Xoo strain YN-1 and the ΔhrcU mutant were grown at 28°C in nutrient agar (NA) containing the following reagents in g/L: sucrose, 10; polypeptone, 5; yeast extract, 1; beef extract, 3; and Bacto agar, 15; pH 7.0–7.2. Single colonies were transferred to nutrient broth (NB) with agitation until the OD600 was 0.5. Bacterial cells were collected by centrifugation at 8000× g for 5 min, washed three times with sterile dH2O, and suspended at 8×107 cfu/ml. Bacterial cells were then infiltrated into leaves of N. benthamiana using a needleless syringe. Inoculated plants were maintained in plant growth chambers at 26–28°C with a 16/8 h light/dark photoperiod. Inoculated plants were examined at various times after inoculation (0, 12, 24, 48 hpi) and photographed.
ให้ yn-1 สายพันธุ์และกลายพันธุ์Δ hrcu ปลูกที่ 28 °องศาเซลเซียสในอาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหาร ( นา ) ที่มีต่อสารเคมีใน G / L : น้ำตาลซูโครส 10 ; polypeptone , 5 ; สารสกัดจากยีสต์ , 1 ; สารสกัดจากเนื้อ , 3 ; และ Bacto วุ้น , 15 ; pH 7.0 และ 7.2 . โคโลนีเดี่ยว คือ ซุปสารอาหาร ( NB ) ด้วยการกวนจน od600 คือ 0.5 การเก็บรวบรวมเซลล์แบคทีเรียโดยการเหวี่ยงแยกที่ 8 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาที ล้างหน้า 3 ครั้ง กับ dh2o หมันและพักงานที่ 8 × 107 CFU / ml ได้แทรกซึมเข้าไปในเซลล์แบคทีเรียใบ . benthamiana โดยใช้เข็ม needleless . ปลูกพืชถูกเก็บรักษาไว้ในห้องการเจริญเติบโตของพืชที่ 26 – 28 ° C ด้วย 16 / 8 H แสง / มืดแสง . ปลูกพืชทดสอบในช่วงเวลาต่าง ๆ หลังจากการฉีดวัคซีน ( 0 , 12 , 24 , 48 ชั่วโมง ) และถ่ายภาพ
การแปล กรุณารอสักครู่..
