Tag purification strategyAC separat

Tag purification strategy
AC separates protein typically on the basis of interactions between ligands and local domains
of target proteins. The interactions are not interfered by other domains in most case. Therefore,
the tag purification strategy was invented to rapidly separate recombinant protein by fusion
expression and co-separation [25].
First the target protein is expressed with a tag protein in fusion form. Then the target protein
is purified using an affinity column that is specific to tag protein. After that if the tag needs to
be removed, a restrictive protease is used to hydrolyze the fusion protein and the freed tag is
finally be separated from target protein by running the same column once again.
The ideal tag protein should (1) have economical affinity chromatography media for conven‐
ient separation, (2) be very stable in bioactivity, and (3) have a good expressing property that
is helpful to increase the expression of target protein. Commonly used tags are GST tag, FLAG
tag, S tag, Strep tag, His tag, and so on.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กลยุทธ์การทำให้บริสุทธิ์ของแท็กAC แยกโปรตีนโดยทั่วไปบนพื้นฐานของปฏิสัมพันธ์ระหว่าง ligands และโดเมนท้องถิ่นของโปรตีนเป้าหมาย การโต้ตอบจะไม่แทรกแซง โดยโดเมนอื่นในกรณีส่วนใหญ่ ดังนั้นกลยุทธ์การทำให้บริสุทธิ์ของแท็กถูกคิดค้นเพื่อแยก recombinant โปรตีนอย่างรวดเร็ว โดยฟิวชั่นนิพจน์และการแยกร่วม [25]ครั้งแรก โปรตีนเป้าหมายจะแสดง ด้วยโปรตีนแท็กในรูปแบบฟิวชั่น แล้วโปรตีนเป้าหมายบริสุทธิ์ใช้คอลัมน์ที่มีความสัมพันธ์ที่มีเฉพาะแท็กโปรตีน หลังจาก แท็กที่ต้องการจะเอาออก ใช้โปรติเอสความเข้มงวดในการ hydrolyze โปรตีนฟิวชั่น และป้ายอิสระสุดท้าย แยกออกจากโปรตีนเป้าหมาย โดยใช้คอลัมน์เดียวกันอีกครั้งโปรตีนแท็กที่เหมาะที่ควร (1) มีความสัมพันธ์ทางเศรษฐกิจสื่อ chromatography สำหรับ conven‐แยก ient, (2) จะมีเสถียรภาพมากในทางชีวภาพ และ (3) มีคุณสมบัติ expressing ดีที่เป็นประโยชน์ในการเพิ่มการแสดงออกของโปรตีนเป้าหมาย ใช้แท็กเป็นแท็ก GST ธงป้าย ป้าย S แท็ก Strep แท็กของเขา และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Tag กลยุทธ์บริสุทธิ์
AC แยกโปรตีนมักจะอยู่บนพื้นฐานของการมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างแกนด์และโดเมนท้องถิ่น
ของโปรตีนเป้าหมาย ปฏิสัมพันธ์จะไม่แทรกแซงโดยโดเมนอื่น ๆ ในกรณีส่วนใหญ่ ดังนั้น
กลยุทธ์แท็กบริสุทธิ์ถูกคิดค้นอย่างรวดเร็วแยกโปรตีนโดยฟิวชั่น
การแสดงออกและร่วมแยก [25].
แรกโปรตีนเป้าหมายถูกแสดงด้วยโปรตีนแท็กในรูปแบบฟิวชั่น แล้วโปรตีนเป้าหมาย
บริสุทธิ์โดยใช้คอลัมน์ความสัมพันธ์ที่เป็นเฉพาะกับแท็กโปรตีน หลังจากนั้นหากแท็กความต้องการที่จะ
ถูกลบออกเป็นน้ำย่อยที่เข้มงวดจะใช้ในการย่อยสลายโปรตีนและแท็กอิสระเป็น
ที่สุดก็จะแยกออกจากโปรตีนเป้าหมายโดยการเรียกใช้คอลัมน์เดียวกันอีกครั้ง.
โปรตีนแท็กที่เหมาะควร (1) มีความสัมพันธ์ที่ประหยัด สื่อสำหรับโครมาโตอนุสัญญา
แยก ient (2) จะมีเสถียรภาพมากในทางชีวภาพและ (3) มีคุณสมบัติการแสดงที่ดีที่
เป็นประโยชน์ในการเพิ่มการแสดงออกของโปรตีนเป้าหมาย แท็กที่ใช้กันทั่วไปคือแท็ก GST, ธง
แท็กแท็ก S, แท็ก Strep แท็กของเขาและอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กลยุทธ์การแท็กAC แยกโปรตีนโดยทั่วไปบนพื้นฐานของการมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างลิแกนด์ท้องถิ่นและโดเมนของโปรตีนเป้าหมาย ปฏิสัมพันธ์ไม่แทรกแซงโดยโดเมนอื่น ๆในกรณีส่วนใหญ่ ดังนั้นแท็กการคิดค้นกลยุทธ์อย่างรวดเร็วโดยการแยกโปรตีนรีคอมบิแนนท์การแสดงออกและการแยก Co [ 25 ]โปรตีนเป้าหมายแรกจะแสดงด้วยแท็กโปรตีนในแบบฟอร์ม แล้วเป้าหมายของโปรตีนจะบริสุทธิ์โดยใช้ affinity คอลัมน์ที่เฉพาะเจาะจงกับแท็กโปรตีน หลังจากนั้นถ้าต้องการให้แท็กถูกเอาออก และเอนไซม์ ที่ใช้ย่อยสลายการจำกัดโปรตีน และปลดปล่อย แท็กในที่สุดก็แยกจากโปรตีนเป้าหมายโดยการใช้คอลัมน์เดียวกันอีกครั้งโปรตีนแท็กที่เหมาะควร ( 1 ) มีขี้รังแค สื่อ conven ‐ประหยัดient แยก ( 2 ) เป็นมีเสถียรภาพมากในทางชีวภาพ และ ( 3 ) มีการแสดงทรัพย์สินที่จะเป็นประโยชน์เพื่อเพิ่มการแสดงออกของโปรตีนเป้าหมาย ปกติใช้แท็ก GST แท็กธงแท็ก , แท็ก , แท็กแท็ก Strep , ของเขา , และดังนั้นบน