Cell culture and immunocytochemistr

Cell culture and immunocytochemistry. HeLa cells were grown in
modified Eagle’s minimal essential medium (MEM) with 10%
NuSerum, and 1% penicillin/streptomycin from Life Technologies
(Grand Island, NY). HeLa cells stably expressing LDLR-GFP (HeLa-
LDLR-GFP) were grown in modified Eagle’s minimal essential medium
(MEM) with 10% NuSerum, and 500 lg/ml G418 from Sigma.
All cells were maintained at 37 C in a humidified atmosphere of
95% air, 5% CO2. For uptake experiments, the following concentrations
were used: Tf-FITC (40 lg/ml), LDL-DiI (5 lg/ml), and EGFAlexa488
(2 lg/ml). Following treatment with endocytic tracers
and PLA2 antagonists, cells were fixed and processed for immunofluorescence
as described [13], and analyzed with a Zeiss Axioscope
II equipped with a Hamamatsu Orca II digital camera and
Openlab software by Improvision, or a Perkin-Elmer UltraVIEW
spinning disc confocal microscope and software.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพาะเลี้ยงเซลล์และ immunocytochemistry มีปลูกเซลล์ HeLa ในแก้ไขอินทรีน้อยสำคัญปานกลาง (MEM) 10%NuSerum และยาเพนนิซิลลิน 1% / streptomycin จากเทคโนโลยีชีวิต(เกาะแกรนด์ NY) เซลล์ HeLa แสดง LDLR GFP (HeLa-stablyLDLR-GFP) ถูกปลูกในแก้ไขอินทรีกลางสำคัญน้อยที่สุด(MEM) ด้วย 10% NuSerum และ 500 lg/ml G418 จากซิกเซลล์ทั้งหมดถูกเก็บรักษาที่ 37 C ในบรรยากาศ humidified ของเครื่อง 95%, 5% CO2 สำหรับการทดลองการดูดซับ ความเข้มข้นต่อไปนี้ใช้: Tf FITC (40 lg/มล), LDL ดีทู (5 lg/มล.), และ EGFAlexa488(2 lg/มล.) ต่อการรักษา ด้วย endocytic tracersและถาวร และประมวลผลสำหรับ immunofluorescence PLA2 ตัว เซลล์เป็นการกล่าวถึง [13], และวิเคราะห์กับ Zeiss Axioscopeพร้อมกับกล้องดิจิตอลฮามามัชซุ Orca II II และซอฟต์แวร์ Openlab Improvision หรือ UltraVIEW เพอร์เอลเมอปั่นกล้องจุลทรรศน์ confocal ดิสก์และซอฟต์แวร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเพาะเลี้ยงเซลล์วิทยา เซลล์ HeLa ถูกปลูกใน
การปรับเปลี่ยนขนาดกลางที่สำคัญน้อยที่สุดของนกอินทรี (MEM) 10%
NuSerum และยาปฏิชีวนะ% 1 / streptomycin จากไลฟ์เทคโนโลยีส์
(แกรนด์ไอส์แลนด์นิวยอร์ก) เซลล์ HeLa เสถียรแสดง LDLR-GFP (HeLa-
LDLR-GFP) ได้รับการปลูกในการปรับเปลี่ยนขนาดกลางที่สำคัญน้อยที่สุดของนกอินทรี
(MEM) 10% NuSerum, และ 500 LG / ml g418 จาก Sigma.
เซลล์ทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในความชื้น บรรยากาศของ
อากาศ 95% CO2 5% สำหรับการทดลองการดูดซึม, ความเข้มข้นต่อไปนี้
ถูกนำมาใช้: TF-FITC (40 LG / ml) ระดับ LDL-DII (5 LG / ml) และ EGFAlexa488
(2 LG / ml) ต่อไปนี้การรักษาด้วยสืบหา endocytic
และคู่อริ PLA2 เซลล์ได้รับการแก้ไขและการประมวลผลสำหรับ immunofluorescence
ตามที่อธิบายไว้ [13] และวิเคราะห์ด้วย Zeiss Axioscope
ครั้งที่สองพร้อมกับ Hamamatsu Orca II กล้องดิจิตอลและ
ซอฟแวร์ Openlab โดย Improvision หรือ Perkin-Elmer UltraView
ปั่น แผ่นกล้องจุลทรรศน์ confocal และซอฟต์แวร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเพาะเลี้ยงเซลล์ และ immunocytochemistry . ล่าเซลล์เติบโตใน
ดัดแปลงน้อยที่สุดที่จำเป็นของนกอินทรีขนาดกลาง ( แหม่ม ) กับ 10 %
nuserum และ 1% เพนนิซิลลิน / ยารักษาจากเทคโนโลยีกับชีวิต
( เกาะแกรนด์ , นิวยอร์ก ) ล่าเซลล์เสถียรแสดง ldlr-gfp ( Hela -
ldlr-gfp ) ปลูกในที่ดัดแปลงน้อยที่สุดที่จำเป็นของนกอินทรีขนาดกลาง
( แหม่ม ) 10% nuserum และ 500 LG / ml g418
จาก Sigmaเซลล์ทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ในบรรยากาศของ  humidified
95% เครื่อง CO2 5% สำหรับการใช้ในการทดลองต่อไปนี้ใช้ความเข้มข้น
: TF fitc ( 40 ) / ml ) LDL ที่ไม่ดี ( 5 ) ต่อมิลลิลิตร ) และ egfalexa488
( 2 ) / ml ) ต่อไปนี้การรักษาด้วยการ endocytic
pla2 ปฏิปักษ์และเซลล์ได้รับการแก้ไขและการประมวลผลสำหรับ D
ตามที่อธิบายไว้ [ 13 ] และวิเคราะห์กับ Zeiss axioscope
2 พร้อมกับ Hamamatsu Orca II กล้องดิจิตอลและซอฟต์แวร์ openlab
โดย improvision หรือเพอร์กินเอลเมอร์ ultraview
หมุนแผ่นดิสก์ด้วยกล้องจุลทรรศน์และซอฟต์แวร์