A. citrulli and A. avenae strains w

A. citrulli and A. avenae strains were routinely
grown on nutrient agar (Difco, Becton Dickinson and Co., Sparks,
MD) with appropriate antibiotics for 48 h at 28°C. E. coli strains
were grown in Luria Bertani (LB) broth or agar (Difco) with
appropriate antibiotics for 24 h at 37°C. To prepare A. citrulli inoculum,
bacterial cells were pelleted from 1.5 ml of overnight LB
broth culture by centrifugation at 13,000 rpm for 1 min. Cells were
washed with and resuspended in 0.1 M phosphate-buffered saline
(PBS; 137 mM NaCl, 5.6 mM Na2HPO4, 2.7 mM KCl, and 1.5
mM KH2PO4). Bacterial suspensions containing approximately 1 ×
108 CFU/ml were estimated using a spectrophotometer (optical
density at 600 nm of approximately 0.3) (Spectronic 20; Bausch
and Lomb, Rochester, NY) and 10-fold serially diluted with PBS
to generate cell suspensions with desired concentrations. When
used, antibiotics were incorporated into media at the following
concentrations: rifamycin (100 μg/ml, A. citrulli), spectinomycin
(100 μg/ml, A. citrulli and E. coli), kanamycin (50 μg/ml, A.
citrulli and E. coli), and cycloheximide (200 μg/ml, A. citrulli)
(Sigma-Aldrich, St. Louis).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

A. citrulli และสายพันธุ์ A. avenae อยู่เป็นประจำปลูกใน agar ธาตุอาหาร (Difco, Becton สัน และ บริษัท สปาร์คMD) กับยาปฏิชีวนะที่เหมาะสมสำหรับ h 48 ที่ 28 องศาเซลเซียส E. coli สายพันธุ์ปลูกในซุป Luria Bertani (ปอนด์) หรือ agar (Difco) ด้วยยาปฏิชีวนะที่เหมาะสมสำหรับ 24 ชมที่ 37 องศาเซลเซียส การเตรียม inoculum A. citrulliเซลล์แบคทีเรียได้ pelleted จาก 1.5 ml ของปอนด์ค้างคืนวัฒนธรรมซุป โดย centrifugation ที่ 13000 rpm 1 นาทีเซลล์ได้ด้วยหิน และ resuspended ใน 0.1 M buffered ฟอสเฟตน้ำเกลือ(PBS; 137 มม. NaCl, Na2HPO4 5.6 มม. 2.7 mM KCl และ 1.5มม. KH2PO4) บริการจากแบคทีเรียที่ประกอบด้วยประมาณ 1 ใน108 CFU/ml ถูกประเมินโดยใช้เป็นเครื่องทดสอบกรดด่างให้ (ออปติคอลความหนาแน่นที่ 600 nm ของประมาณ 0.3) (Spectronic 20 ก็ออกจากและ Lomb โรเชสเตอร์ NY ) และ 10-fold serially แตกออก ด้วย PBSการสร้างบริการของเซลล์ มีความเข้มข้นที่ต้องการ เมื่อใช้ ยาปฏิชีวนะถูกรวมเข้าไปในสื่อที่ต่อไปนี้ความเข้มข้น: spectinomycin, rifamycin (μg 100 ml, A. citrulli)(Μg 100 ml, A. citrulli และ E. coli), กานามัยซิน (50 μg/ml อ.citrulli และ E. coli), และ cycloheximide (μg 200 ml, A. citrulli)(ซิก-Aldrich, St. Louis)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เอเอ citrulli และสายพันธุ์ที่ได้รับการ avenae
ประจำปลูกในอาหารเลี้ยงเชื้อ(Difco, Becton ดิกคินสันและร่วมปาร์กส์,
MD) ด้วยยาปฏิชีวนะที่เหมาะสมเป็นเวลา 48 ชั่วโมงวันที่ 28
°ซีอีโคไลสายพันธุ์ที่ปลูกในLuria Bertani (LB) น้ำซุปหรืออาหารเลี้ยงเชื้อ (Difco)
ที่มีการใช้ยาปฏิชีวนะที่เหมาะสมเป็นเวลา24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เพื่อเตรียมความพร้อมหัวเชื้อเอ citrulli,
เซลล์แบคทีเรียถูกเม็ดจาก 1.5 มิลลิลิตร LB
ค้างคืนวัฒนธรรมน้ำซุปโดยการหมุนเหวี่ยงที่13,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 1 นาที เซลล์ที่ถูกล้างด้วยและ resuspended ในน้ำเกลือ 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอส; 137 มิลลิโซเดียมคลอไรด์ 5.6 มิลลิ Na2HPO4 2.7 มิลลิ KCl และ 1.5 มิลลิ KH2PO4) สารแขวนลอยแบคทีเรียที่มีประมาณ 1 × 108 CFU / ml ประมาณโดยใช้สเปก (แสงความหนาแน่นที่600 นาโนเมตรประมาณ 0.3) (SPECTRONIC 20; Bausch และ Lomb โรเชสเตอร์, นิวยอร์ก) และ 10 เท่าปรับลดลำดับกับพีบีเอสในการสร้างสารแขวนลอยเซลล์ที่มีความเข้มข้นที่ต้องการ เมื่อใช้ยาปฏิชีวนะที่ถูกรวมเข้าไปในสื่อที่ดังต่อไปนี้ความเข้มข้น: rifamycin (100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรเอ citrulli) spectinomycin (100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรเอ citrulli และเชื้อ E. coli) กานามัยซิน (50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรเอcitrulli และเชื้อ E. coli) และ cycloheximide (200 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรเอ citrulli) (Sigma-Aldrich เซนต์หลุยส์)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1 . citrulli และ A . avenae สายพันธุ์ตรวจ
ปลูก NUMB3RS ( difco เบคตอน , ดิกคินสันและ บริษัท สปาร์ค
, MD ) ด้วยยาปฏิชีวนะที่เหมาะสมสำหรับ 48 ชั่วโมง 28 ° C . E . coli สายพันธุ์
โตในลุเรียแบร์ตานิ ( LB ) น้ำซุป หรือวุ้น ( difco ) ด้วยยาปฏิชีวนะที่เหมาะสม
เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเตรียม citrulli เชื้อ A . C .
) , เซลล์แบคทีเรียเม็ดจาก 1.5 มิลลิลิตร LB
ค้างคืนซุปวัฒนธรรมโดยการเหวี่ยงแยกที่ 13 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 1 นาที และล้างด้วยเซลล์ถูก
resuspended ใน 0.1 โมลาร์ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (
( PBS ; 137 มม. ขนาด 5.6 มิลลิเมตร na2hpo4 2.7 mm . และ 1.5
อืม kh2po4 ) สารแขวนลอย แบคทีเรีย ที่มีประมาณ 1 ×
108 CFU / ml ได้ประมาณโดยใช้ Spectrophotometer ( แสง
ความหนาแน่นที่ 600 nm ประมาณ 0.3 ) ( spectronic 20 ; (
and Lomb โรเชสเตอร์นิวยอร์ก ) และ 10 เท่าเป็นเจือจางด้วย PBS
สร้างเซลล์แขวนลอยด้วยต้องการความเข้มข้น เมื่อ
ใช้ยาปฏิชีวนะถูกรวมเข้าไปในสื่อที่
ความเข้มข้นดังต่อไปนี้ ไรฟาไมซิน ( 100 μ g / ml . citrulli ) , สเปกติโนมัยซิน
( 100 μ g / ml . citrulli และ E . coli ) , kanamycin ( 50 μ g / ml .
citrulli และ E . coli ) และร้อยเรียง ( 200 μ g / ml . citrulli )
( ซิกม่า Aldrich เซนต์หลุยส์ )