Use of highly specific, sensitive a

Use of highly specific, sensitive and quantitative Real-Time PCR (qRT-PCR) based methods greatly
facilitate the monitoring of experimental drug intervention and vaccination efficacy targeting liver stage
malaria parasite. Here, in this study we have used qRT-PCR to detect the growing liver stage parasites
following inoculation of Plasmodium yoelii sporozoite. Route of sporozoite administration and size of the
sporozoite inoculums are two major determinants that affect the liver stage parasite load and therefore
its detection and quantification. Thus, these factors need to be addressed to determine the accuracy of
detection and quantification of Real-Time PCR method. Furthermore, applicability of quantitative RT-PCR
system needs to be confirmed by analyzing the effect of different antimalarials on liver stage parasite
burden. We have observed that parasite burden in mice infected via intravenous route was higher
compared to that in subcutaneous, intradermal and intraperitoneal route infected mice. Moreover, this
method detected liver stage parasite load with as low as 50 sporozoites. The inhibition studies with
primaquine and atovaquone revealed inhibition of liver stage parasite and well correlated with patency
and course of blood stage infection. This study characterized the simplicity, accuracy, and quantitative
analysis of liver stage parasite development by real time PCR under different experimental conditions.
Use of real time PCR method greatly improves the reproducibility and applicability to estimate the efficacy
and potency of vaccine or drug candidates targeting liver stage parasite.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ใช้เฉพาะอย่าง มีความละเอียดอ่อน และปริมาณเชื้อในเวลาจริง ( ข้าพเจ้าใช้วิธี PCR ) เป็นอย่างมากความสะดวกในการตรวจสอบและการแทรกแซงของยาทดลองวัคซีนประสิทธิภาพเป้าหมายเวทีตับไข้มาลาเรีย ที่นี่ ในการศึกษานี้ได้ใช้วิธี PCR เพื่อตรวจหาข้าพเจ้าเติบโตตับปรสิต เวทีต่อเชื้อพลาสโมเดียม yoelii สปอโรซอยต์ . เส้นทางของการบริหาร และขนาดของ สปอโรซอยต์สปอโรซอยต์ 18 ชั่วโมงสองปัจจัยสําคัญที่มีผลต่อตับ ขับพยาธิ ดังนั้นเวทีโหลดและการตรวจหาปริมาณ . ดังนั้น ปัจจัยเหล่านี้ต้อง addressed เพื่อตรวจสอบความถูกต้องของการตรวจหาและปริมาณของวิธี PCR แบบเรียลไทม์ นอกจากนี้ การประยุกต์ใช้เทคนิคเชิงปริมาณระบบจะต้องมีการยืนยันโดยวิเคราะห์ผลของยารักษามาลาเรียที่แตกต่างกันบนเวทีตับ ขับพยาธิภาระ เราได้พบว่าในหนูที่ติดเชื้อปรสิตภาระผ่านเส้นทางสายสูงเมื่อเทียบกับที่อยู่ใต้ผิวหนัง และเส้นทาง intradermal ในหนูทดลองที่ติดเชื้อ . นอกจาก นี้วิธีตรวจตับปรสิต โหลด ด้วยระยะที่ต่ำเป็น 50 สปอโรซอยต์ . ยับยั้งการศึกษากับไพรมาควินโตวาโควนเปิดเผยการยับยั้งและพยาธิตับและดี มีความสัมพันธ์กับความชัดเจน เวทีและหลักสูตรของเลือดติดเวที การศึกษาลักษณะ ความเรียบง่าย ความแม่นยํา และเชิงปริมาณการวิเคราะห์การพัฒนาเวทีตับปรสิตโดยเวลา PCR จริงภายใต้สภาวะการทดลองที่แตกต่างกันใช้วิธี PCR เวลาจริงช่วยเพิ่มและกระชับความสัมพันธ์กัน เพื่อประมาณค่าความสามารถและความแข็งแรงของวัคซีนหรือยาผู้สมัครเป้าหมายระยะพยาธิตับ