Development of a robust dsRNA feedi

Development of a robust dsRNA feeding methodology in
insects that mimics the results obtainable with C. elegans
(where efficient suppression of gene expression by orally
delivered dsRNA is routine) is a prerequisite for utilization
of RNAi for crop protection against insect pests.
Turner et al. [31] provided a convincing demonstration
of RNAi effects after dsRNA feeding in larvae of the
light brown apple moth (Epiphyas postvittana). dsRNAs directed against carboxyesterases were incorporated into
an artificial diet. Gene repression was observed after two
days of feeding, and maximal repression occurred after
seven days. These genes are thought to be gut-expressed,
and thus only a local RNAi effect was required for repression.
However, in the same investigation, knockdown of a
gene expressed in the adult antenna could be achieved
through feeding dsRNA to larvae, demonstrating a persistence
of the RNAi signal throughout the larval and
adult stages and a systemic spread of RNAi signal from
the gut to the antennae. In contrast to these positive
results, an earlier report showed that midgut aminopeptidase-
N gene in larvae of the lepidopteran Spodoptera
litura was efficiently downregulated by microinjection of
dsRNA into the insect haemoceol but stated that attempts
to feed dsRNA were unsuccessful in generating an RNAi
response [28], although no details of methodology were
given. An RNAi response after feeding dsRNA has also
been reported in the bug Rhodnius prolixus (Hemiptera),
where a salivary gland transcript encoding nitroporin 2
(NP2) was targeted both by oral delivery of dsRNA and by
microinjection [32]. Both treatments produced downregulation
of NP2 expression; however, microinjection was
more effective (75% reduction in gene expression) than
dsRNA feeding (42% reduction).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พัฒนาของ dsRNA มีประสิทธิภาพที่ระเบียบวิธีการให้อาหารแมลงที่เลียนแบบผลที่สิทธิได้รับ ด้วย C. elegans(ที่ปราบปรามที่มีประสิทธิภาพของยีนโดยเนื้อหาdsRNA ที่จัดเป็นประจำ) เป็นข้อกำหนดเบื้องต้นสำหรับใช้ประโยชน์ของ RNAi ในพืชป้องกันแมลงศัตรูพืชการสาธิตที่น่าเชื่อถือให้ Turner et al. [31]RNAi ผลหลังอาหารในตัวอ่อนของ dsRNAmoth แอปเปิ้ลสีน้ำตาลอ่อน (Epiphyas postvittana) dsRNAs ตรงกับ carboxyesterases ถูกรวมเข้าไปในอาหารการประดิษฐ์ ปราบปรามยีนถูกพบหลังจากสองวันให้อาหาร และปราบปรามสูงสุดเกิดขึ้นหลังจากเจ็ดวัน ยีนเหล่านี้จะคิดว่า เป็นลำไส้แสดงและดังนั้น เฉพาะท้องถิ่น RNAi ผลถูกต้องปราบปรามอย่างไรก็ตาม ในเดียวกัน knockdown ของการยีนที่แสดงในเสาผู้ใหญ่สามารถทำได้ผ่านอาหาร dsRNA จะตัวอ่อน เห็นการมีอยู่สัญญาณ RNAi ตลอดการ larval และขั้นผู้ใหญ่และแพร่กระจายระบบของ RNAi สัญญาณจากลำไส้กับเสาอากาศ ตรงข้ามเหล่านี้เป็นค่าบวกแสดงผล การรายงานก่อนหน้านี้ aminopeptidase midgut ที่-ยีน N ในตัวอ่อนของ lepidopteran Spodopteralitura ถูก downregulated โดย microinjection ของได้อย่างมีประสิทธิภาพdsRNA เข้า haemoceol แมลงแต่ระบุที่พยายามให้อาหาร dsRNA ประสบความสำเร็จในการสร้างการ RNAiตอบ [28], แม้ว่าไม่มีรายละเอียดของวิธีได้กำหนดให้ การตอบสนองของ RNAi หลังอาหาร dsRNA มีการรายงานในข้อผิดพลาด Rhodnius prolixus (Hemiptera),ต่อมน้ำลายเสียงบรรยายเข้า nitroporin 2(NP2) ถูกเป้าหมาย ทั้งปากจัด ของ dsRNA และโดยmicroinjection [32] รักษาทั้งผลิต downregulationNP2 นิพจน์ อย่างไรก็ตาม microinjection ถูกมีประสิทธิภาพมากขึ้น (ลดลง 75% ยีน) มากกว่าdsRNA อาหาร (ลด 42%)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การพัฒนาวิธีการให้อาหาร dsRNA
ที่แข็งแกร่งในแมลงที่เลียนแบบผลที่จะได้รับกับC. elegans
(ที่มีประสิทธิภาพในการปราบปรามการแสดงออกของยีนโดยปากเปล่าส่ง dsRNA เป็นประจำ) เป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการใช้ประโยชน์ของRNAi สำหรับการป้องกันพืชกับแมลงศัตรูพืช. เทอร์เนอ et al, [31] ให้การสาธิตที่น่าเชื่อถือของผลกระทบRNAi หลังจาก dsRNA การให้อาหารในตัวอ่อนของผีเสื้อกลางคืนแอปเปิ้ลสีน้ำตาลอ่อน(Epiphyas postvittana) dsRNAs โดยตรงต่อ carboxyesterases ถูกรวมเข้าไปในอาหารเทียม การปราบปรามยีนพบว่าหลังจากที่สองวันของการให้อาหารและการปราบปรามสูงสุดเกิดขึ้นหลังจากเจ็ดวัน ยีนเหล่านี้มีความคิดที่จะเป็นไส้แสดงและทำให้เพียงผล RNAi ท้องถิ่นที่ถูกต้องสำหรับการปราบปราม. อย่างไรก็ตามในการสืบสวนเดียวกันล้มลงของยีนที่แสดงออกในเสาอากาศผู้ใหญ่จะประสบความสำเร็จผ่านการให้อาหารdsRNA ตัวอ่อนแสดงให้เห็นถึงการติดตาของสัญญาณ RNAi ตลอดทั้งตัวอ่อนและขั้นตอนที่เป็นผู้ใหญ่และการแพร่กระจายของสัญญาณระบบRNAi จากลำไส้ไปยังเสาอากาศ ในทางตรงกันข้ามกับเหล่านี้บวกผลรายงานก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่ากระเพาะ aminopeptidase- ยีน N in ตัวอ่อนของ Lepidopteran Spodoptera litura ได้อย่างมีประสิทธิภาพโดย downregulated microinjection ของdsRNA เข้า haemoceol แมลง แต่ระบุว่าความพยายามที่จะเลี้ยงdsRNA ไม่ประสบความสำเร็จในการสร้าง RNAi ตอบสนอง [ 28] แม้ว่ารายละเอียดของวิธีการไม่ได้รับได้รับ การตอบสนอง RNAi หลังจากให้อาหาร dsRNA ยังได้รับการรายงานในข้อผิดพลาดRhodnius prolixus (Hemiptera) ซึ่งเป็นหลักฐานต่อมน้ำลายเข้ารหัส nitroporin 2 (NP2) เป็นเป้าหมายทั้งโดยการส่งช่องปากของ dsRNA และmicroinjection [32] การรักษาทั้งสองผลิต downregulation การแสดงออก NP2; แต่ microinjection เป็นมีประสิทธิภาพมากขึ้น(ลดลง 75% ในการแสดงออกของยีน) มากกว่าdsRNA ให้อาหาร (ลด 42%)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การพัฒนาประสิทธิภาพการให้ dsRNA วิธีการ
แมลงที่เลียนแบบผลที่หาได้กับ C .
( ถิ่นที่มีประสิทธิภาพปราบปรามการแสดงออกของยีนโดยปากเปล่า
ส่ง dsRNA มีรูทีน ) เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการใช้ประโยชน์ของ RNAi เพื่อป้องกันพืช

กับแมลงศัตรูพืช เทอร์เนอร์ et al . [ 31 ] ให้
สาธิตน่าเชื่อถือ RNAi ผลหลังจาก dsRNA การให้หนอนของ
แสงแอปเปิ้ลมอดสีน้ำตาล ( epiphyas postvittana ) dsrnas กำกับกับ carboxyesterases
ถูกรวมเข้าไปในอาหารเทียม จีนปราบปรามพบว่าหลังจากสอง
วันของอาหาร และการปราบปรามสูงสุดที่เกิดขึ้นหลังจาก
7 วัน ยีนเหล่านี้จะคิดว่าเป็นไส้แสดงออก
จึงเพียงท้องถิ่นหาผลคือต้องปราบปราม .
แต่ในคดีเดียวกัน น็อคดาวน์ ของ
ยีนที่แสดงออกในผู้ใหญ่เสาอากาศได้
ผ่านการเลี้ยงตัวอ่อนถึง dsRNA , ติดตา
สัญญาณ RNAi ตลอดระยะตัวอ่อนและ
ผู้ใหญ่และการแพร่กระจายของสัญญาณจากระบบหา
ท้องกับเสาอากาศ ในทางตรงกันข้ามกับผลเหล่านี้บวก
, รายงานก่อนหน้านี้พบว่าประสิทธิภาพและเหมาะสมบางหน -
n ยีนในหนอนของ lepidopteran Spodoptera
เป็ดเนื้อได้อย่างมีประสิทธิภาพ downregulated ไมโครอินเจคชันของ
dsRNA เข้าสู่แมลง haemoceol แต่ระบุว่า ความพยายาม
ให้อาหาร dsRNA ก็ไม่ประสบความสำเร็จในการสร้างการตอบสนอง RNAi
[ 28 ] ถึงแม้ไม่มีรายละเอียดของวิธีการเป็น
ได้รับ การตอบสนองหลังจากให้อาหาร dsRNA RNAi ยังมี
มีรายงานข้อผิดพลาด rhodnius prolixus ( อันดับ Hemiptera )
ที่ต่อมน้ำลาย nitroporin Transcript 2
โดย( np2 ) เป็นเป้าหมายโดยส่งทั้งปากเปล่าและ dsRNA โดย
จังหวัดสุพรรณบุรี [ 32 ] ทั้งสองชนิดที่ผลิต downregulation
การแสดงออกของ np2 ; อย่างไรก็ตาม , ไมโครอินเจคชันคือ
มีประสิทธิภาพมากขึ้น ( ลด 75% ในการแสดงออกของยีน ) มากกว่า
dsRNA อาหาร ( ลด 42% )