Incubating the QIAamp Mini spin col

Incubating the QIAamp Mini spin column loaded with Buffer AE or water for 5 minat room temperature before centrifugation generally increases DNA yield.A second elution step with a further 200 μl Buffer AE will increase yields by upto 15%.Volumes of more than 200 μl should not be eluted into a 1.5 ml microcentrifugetube because the spin column will come into contact with the eluate, leading topossible aerosol formation during centrifugation.Elution with volumes of less than 200 μl increases the final DNA concentration inthe eluate significantly, but slightly reduces the overall DNA yield (see Table 5,page 25). For samples containing less than 1 μg of DNA, elution in 50 μl BufferAE or water is recommended. Eluting with 2 x 100 μl instead of 1 x 200 μl doesnot increase elution efficiency.For long-term storage of DNA, eluting in Buffer AE and storing at –30 to –15°C isrecommended, since DNA stored in water is subject to acid hydrolysis.A 200 μl sample of whole human blood (approximately 5 x 106 leukocytes/ml)typically yields 6 μg of DNA in 200 μl water (30 ng/μl) with an A260/A280 ratio of1.7–1.9.For more information about elution and how to determine DNA yield, purity, andlength, refer to pages 24–25 and Appendix A, page 50.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ฟักคอลัมน์ปั่น QIAamp Mini เต็มไปด้วยบัฟเฟอร์ AE หรือน้ำเป็นเวลา 5 นาที
ที่อุณหภูมิห้องก่อนที่จะหมุนเหวี่ยงโดยทั่วไปเพิ่มผลผลิตดีเอ็นเอ
ขั้นตอนที่สองกับการชะอีก 200 ไมโครลิตรบัฟเฟอร์ AE จะเพิ่มผลผลิตได้ถึง
15%
ปริมาณกว่า 200 ไมโครลิตรไม่ควรชะเป็นไมโคร 1.5 มล.
หลอดเพราะคอลัมน์หมุนจะเข้ามาติดต่อกับ eluate ที่นำไปสู่
การก่อตัวของละอองลอยไปได้ในระหว่างการหมุนเหวี่ยง
elution ที่มีปริมาณน้อยกว่า 200 ไมโครลิตรเพิ่มความเข้มข้นของดีเอ็นเอสุดท้ายใน
eluate อย่างมีนัยสำคัญ แต่เล็กน้อยจะช่วยลดอัตราผลตอบแทนโดยรวมดีเอ็นเอ (ดูตารางที่ 5,
หน้า 25) สำหรับตัวอย่างที่มีน้อยกว่า 1 ไมโครกรัมของดีเอ็นเอชะใน 50 ไมโครลิตรบัฟเฟอร์
AE หรือน้ำจะแนะนำ eluting มี 2 x 100 ไมโครลิตรแทน 1 x 200 ไมโครลิตรไม่
ได้เพิ่มประสิทธิภาพการชะ
สำหรับการจัดเก็บระยะยาวของดีเอ็นเอ eluting ในบัฟเฟอร์ AE และการจัดเก็บที่ -30 ถึง -15 องศาเซลเซียส
แนะนำเนื่องจากดีเอ็นเอที่เก็บไว้ในน้ำอาจมีการย่อยสลายกรด
ตัวอย่าง 200 ไมโครลิตรเลือดของมนุษย์ทั้งหมด (ประมาณ 5 x 106 เม็ดเลือดขาว / ml)
มักจะมีอัตราผลตอบแทน 6 ไมโครกรัมของดีเอ็นเอใน 200 ไมโครลิตรน้ำ (30 ng / ไมโครลิตร) กับอัตราส่วน A260 / A280 ของ
1.7-1.9
สำหรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการชะและวิธีการตรวจสอบผลผลิตดีเอ็นเอที่มีความบริสุทธิ์และ
ความยาวดูหน้า 24-25 และภาคผนวก A, หน้า 50

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Incubating QIAamp มินิหมุนคอลัมน์โหลดด้วยบัฟเฟอร์ AE หรือน้ำเป็นเวลา5นาที
ที่อุณหภูมิห้องก่อนที่จะหมุนเหวี่ยงโดยทั่วไปจะเพิ่มผลผลิตดีเอ็นเอ
ขั้นตอนการชะล้างที่สองที่มี๒๐๐เพิ่มเติมμ l จะเพิ่มอัตราผลตอบแทนโดยขึ้น
ถึง15%
ปริมาณมากกว่า๒๐๐μ l ไม่ควรจะทำให้เป็นเครื่องปั่นเหวี่ยง๑.๕ ml
ท่อเพราะเสาหมุนจะเข้ามาสัมผัสกับ eluate ที่นำไปสู่
การก่อตัวของละอองลอยที่เป็นไปได้ในระหว่างการหมุนเหวี่ยง
มีปริมาณน้อยกว่า๒๐๐μ l เพิ่มความเข้มข้นของ DNA สุดท้ายใน
eluate อย่างมีนัยสำคัญแต่เล็กน้อยจะช่วยลดผลผลิตดีเอ็นเอโดยรวม (ดูตารางที่5
หนา 25) สำหรับตัวอย่างที่มีน้อยกว่า1μ g ของดีเอ็นเอ, การชะสารใน๕๐μ l บัฟเฟอร์
AE หรือน้ำที่แนะนำ การโต้แย้งกับ 2 x ๑๐๐μ l แทน 1 x ๒๐๐μ l ทำ
เพิ่มประสิทธิภาพ
สำหรับการจัดเก็บข้อมูลของ DNA ในระยะยาวให้ทำการปรับตัวในบัฟเฟอร์ AE และจัดเก็บที่–30ถึง–15° c
แนะนำเนื่องจาก DNA ที่เก็บไว้ในน้ำอาจมีการย่อยสลายกรด
Μ l ๒๐๐ตัวอย่างของเลือดมนุษย์ทั้งหมด (ประมาณ 5 x ๑๐๖เม็ดเลือดขาว/ml)
โดยทั่วไปผลผลิต6μ g ของดีเอ็นเอใน๒๐๐μ l น้ำ (30 ng/μ l) กับอัตรา A260/A280 ของ
1.7 –1.9
สำหรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการยอมจำนนและวิธีการตรวจสอบผลตอบแทนดีเอ็นเอ, ความบริสุทธิ์, และ
หมายถึงหน้า24–25และภาคผนวก A หน้า๕๐

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ฟักไข่ 5min ในขนาดเล็กหมุนคอลัมน์ที่มีบัฟเฟอร์เอหรือน้ำ
ผลผลิตของดีเอ็นเอมักจะเพิ่มขึ้นก่อนแรงเหวี่ยงที่อุณหภูมิห้อง
ขั้นตอนที่สองของการใช้บัฟเฟอร์เอ 200μเพิ่มเติมจะเพิ่มผลผลิต
ถึง 15 เปอร์เซ็นต์
ปริมาณที่มากกว่า 200μไม่ควรล้างออก 1.5-ml ไมโคร centrifuges
เพราะหมุนคอลัมน์จะติดต่อกับน้ำล้าง
ละอองอาจเกิดขึ้นในระหว่างกระบวนการแรงเหวี่ยง
ปริมาณน้อยกว่า 200μเพิ่มขึ้น
ดีเอ็นเอทั้งหมดจะลดลงอย่างเห็นได้ชัด
หน้าบทความ สำหรับตัวอย่างที่มีขนาดเล็กกว่า 1-μดีเอ็นเอใน 50μบัฟเฟอร์
แนะนำให้ใช้แอหรือน้ำ ล้างออกด้วย 2-x-100 μแทนที่จะ 1-x-200 μ L
ไม่เพิ่มประสิทธิภาพการล้าง
สำหรับการเก็บรักษาระยะยาวของดีเอ็นเอล้างออกในบัฟเฟอร์เอและเก็บไว้ใน
แนะนำเพราะดีเอ็นเอที่เก็บไว้ในน้ำจะถูกย่อยสลายด้วยกรด
ตัวอย่างเลือดทั้งหมดประมาณ 5-x-106 เม็ดเลือดขาว
6-μดีเอ็นเอมักจะผลิตใน 200μน้ำและ a260 a280 และอัตราส่วน
1.7 ถึง 1.9
ที่เกี่ยวข้องกับการล้างและวิธีการตรวจสอบผลผลิตความบริสุทธิ์ของดีเอ็นเอและ
ความยาวอ้างอิงหน้า 24-25 และภาคผนวกหน้าห้าสิบ