3.10. Analysis of DNA damage by the comet assay
Analysis of DNA damage was measured in mouse fibroblasts (3T3-L1) by using the comet assay. The length of the comet was measured and used as an index of the extent of DNA damage.
DNA damage was induced in 3T3-L1 cells by the addition of 100 lM of hydrogen peroxide. This induced a comet tail length of 11.18 } 0.7 lM. In treated groups, the effect of the tea extract on protection was tested by pre-treating the cells with various concentrations (5–25 lM) of hot water WTE and then treating with 100 lM of H2O2. Another control group with no H2O2 treatment served as the normal negative control group.
The results are presented in Fig. 4. The comet length for cells pre-treated with 5, 10, 15, 20 and 25 lg/ml concentration of the extract and then treated with H2O2 was 9.3 } 0.5, 9.07 } 0.8, 7.2 } 1.06, 5.3 } 0.7 and 3.9 } 0.3 lM, respectively. The length of the comet in the normal group (control without H2O2) was 1.29 } 0.5 lg/ml. 3T3-L1 cells which were pre-treated with C. sinensis extract at 5–25 lg/ml showed a significant dose-dependent decrease in comet tail length compared to the control of H2O2 treatment alone (P < 0.05). This translates into statistically significant (p < 0.05) protection against DNA damage of 16.7, 18.6, 35.1, 52.4, 64.3% with treatment of 5, 10, 15, 20 and 25 lg/ml concentrations of the extract, respectively. At a concentration of 25 lg/ml, the white tea extract could protect normal cells against H2O2- induced DNA damage up to 64.3%.
Reactive oxygen species (ROS) are involved in a number of degenerative diseases such as atherosclerosis, cancer, liver cirrhosis and diabetes mellitus .ROS can cause oxidative damage and interact with cellular macromolecules such as DNA, proteins, fatty acids and carbohydrates. It is known that the damage to macromolecules, especially DNA, leads to many degenerative diseases like cancer .
Our results indicate that the white tea extract could significantly protect DNA damage even at low concentrations and this increases with increasing concentrations of the white tea extract. Reactive hydroxyl radicals produced from H2O2 by the Fenton reaction, can bind to DNA at metal binding sites and induce strand breaks associated with DNA damage, mutations and genetic instability which could lead to carcinogenesis.
3.10 การวิเคราะห์ความเสียหายของดีเอ็นเอโดยวิเคราะห์ดาวหางวิเคราะห์ความเสียหายของดีเอ็นเอถูกวัดใน fibroblasts เมาส์ (3T3-L1) โดยวิเคราะห์ดาวหาง ความยาวของดาวหางถูกวัด และใช้เป็นดัชนีของขอบเขตของความเสียหายของดีเอ็นเอ ความเสียหายของดีเอ็นเอที่เกิดในเซลล์ 3T3 L1 ด้านนอก 100 lM ของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ นี้เกิดจากความยาวหางของดาวหางของ 11.18 } 0.7 lM ในกลุ่มบำบัด ทดสอบผลของสารสกัดจากชาป้องกันรักษาเซลล์ ด้วย (5-25 lM) ความเข้มข้นต่าง ๆ ของเครื่องทำน้ำอุ่น WTE ก่อน และรักษาแล้ว 100 lM ของ H2O2 กลุ่มควบคุมอื่นกับไม่รักษา H2O2 เป็นกลุ่มควบคุมปกติลบมีแสดงผลใน Fig. 4 ดาวหางความยาวสำหรับเซลล์รับ 5, 10, 15, 20 และ 25 lg/ml เข้มข้นของการดึงข้อมูลล่วงหน้าแล้ว รักษา ด้วย H2O2 9.3 } 0.5, 9.07 } 0.8, 7.2 } 1.06, 5.3 } 0.7 และ 3.9 } 0.3 lM ตามลำดับ ความยาวของดาวหางในกลุ่มปกติ (ควบคุม โดย H2O2) ถูก 1.29 } 0.5 lg / มล 3T3 L1 เซลล์ซึ่งก่อนบำบัด C. sinensis แยกที่ 5 – 25 lg/ml พบว่าลดลงขึ้นอยู่กับปริมาณสำคัญในดาวหางหางยาวเมื่อเทียบกับการควบคุมของ H2O2 รักษาเพียงอย่างเดียว (P < 0.05) นี้แปลเป็นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p < 0.05) ป้องกันความเสียหายของดีเอ็นเอของ 16.7, 18.6, 35.1, 52.4, 64.3% ด้วยการรักษา 5, 10, 15, 20 และ lg 25 ml ความเข้มข้นของสารสกัด ตามลำดับ ที่ความเข้มข้นของ lg 25 ml สารสกัดชาขาวสามารถป้องกันเซลล์ปกติกับ H2O2-ดีเอ็นเอที่เหนี่ยวนำให้เกิดความเสียหายถึง 64.3%ชนิดปฏิกิริยาออกซิเจน (ROS) เกี่ยวข้องกับในจำนวนโรคเสื่อมหลอดเลือด มะเร็ง ตับแข็งตับ และเบาหวานROS สามารถทำให้เกิดความเสียหาย oxidative และโต้ตอบกับ macromolecules เซลดีเอ็นเอ โปรตีน กรดไขมัน และคาร์โบไฮเดรต เป็นที่รู้จักกันว่า macromolecules โดยเฉพาะอย่างยิ่งดีเอ็นเอ ความเสียหายที่นำไปสู่โรคเสื่อมต่าง ๆ เช่นโรคมะเร็งผลของเราบ่งชี้ว่า สารสกัดจากชาขาวอย่างมีนัยสำคัญสามารถป้องกันความเสียหายของดีเอ็นเอแม้ที่ความเข้มข้นต่ำ และเพิ่ม ด้วยการเพิ่มความเข้มข้นของสารสกัดชาขาว ไฮดรอกซิลปฏิกิริยาอนุมูลผลิต H2O2 โดยปฏิกิริยา Fenton สามารถผูกเข้ากับดีเอ็นเอที่อเมริการวมโลหะ และก่อให้เกิดแบ่งสาระที่เกี่ยวข้องกับดีเอ็นเอเสียหาย กลายพันธุ์ และความไม่แน่นอนทางพันธุกรรมซึ่งอาจนำไปสู่ carcinogenesis
การแปล กรุณารอสักครู่..

3.10 การวิเคราะห์ความเสียหายของดีเอ็นเอโดยการทดสอบดาวหาง
วิเคราะห์ความเสียหายของดีเอ็นเอวัดในรบราเมาส์ (3T3-L1) โดยใช้การทดสอบดาวหาง ความยาวของดาวหางวัดและใช้เป็นดัชนีของขอบเขตของความเสียหายของดีเอ็นเอ.
ทำลายดีเอ็นเอถูกชักนำในเซลล์ 3T3-L1 โดยนอกเหนือจาก 100 lm ของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ นี้ชักนำความยาวของหางของดาวหาง 11.18 ??} 0.7 LM ในกลุ่มที่ได้รับผลกระทบจากสารสกัดจากชาในการป้องกันได้รับการทดสอบโดยก่อนการรักษาเซลล์ที่มีความเข้มข้นต่างๆ (5-25 LM) ของ WTE น้ำร้อนแล้วการรักษาด้วย 100 lm ของ H2O2 กลุ่มควบคุมอีกด้วยการรักษาไม่มี H2O2 ทำหน้าที่เป็นกลุ่มควบคุมเชิงลบปกติ.
ผลที่จะนำเสนอในรูป 4. ระยะเวลาในดาวหางสำหรับเซลล์ก่อนรับการรักษาด้วย 5, 10, 15, 20 และ 25 LG / มลความเข้มข้นของสารสกัดและได้รับการรักษาแล้วด้วย H2O2 เป็น 9.3 ??} 0.5, 9.07 ??} 0.8, 7.2 ??} 1.06 5.3 ??} 0.7 และ 3.9 ??} LM 0.3 ตามลำดับ ความยาวของดาวหางในกลุ่มปกติ (โดยไม่ต้องควบคุม H2O2) เป็น 1.29 ??} 0.5 LG / ml เซลล์ 3T3-L1 ซึ่งได้รับการรักษาก่อนด้วยสารสกัดจาก C. sinensis ที่ 5-25 LG / ml แสดงให้เห็นอย่างมีนัยสำคัญขึ้นอยู่กับปริมาณที่ลดลงมีความยาวหางของดาวหางเมื่อเทียบกับการควบคุมของการรักษา H2O2 เพียงอย่างเดียว (p <0.05) นี้แปลเป็นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p <0.05) การป้องกันการทำลายดีเอ็นเอ 16.7, 18.6, 35.1, 52.4, 64.3% และมีการรักษา 5, 10, 15, 20 และ 25 LG / ความเข้มข้นของสารสกัดจากมล. ตามลำดับ ที่ความเข้มข้น 25 LG / ml, สารสกัดจากชาขาวสามารถปกป้องเซลล์ปกติกับ H2O2- เหนี่ยวนำให้เกิดความเสียหายดีเอ็นเอได้ถึง 64.3%.
ออกซิเจน (ROS) มีส่วนร่วมในจำนวนของโรคเสื่อมเช่นหลอดเลือด, โรคมะเร็ง, โรคตับแข็ง และโรคเบาหวาน .ROS สามารถก่อให้เกิดความเสียหายออกซิเดชันและมีปฏิสัมพันธ์กับโมเลกุลของเซลล์เช่นดีเอ็นเอโปรตีนกรดไขมันและคาร์โบไฮเดรต มันเป็นที่รู้จักว่าความเสียหายให้กับโมเลกุลโดยเฉพาะดีเอ็นเอที่นำไปสู่โรคเสื่อมต่างๆเช่นโรคมะเร็ง.
ผลของเราแสดงให้เห็นว่าสารสกัดจากชาขาวอย่างมีนัยสำคัญสามารถป้องกันการทำลาย DNA แม้ในความเข้มข้นต่ำและเพิ่มขึ้นนี้มีความเข้มข้นที่เพิ่มขึ้นของสารสกัดจากชาขาว อนุมูลไฮดรอกซิปฏิกิริยาที่ผลิตจาก H2O2 จากปฏิกิริยาเฟนตั้นสามารถผูกกับดีเอ็นเอที่โลหะเว็บไซต์ผูกพันและทำให้เกิดการแบ่งกลุ่มสาระที่เกี่ยวข้องกับการทำลายดีเอ็นเอกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมและความไม่แน่นอนซึ่งอาจนำไปสู่การเกิดมะเร็ง
การแปล กรุณารอสักครู่..

3.10 . การวิเคราะห์ความเสียหายของดีเอ็นเอโดยดาวหางวิเคราะห์
การวิเคราะห์ความเสียหายของดีเอ็นเอถูกวัดจากเมาส์ ( 3t3-l1 ) โดยใช้ดาวหาง ตามลำดับ ความยาวของดาวหางถูกวัด และใช้เป็นดัชนีของขอบเขตของความเสียหายของดีเอ็นเอ
ความเสียหายของดีเอ็นเอในเซลล์ โดยการ 3t3-l1 เพิ่ม 100 LM ของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ นี้เกิดจากดาวหางหางความยาว 11.18 ? } 0.7 ไมโครเมตร ในการรักษากลุ่มผลของสารสกัดชาคุ้มครองได้ถูกตรวจสอบโดยก่อนการรักษาเซลล์ที่มีความเข้มข้นต่างๆ ( 5 – 25 ไมโครเมตร ) ของ wte น้ำร้อนแล้วการรักษาด้วย 100 LM ของแบตเตอรี่ . อีกกลุ่มที่ไม่มีการรักษาแบตเตอรี่ทำหน้าที่เป็นปกติ กับกลุ่มควบคุมลบ ผลลัพธ์ที่แสดงในรูป
4 ความยาวดาวหางสำหรับเซลล์ก่อนการรักษาด้วย 5 , 10 , 1520 และ 25 LG / ml ความเข้มข้นของสารสกัด แล้วปฏิบัติกับ H2O2 คือ 9.3 ? 0.5 ? } } 9.07 , 0.8 , 7.2 ? } 1.06 , 5.3 ? } ? } 0.3 LM 0.7 และ 3.9 ตามลำดับ ความยาวของดาวหางในกลุ่มปกติ ( ควบคุมโดย H2O2 ) เป็น 1.29 ? } 0.5 LG / มล. 3t3-l1 เซลล์ซึ่งก่อนปฏิบัติด้วย Cไซแนนซิส แยกที่ 5 – 25 LG / ml พบว่าลดลงอย่างมีนัยสำคัญในสัปดาห์ดาวหางหางยาวเมื่อเทียบกับการควบคุมการรักษาแบตเตอรี่เพียงอย่างเดียวอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( P < 0.05 ) นี้แปลเป็น อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( P < 0.05 ) ป้องกันความเสียหายของดีเอ็นเอของญี่ปุ่นรายงานโครงการ , , , 64.3 % มีส่วนช่วยรักษา , 5 , 10 , 15 , 20 และ 25 LG / ml ความเข้มข้นของสารสกัด ตามลำดับความเข้มข้นของ LG / 25 มิลลิลิตร สารสกัดชาขาวสามารถปกป้องเซลล์ปกติกับแบตเตอรี่ - เกิดความเสียหายของดีเอ็นเอถึง 64.3 %
ชนิดออกซิเจนปฏิกิริยา ( ROS ) จะเกี่ยวข้องกับจำนวนของโรคเสื่อม เช่น หลอดเลือด มะเร็ง ตับแข็ง ตับ เบาหวาน รอส สามารถทำให้เกิดความเสียหายออกซิเดชันและโต้ตอบกับโมเลกุลโทรศัพท์มือถือเช่น DNA , โปรตีนกรด ไขมัน และคาร์โบไฮเดรต มันเป็นที่รู้จักกันว่า ความเสียหายของโมเลกุล โดยเฉพาะดีเอ็นเอ นำไปสู่โรคเสื่อมมากมายเช่นมะเร็ง
ผลของเราระบุว่าสารสกัดชาขาวสามารถมากปกป้องความเสียหายของดีเอ็นเอที่ความเข้มข้นต่ำและนี้เพิ่มขึ้นเมื่อเพิ่มความเข้มข้นของ สารสกัดชาขาว .ผลิตจากปฏิกิริยาอนุมูลไฮดรอกซิล H2O2 ด้วยปฏิกิริยาเฟนตัน สามารถผูกกับดีเอ็นเอที่เว็บไซต์โลหะ และก่อให้เกิดเส้นแบ่งที่เกี่ยวข้องกับความเสียหายของดีเอ็นเอ , การกลายพันธุ์ทางพันธุกรรม และความไม่แน่นอนที่อาจก่อให้เกิดมะเร็ง
การแปล กรุณารอสักครู่..
