Fermentations were stopped after 24 h of incubation.
Hereafter, the viable s. cell were counted using LM17 agar.
Cell pellets were collected by centrifugation (8000 ×g for 10 min at 5 °C) and washed thrice in TMA-I buffer (10 mM Tris–HCl, pH 7.8, 30 mM NH4Cl, 10 mM MgCl2, and 6 mM 2-mercaptoethanol) in order to avoid the precipitation of casein during centrifugation. Afterwashing twice in sterile saline (0.85%,w/w), the cell pellets were ground on four
separate, consecutive occasions: beating for 20 s each at 3000 rpm with 0.1-mm zirconia silica beads in a Biospec mini bead-beater-16 after removing the beads and cell debris by centrifugation, the cell lysates were adjusted to 5 × 109 ruptured
S. thermophilus cells/g using distilled water according to the aforementioned S. thermophilus viable cell count.
then, lysates werefiltered through a 0.22-μm pore-size filter for sterilization. The obtained CCE was kept frozen (−80 °C) ready for use
หมักแหนมก็หยุดหลังจาก 24 ชมของคณะทันตแพทยศาสตร์ โดย s ได้เซลล์ทำงานได้ถูกตรวจนับใช้ LM17 agar รวบรวม โดย centrifugation (× g 8000 สำหรับ 10 นาทีที่ 5 ° C) และล้างใน TMA เลยขี้เซลล์-ฉันมีบัฟเฟอร์ (10 mM ตรี – HCl, pH 7.8, NH4Cl, MgCl2 10 มม. และ 6 mM 2 mercaptoethanol 30 มม.) เพื่อหลีกเลี่ยงฝนของเคซีนระหว่าง centrifugation Afterwashing สองครั้งในการใส่น้ำเกลือ (0.85%,w/w), ขี้เซลล์ถูกล่างบน 4ครั้งติดต่อกัน แยก: ตีสำหรับ 20 s แต่ละที่ 3000 rpm กับซิลิก้า zirconia 0.1 มม.ลูกปัดในการ Biospec มินิลูกปัด-ตี-16 หลังจากเอาลูกปัดและเศษเซลล์โดย centrifugation, lysates เซลล์ถูกปรับ 5 × 109 พุ่งกระฉูดS. thermophilus เซลล์/g ใช้กลั่นน้ำตามดังกล่าว S. thermophilus นับเซลล์ทำงานได้ แล้ว lysates werefiltered ผ่านตัวกรองขนาดรูขุมขน μm $ 0.22 สำหรับฆ่าเชื้อ CCE ได้รับถูกเก็บแช่แข็ง (−80 ° C) มีความพร้อมสำหรับการใช้
การแปล กรุณารอสักครู่..
