Various temperatures were also assa

Various temperatures were also assayed with regards to their effects on enzyme activity (Fig. 4a). The findings revealed that the barbel trypsin was active at a broad temperature range (30–70 °C), with optimum activity being recorded at around 55 °C. The relative activities at 40, 50, and 60 °C were about 48.4%, 92%, and 94%, respectively. The optimum temperature recorded for trypsin from B. callensis was similar to the one previously reported for the Trypsin from sardinelle (S. aurita) ( Ben Khaled et al., 2008), lower than the one (70 °C) described for cuttlefish trypsin ( Balti et al., 2009), and higher than the one (40 °C) described for grey triggerfish

The thermal stability profile of the purified trypsin revealed that while the enzyme was highly stable at temperatures below 40 °C, it was inactivated at higher temperatures (Fig. 4b). The enzyme retained more than 88% and 75% of its initial activity after 60 min incubation at 50 and 60 °C, respectively. The thermal stability displayed by B. callensis trypsin was similar to the ones previously reported for other marine vertebrate and invertebrate trypsins ( Ben Khaled et al., 2008 and Barkia et al., 2010). The stability observed for the trypsin from B. callensis was higher than that previously reported for the trypsin from the pyloric caeca of chinook salmon (O. tshawytscha) which lost more than 90% of its activity after heating at 60 °C for 30 min


pH profile (a) and pH stability (b) of the purified trypsin from the viscera of B. callensis. Trypsin activity was assayed in the pH range of 5.0–13.0 at 30 °C. The maximum activity obtained at pH 8.5 was considered as 100% activity. The pH stability of the enzyme was determined by incubating the enzyme in different buffers for 60 min at 25 °C and the residual enzyme activity was determined at pH 10.0 and 30 °C using BAPNA as a substrate. The activity of the enzyme before incubation was taken as 100%. Buffer solutions used for pH activity and stability are presented in Section 2. Bars represent standard deviation from triplicate determinations.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อุณหภูมิต่าง ๆ ได้ยัง assayed เกี่ยวกับผลเอนไซม์ (Fig. 4a) ผลการวิจัยเปิดเผยว่า ทริปซิน barbel ถูกใช้งานในช่วงอุณหภูมิที่กว้าง (30 – 70 ° C), ที่ มีกิจกรรมสูงสุดที่ถูกบันทึกไว้ที่ประมาณ 55 องศาเซลเซียส กิจกรรมสัมพันธ์ที่ 40, 50 และ 60 ° C มีประมาณ 48.4%, 92%, 94% ตามลำดับ อุณหภูมิสูงสุดที่บันทึกไว้สำหรับทริปซินจาก callensis เกิดหนึ่งก่อนหน้านี้รายงานสำหรับทริปซินจาก sardinelle (S. aurita) (Ben Khaled et al., 2008), ต่ำกว่าหนึ่ง (70 ° C) อธิบายหมึกทริปซิน (บัลติ et al., 2009), และมากกว่าหนึ่ง (40 ° C) อธิบายสำหรับปลาวัวลายสีเทาโพรไฟล์ความมั่นคงความร้อนของทริปซินบริสุทธิ์เปิดเผยว่า ในขณะที่เอนไซม์มีเสถียรภาพสูงที่อุณหภูมิต่ำกว่า 40 ° C มันถูกยกเลิกที่อุณหภูมิสูง (Fig. 4b) เอนไซม์ที่สะสมกว่า 88% และ 75% ของกิจกรรมเริ่มต้นหลังจากบ่ม 60 นาทีที่ 50 และ 60 ° C ตามลำดับ แสดง โดยทริปซิน callensis เกิดความมั่นคงความร้อนได้เหมือนกับเคย รายงานสำหรับอื่น ๆ ทะเล invertebrate และหลอด trypsins (Ben Khaled et al., 2008 และ Barkia et al., 2010) สังเกตสำหรับทริปซินจาก callensis เกิดความมั่นคงมีมากกว่าที่รายงานก่อนหน้านี้ สำหรับทริปซินจาก caeca pyloric ของ chinook แซลมอน (โอ tshawytscha) ที่หายไปกว่า 90% ของกิจกรรมของหลังจากความร้อนที่ 60 ° C สำหรับ 30 นาทีค่า pH (ก) และเสถียรภาพ pH (ข) ทริปซินบริสุทธิ์จากศพของ callensis เกิดขึ้น ทริปซินกิจกรรมถูก assayed ในช่วง pH 5.0 – 13.0 ที่ 30 องศาเซลเซียส กิจกรรมสูงสุดที่ pH 8.5 ได้ถูกถือว่าเป็นกิจกรรม 100% มั่นคง pH ของเอนไซม์ถูกกำหนด โดย incubating เอนไซม์ในข้อมูลต่าง ๆ ใน 60 นาทีที่ 25 ° C และเอนไซม์เหลือกำหนดที่ pH 10.0 และ 30 ° C โดยใช้ BAPNA กับพื้นผิว กิจกรรมของเอนไซม์ก่อนบ่มถูกนำเป็น 100% โซลูชั่นของบัฟเฟอร์ที่ใช้สำหรับกิจกรรม pH และความมั่นคงจะนำเสนอใน 2 ส่วน บาร์แทนส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานจาก triplicate determinations

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อุณหภูมิต่าง ๆ assayed ยังมีเรื่องที่เกี่ยวกับผลกระทบต่อการทำงานของเอนไซม์ (รูป. 4a) ผลการวิจัยพบว่า trypsin บาร์เบลได้ใช้งานในช่วงอุณหภูมิที่กว้าง (30-70 ° C) มีกิจกรรมที่เหมาะสมถูกบันทึกไว้ที่ประมาณ 55 องศาเซลเซียส กิจกรรมญาติที่ 40, 50, และ 60 ° C ประมาณ 48.4%, 92% และ 94% ตามลำดับ อุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับการบันทึก trypsin จากบี callensis ก็คล้ายคลึงกับหนึ่งในรายงานก่อนหน้านี้สำหรับ Trypsin จาก sardinelle (เอสตะ) (เบนเลด et al., 2008) ซึ่งต่ำกว่าหนึ่ง (70 ° C) อธิบาย trypsin ปลาหมึก (Balti et al., 2009) และสูงกว่าหนึ่ง (40 ° C) อธิบายสำหรับกวางสีเทารายละเอียดเสถียรภาพทางความร้อนของtrypsin บริสุทธิ์เปิดเผยว่าในขณะที่เอนไซม์ที่มีเสถียรภาพสูงที่อุณหภูมิต่ำกว่า 40 องศาเซลเซียสก็ถูกยกเลิกที่ อุณหภูมิที่สูงขึ้น (รูป. 4b) เอนไซม์ที่เก็บไว้กว่า 88% และ 75% ของกิจกรรมเริ่มต้นหลังจาก 60 นาทีบ่มที่ 50 และ 60 องศาเซลเซียสตามลำดับ เสถียรภาพทางความร้อนที่แสดงโดยบี callensis trypsin ก็คล้ายกับคนที่มีการรายงานก่อนหน้านี้สำหรับเลี้ยงลูกด้วยนมทางทะเลอื่น ๆ และ trypsins กระดูกสันหลัง (เบนเลด et al., 2008 และ Barkia et al., 2010) เสถียรภาพสังเกต trypsin จากบี callensis สูงกว่าที่รายงานก่อนหน้านี้สำหรับ trypsin จาก caeca กระเพาะอาหารของปลาแซลมอนปลาไชน็อก (ที่ทุม tshawytscha) ซึ่งหายไปกว่า 90% ของกิจกรรมของตนหลังจากที่ความร้อนที่ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีค่าpH รายละเอียด (ก) และความมั่นคงพีเอช (ข) ของ trypsin บริสุทธิ์จากอวัยวะภายในของ callensis บี กิจกรรม trypsin ได้รับการวิเคราะห์ค่า pH อยู่ในช่วงของวันที่ 30 5.0-13.0 องศาเซลเซียส กิจกรรมที่ได้รับสูงสุดที่ pH 8.5 ได้รับการพิจารณาเป็นกิจกรรม 100% เสถียรภาพค่า pH ของเอนไซม์ถูกกำหนดโดยการบ่มเอนไซม์ในบัฟเฟอร์ที่แตกต่างกัน 60 นาทีที่ 25 ° C และกิจกรรมของเอนไซม์ที่เหลือก็ตัดสินใจที่ pH 10.0 และ 30 องศาเซลเซียสโดยใช้ BAPNA เป็นสารตั้งต้น การทำงานของเอนไซม์ก่อนการบ่มที่ถูกนำมาเป็น 100% สารละลายบัฟเฟอร์ที่ใช้สำหรับกิจกรรมที่พีเอชและความมั่นคงถูกนำเสนอในมาตรา 2 บาร์เป็นตัวแทนของส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานจากการหาความเพิ่มขึ้นสามเท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อุณหภูมิต่าง ๆ มีปริมาณถึงผลกระทบต่อกิจกรรมของเอนไซม์ ( รูปที่ 4 ) ผลการวิจัยพบว่า ซินบาร์เบลถูกใช้งานที่อุณหภูมิช่วงกว้าง ( 30 - 70 ° C ) กับกิจกรรมที่ถูกบันทึกไว้ที่ประมาณ 55 องศา กิจกรรมสัมพัทธ์ที่ 40 50 และ 60 องศา C ประมาณ 48.4 % , ร้อยละ 92 และ 94 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ อุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับทริปที่บันทึกไว้ตั้งแต่ปี พ.callensis คล้ายกับหนึ่งรายงานว่า ก่อนหน้านี้ สำหรับทริปจาก sardinelle ( S . aurita ( เบน ) เลด et al . , 2008 ) , น้อยกว่าหนึ่ง ( 70 ° C ) อธิบายสำหรับปลาหมึกซิน ( Balti et al . , 2009 ) , และมากกว่าหนึ่ง ( 40 ° C ) อธิบายสำหรับวัว
สีเทา
เสถียรภาพทางความร้อนโปรไฟล์ของเอนไซม์บริสุทธิ์ พบว่า ในขณะที่เอนไซม์มีความเสถียรสูงที่อุณหภูมิต่ำกว่า 40 องศา C มันเป็นเจ้าบ้านที่อุณหภูมิสูง ( รูปที่ 4B ) เอนไซม์รักษามากกว่า 88% และ 75% ของกิจกรรมในเบื้องต้นหลังจาก 60 นาทีบ่มที่ 50 และ 60 องศาองศาเซลเซียส ตามลำดับ ด้านเสถียรภาพต่อความร้อนที่แสดงโดยcallensis ซินมันคล้ายกับก่อนหน้านี้รายงานอื่น ๆทางทะเลและสัตว์มีกระดูกสันหลังสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลัง trypsins ( เบน Khaled et al . , 2008 และ barkia et al . , 2010 ) เสถียรภาพสังเกตสำหรับทริปจาก พ. callensis สูงกว่าที่เคยรายงานสำหรับทริปจากพยาธิ pyloric ของ Chinook ปลาแซลมอน ( Otshawytscha ) ซึ่งหายไปมากกว่าร้อยละ 90 ของกิจกรรมหลังจากความร้อนที่ 60 องศา C นาน 30 นาที


อโปรไฟล์ ( ) และเสถียรภาพ pH ( B ) ของเอนไซม์บริสุทธิ์จากอวัยวะภายในของ callensis . กิจกรรมของเอนไซม์ซีรั่มในช่วง pH 5.0 – 3.2 ที่ 30 องศา สูงสุดที่ pH 8.5 กิจกรรมรับจัดกิจกรรม 100 %pH เสถียรภาพของเอนไซม์ถูกกำหนดโดยการแช่เอนไซม์ในบัฟเฟอร์ที่แตกต่างกันสำหรับ 60 นาทีที่ 25 ° C และเอนไซม์ที่เหลือตั้งใจที่พีเอช 10.0 และ 30 องศา C โดยใช้ bapna เป็นสับสเตรท กิจกรรมของเอนไซม์ก่อนที่จะบ่มเพาะเป็นถ่ายเป็น 100 % สารละลายบัพเฟอร์ที่ใช้สำหรับกิจกรรม และความมั่นคงจะนำเสนอในส่วนที่ 2บาร์แทนส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานจากทำสำเนาสามฉบับข้างต้น .