A detergent stable alkaline serine-

A detergent stable alkaline serine-protease from Bacillus licheniformis MP1 was purified in three steps: ultrafiltration using a 10 kDa cut-off membrane, Sephadex G-100 gel filtration, and Mono Q-Sepharose ion exchange chromatography with a 3.9-fold increase in specific activity and 48.2% recovery. The N-terminal amino acid sequence of the first 14 amino acids of the purified enzyme was AQTVPYGIPLIKAD. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 30 kDa. The optimum pH and temperature of the purified protease were 10.0 and 70 °C, respectively, using casein as a substrate. It showed high stability towards alkaline pH, non-ionic surfactants and was relatively stable towards SDS. Additionally, the crude enzyme showed higher stability and compatibility with various laundry detergents from Tunisian market, and the addition of MP1 proteolytic preparation (40 U/ml) to wash solution, enhance bloodstain elimination. In addition, when used in shrimp waste deproteinization at E/S = 20 U/mg protein ratio, MP1 proteolytic preparation leads to 75% deproteinization. The aprMP1 gene, encoding the alkaline protease from B. licheniformis MP1, was isolated, and its DNA sequence was determined. The deduced amino acid sequence of the preproenzyme showed high homology with many other known serine protease genes, and some differences that characterize it.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

น้ำยาคงด่างรอบเส้นใยประสาทรติเอสจากแบคทีเรีย licheniformis MP1 บริสุทธิ์ในสามขั้นตอน: กรองใช้ 10 kDa ตัดเยื่อ กรองเจล Sephadex G-100 และโมโน Q-Sepharose ion exchange chromatography ด้วยเป็นการเพิ่ม 3.9-fold เฉพาะกิจกรรมและ 48.2% การกู้คืน ลำดับกรดอะมิโน N-เทอร์มินัลของกรดอะมิโนก่อน 14 ของเอนไซม์บริสุทธิ์ถูก AQTVPYGIPLIKAD น้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์บริสุทธิ์ประมาณจะ 30 kDa ค่า pH ที่เหมาะสมและอุณหภูมิโปรติเอสที่บริสุทธิ์ได้ 10.0 และ 70 ° C ตามลำดับ ใช้เคซีนเป็นพื้นผิว มันแสดงให้เห็นว่าความมั่นคงสูงต่อค่า pH อัลคาไลน์ surfactants ที่ไม่ใช่ไอออน และมีเสถียรภาพค่อนข้างไปทาง SDS นอกจากนี้ เอนไซม์ดิบที่แสดงให้เห็นว่าความเสถียรและความเข้ากันได้กับผงซักฟอกซักรีดต่าง ๆ จากตลาดตูนิเซีย และนอกเหนือจากเตรียมได้ MP1 (40 U/ml) ล้างโซลูชัน สูงเพิ่มการกำจัด bloodstain นอกจากนี้ เมื่อใช้ในกุ้ง deproteinization เสียที่ E/S = 20 U/mg โปรตีนอัตรา MP1 ที่เตรียมได้ไปสู่ 75% deproteinization ยีน aprMP1 เข้ารหัสรติเอสอัลคาไลน์จาก B. licheniformis MP1 แยก และกำหนดลำดับดีเอ็นเอ ลำดับกรดอะมิโนซึ่งสามารถกล่าวได้ของ preproenzyme ที่แสดงให้เห็นว่า homology สูงอื่น ๆ ยีนหลายรอบเส้นใยประสาทที่รู้จักรติเอส และความแตกต่างที่มัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผงซักฟอกที่มีความเสถียรอัลคาไลน์ซีรีน-โปรติเอสจาก Bacillus licheniformis MP1 บริสุทธิ์ในสามขั้นตอนการกรองโดยใช้เมมเบรน 10 kDa ตัดกรองเจล Sephadex G-100 และ Mono Q-Sepharose แลกเปลี่ยนไอออนโครมากับการเพิ่มขึ้น 3.9 เท่าในที่เฉพาะเจาะจง กิจกรรมและ 48.2% การกู้คืน n-ขั้วลำดับกรดอะมิโนในครั้งแรก 14 กรดอะมิโนของเอนไซม์เป็น AQTVPYGIPLIKAD น้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์บริสุทธิ์ก็จะประมาณ 30 กิโลดาลตัน ค่า pH ที่เหมาะสมและอุณหภูมิของน้ำย่อยบริสุทธิ์เป็น 10.0 และ 70 องศาเซลเซียสตามลำดับโดยใช้เคซีนเป็นสารตั้งต้น มันแสดงให้เห็นความมั่นคงสูงต่อด่างค่า pH ลดแรงตึงผิวไม่มีประจุและค่อนข้างมีเสถียรภาพต่อระบบ SDS นอกจากนี้เอนไซม์แสดงให้เห็นว่ามีความมั่นคงสูงขึ้นและเข้ากันได้กับผงซักฟอกซักอบรีดต่างๆจากตลาดตูนิเซียและนอกเหนือจากการเตรียม MP1 โปรตีน (40 U / ml) เพื่อล้างการแก้ปัญหาเพิ่มการกำจัดคราบเลือด นอกจากนี้เมื่อนำมาใช้ในการย่อยกุ้งเสียที่ E / S = 20 U / mg อัตราส่วนโปรตีนเตรียม MP1 โปรตีนนำไปสู่​​การย่อย 75% ยีน aprMP1, เข้ารหัสน้ำย่อยอัลคาไลน์จาก B. licheniformis MP1 ถูกโดดเดี่ยวและลำดับดีเอ็นเอที่ถูกกำหนด อนุมานลำดับกรดอะมิโน preproenzyme แสดงให้เห็นคล้ายคลึงกันสูงที่มีอื่น ๆ อีกมากมายที่รู้จักกันยีนซีรีนโปรติเอสและความแตกต่างบางอย่างที่ลักษณะมัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผงซักฟอกเอนไซม์โปรติเอสจาก Bacillus licheniformis เสถียรด่าง mp1 บริสุทธิ์ในสามขั้นตอน : กรองโดยใช้ 10 กิโลดาลตันตัดเยื่อ Sephadex G-100 gel filtration chromatography โมโน และแลกเปลี่ยนไอออนซึ่งมี 3.9-fold เพิ่มในกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงและ 48.2% ของการกู้คืน ที่ถูกลำดับกรดอะมิโนของแรก 14 กรดอะมิโนของเอนไซม์คือ aqtvpygiplikad . น้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์ประมาณจะ 30 กิโลดาลตัน พีเอชที่เหมาะสมและอุณหภูมิของบริสุทธิ์เป็น 10.0 และ 70 องศา ซี เอส ตามลำดับ โดยใช้เคซีนเป็นสับสเตรท มันมีความมั่นคงสูงต่อด่าง pH โดยระดับและค่อนข้างคงที่ต่อ SDS . นอกจากนี้ เอนไซม์ดิบมีเสถียรภาพและความเข้ากันได้กับหลากหลายตลาดผงซักฟอกซักรีดจากตูนีเซีย และนอกเหนือจากความสามารถในการเตรียม mp1 ( 40 U / ml ) เพื่อล้างวิธีเพิ่มการขจัดคราบเลือด นอกจากนี้เมื่อใช้เศษกุ้งคุ้มทุนที่ E / S = 20 U / mg โปรตีนอัตราส่วนโปรตีน mp1 เตรียมนำ 75% ที่มี . การ aprmp1 ยีน , การเข้ารหัสอัลคาไลน์โปรติเอสจาก B . licheniformis mp1 , แยก , และของดีเอ็นเอลำดับจะถูกนำ ได้ลำดับกรดอะมิโนของ preproenzyme แสดงลำดับสูงกับหลายอื่น ๆที่รู้จักยับยั้งโปรตีนยีนและความแตกต่างบางอย่างที่ลักษณะเป็น .