรงของการติดเชื้อในลูกตาที่มีเอกลักษณ์เฉพาะด้วยการอักเสบระเบิดและความเสียหายที่จอประสาทตาที่มักจะนำไปสู่การสูญเสียการมองอย่างรวดเร็ว เพื่อทดสอบสมมติฐานนี้เราเมื่อเทียบกับการเกิดโรคใน endophthalmitis C57BL / 6J, IL-6 - / - และ CXCL1 - / - หนู เจริญเติบโตของแบคทีเรียในสายตาของ CXCL1 - / -, IL-6 - / - และ C67BL / 6J หนูก็คล้ายคลึง การเก็บรักษาจอประสาทตาฟังก์ชั่นยิ่งใหญ่ในสายตาของ IL-6 - / - และ CXCL1 - / - หนูเมื่อเทียบกับที่ของ C57BL / 6J แม้จะมีดวงตาเหล่านี้มีภาระแบคทีเรียที่คล้ายกัน ไหลบ่าเข้ามา neutrophil เข้าไปในดวงตาของ CXCL1 - / - หนูก็ลดลงในระดับที่มากขึ้นเมื่อเทียบกับสายตาของ IL6 - / - หนู จุลยืนยันการอักเสบอย่างมีนัยสำคัญน้อยลงในสายตาของ CXCL1 - / - หนู แต่องศาของการอักเสบที่คล้ายกันใน IL6 - / - และ C57BL / 6J ตา เพราะการอักเสบลดลงในสายตาของ CXCL1 ติดเชื้อ - / - หนูเราได้ทดสอบประสิทธิภาพของการป้องกัน CXCL1 ใน B. cereus endophthalmitis ฟังก์ชั่นจอประสาทตาถูกเก็บรักษาไว้ในระดับที่มากขึ้นและมีการอักเสบโดยรวมน้อยลงในสายตารับการรักษาด้วยการต่อต้านการ CXCL1 ซึ่งชี้ให้เห็นว่าการต่อต้าน CXCL1 อาจมีประสิทธิภาพการรักษาในการ จำกัด การอักเสบในช่วง B. cereus endophthalmitis นำมารวมกันผลของเราแสดงให้เห็นว่าตัวตนของ IL-6 ไม่ได้ส่งผลกระทบต่อการเกิดโรคโดยรวมของ endophthalmitis ในทางตรงกันข้ามการขาดงานของ CXCL1 ใน CXCL1 - / - หนูหรือหลังการรักษาป้องกัน CXCL1, นำไปสู่ผลการรักษาที่ดีขึ้น ผลการวิจัยของเราแสดงให้เห็นผลประโยชน์ที่อาจเกิดขึ้นในการกำหนดเป้าหมาย CXCL1 เพื่อควบคุมการอักเสบในช่วง B. cereus และบางทีประเภทอื่น ๆ ของการติดเชื้อในลูกตา