The cytokinin dehydrogenases (CKX;

The cytokinin dehydrogenases (CKX; EC 1.5.99.12) are a protein family that maintains the endogenous
levels of cytokinins in plants by catalyzing their oxidative degradation. The CKX family in maize (Zea
mays L.) has thirteen members, only two of which - ZmCKX1 and ZmCKX10 - have previously been
characterized in detail. In this study, nine further maize CKX isoforms were heterologously expressed in
Escherichia coli, purified by affinity and ion-exchange chromatography and biochemically characterized.
ZmCKX6 and ZmCKX9 could only be expressed successfully after the removal of putative sequencespecific
vacuolar sorting signals (LLPT and LPTS, respectively), suggesting that these proteins are localized
to the vacuole. Substrate specificity analyses revealed that the CKX isoforms can be grouped into two
subfamilies: members of the first strongly prefer cytokinin free bases while members of the second
degrade a broad range of substrates. The most active isoform was found to be ZmCKX1. One of the
studied isoforms, ZmCKX6, seemed to encode a nonfunctional enzyme due to a mutation in a conserved
HFG protein domain at the C-terminus. Site-directed mutagenesis experiments revealed that this domain
is essential for CKX activity. The roles of the maize CKX enzymes in the development of maize seedlings
during the two weeks immediately after radicle emergence were also investigated. It appears that
ZmCKX1 is a key regulator of active cytokinin levels in developing maize roots. However, the expression
of individual CKX isoforms in the shoots varied and none of them seemed to have strong effects on the
cytokinin pool.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Dehydrogenases cytokinin (CKX EC 1.5.99.12) เป็นครอบครัวโปรตีนที่รักษาที่ endogenousระดับของ cytokinins ในพืชโดย catalyzing ของพวกเขาลด oxidative ครอบครัว CKX ข้าวโพด (ซีmays L.) มีสิบสามลักษณะสมาชิก เพียงสองที่ - ZmCKX1 และ ZmCKX10 - ก่อนหน้านี้ได้ลักษณะในรายละเอียด ในการศึกษานี้ เก้าเพิ่มเติมข้าวโพด CKX isoforms ถูกแสดงใน heterologouslyEscherichia coli บริสุทธิ์ โดยความสัมพันธ์และแลกเปลี่ยนไอออน chromatography และ biochemically ลักษณะZmCKX6 และ ZmCKX9 อาจเพียงแสดงเรียบร้อยแล้วหลังจากลบ putative sequencespecificvacuolar เรียงลำดับสัญญาณ (LLPT และ LPTS ตามลำดับ), แนะนำว่า โปรตีนเหล่านี้มีภาษาท้องถิ่นไปแวคิวโอล พื้นผิว specificity วิเคราะห์เปิดเผยว่า CKX isoforms สามารถจัดกลุ่มออกเป็นสองsubfamilies: สมาชิกครั้งแรกขอชอบ cytokinin ฟรีฐานในขณะที่สมาชิกที่สองลดพื้นผิวที่หลากหลาย พบ isoform อยู่มากที่สุดเป็น ZmCKX1 หนึ่งของการศึกษา isoforms, ZmCKX6 ประจักษ์ เอนไซม์ nonfunctional อาจเนื่องจากการกลายพันธุ์ในการนำเข้าโดเมนโปรตีน HFG ที่ C-เทอร์มินัส เว็บไซต์กำกับ mutagenesis ทดลองเปิดเผยที่โดเมนนี้เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกิจกรรม CKX บทบาทของเอนไซม์ CKX ข้าวโพดในการพัฒนาของกล้าไม้ข้าวโพดเลี้ยงสัตว์ในระหว่างสัปดาห์ 2 ทันทีหลังจากเกิด radicle ก็ยังตรวจสอบ มันปรากฏขึ้นZmCKX1 จะควบคุมคีย์ระดับ cytokinin ที่ใช้ในการพัฒนารากข้าวโพด อย่างไรก็ตาม นิพจน์ของ CKX ละ isoforms ถ่ายภาพที่แตกต่างกันและไม่มีพวกเขาดูเหมือนจะ มีลักษณะที่แข็งแกร่งในการcytokinin สระ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

dehydrogenases ไซโตไคนิ (CKX; EC 1.5.99.12) เป็นครอบครัวโปรตีนที่รักษาภายนอก
ระดับของไซโตไคในพืชโดยการเร่งการย่อยสลายออกซิเดชันของพวกเขา ครอบครัว CKX ในข้าวโพด (Zea
mays L. ) สิบสามมีสมาชิกเพียงสองแห่งที่ - ZmCKX1 และ ZmCKX10 - ได้รับก่อนหน้านี้
ที่โดดเด่นในรายละเอียด ในการศึกษานี้เก้าไอโซฟอร์ม CKX ข้าวโพดต่อไปมีการแสดงออกใน heterologously
เชื้อ Escherichia coli, บริสุทธิ์โดยความสัมพันธ์และสารแลกเปลี่ยนไอออนและลักษณะทางชีวเคมี.
ZmCKX6 และ ZmCKX9 เท่านั้นที่จะได้แสดงความประสบความสำเร็จหลังจากการกำจัดของ sequencespecific สมมุติ
vacuolar สัญญาณการเรียงลำดับ (LLPT และ LPTS, ตามลำดับ) บอกว่าโปรตีนเหล่านี้จะมีการแปล
ที่จะ vacuole การวิเคราะห์พื้นผิวจำเพาะเปิดเผยว่าไอโซฟอร์ม CKX สามารถแบ่งออกเป็นสอง
ครอบครัว: สมาชิกแรกอย่างยิ่งชอบฐานฟรีไซโตไคนิในขณะที่สมาชิกของสอง
ประสิทธิภาพต่ำาความหลากหลายของพื้นผิว ไอโซฟอร์มใช้งานมากที่สุดพบว่า ZmCKX1 หนึ่งใน
ไอโซฟอร์มศึกษา ZmCKX6 ดูเหมือนจะเข้ารหัสเอนไซม์ nonfunctional เนื่องจากการกลายพันธุ์ในป่าสงวน
โดเมนโปรตีน HFG ที่ C-ปลายทาง เว็บไซต์กำกับการทดลองฉับเปิดเผยว่าโดเมนนี้
เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกิจกรรม CKX บทบาทของเอนไซม์ CKX ข้าวโพดในการพัฒนาของต้นกล้าข้าวโพด
ในช่วงสองสัปดาห์ที่ผ่านมาทันทีหลังจากที่เกิด radicle ถูกตรวจสอบยัง ปรากฏว่า
ZmCKX1 เป็นหน่วยงานกำกับดูแลที่สำคัญของระดับไซโตไคนิที่ใช้งานในการพัฒนารากข้าวโพด แต่การแสดงออก
ของแต่ละไอโซฟอร์ม CKX ในหน่อที่แตกต่างกันและไม่มีพวกเขาดูเหมือนจะมีผลกระทบที่แข็งแกร่งใน
สระว่ายน้ำไซโตไคนิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โดยเอนไซม์ดีไฮโดรจีเนส ( EC ) ckx ; 1.5.99.12 ) เป็นโปรตีนที่ช่วยในระดับครอบครัวของไซโตไคนินในพืชโดย
และการออกซิเดชันของ การ ckx ครอบครัวในข้าวโพด ( Zea mays L .
) มีสมาชิก 13 , เพียงสอง ซึ่ง zmckx1 zmckx10 - และ - ได้รับก่อนหน้านี้
ลักษณะในรายละเอียด ในการศึกษานี้เก้าเพิ่มเติมข้าวโพด ckx ต่อเป็น heterologously แสดงออกใน
Escherichia coli และไอออนโครมาโทกราฟีและทำให้บริสุทธิ์ได้ง่าย biochemically ลักษณะ .
zmckx6 zmckx9 และสามารถแสดงเรียบร้อยแล้วหลังจากการกำจัดซึ่ง sequencespecific
vacuolar แยกสัญญาณ ( llpt และ lpts ตามลำดับ ) แนะนำว่า โปรตีนเหล่านี้มีเฉพาะที่
กับแวคิวโอล .พบว่า พื้นผิวมีความจำเพาะต่อ ckx สามารถแบ่งได้เป็น 2 วงศ์ย่อย :
สมาชิกแรกขอชอบ ) ฐานฟรีในขณะที่สมาชิกของที่สอง
ลดช่วงกว้างของพื้นผิว . โดยไอโซฟอร์มที่ใช้งานมากที่สุด คือ zmckx1 . หนึ่งในการศึกษาต่อ zmckx6
, , ดูเหมือนจะเข้ารหัสเอนไซม์ nonfunctional เนื่องจากการกลายพันธุ์ในป่าสงวน
hfg โปรตีนโดเมนที่ c-terminus . เว็บไซต์โดยตรงของการทดลองพบว่าโดเมน
เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกิจกรรม ckx . บทบาทของข้าวโพด ckx เอนไซม์ในการพัฒนาต้นกล้าข้าวโพด
ในช่วงสองสัปดาห์ทันทีหลังจากรากงอกได้ถูกศึกษา ปรากฏว่า
zmckx1 เป็นตัวควบคุมหลักของระดับ ) ที่ใช้งานในการพัฒนารากข้าวโพด อย่างไรก็ตามการแสดงออกของบุคคลต่อ
ckx ในยิงหลากหลายและไม่มีพวกเขาดูเหมือนจะมีผลอย่างมากต่อ
) สระ