2.5. Determination of telomerase ac

2.5. Determination of telomerase activity by conventional TRAP assay
Telomerase activity was assayed following telomere repeat amplification
protocol (TRAP) (Piatyszek et al., 1995) using a TRAPeze kit
(Chemicon) according to the manufacturer’s protocol. The autoradiographs
of the PCR products were viewed following electrophoresis in
10% non-denaturing polyacrylamide at 800–1000 V (Sambrook and
Russell, 2001).
2.6. Gene expression arrays
HeLa cellswere seeded in 6well plates in DMEMcontaining 10% FBS
and transfection was performed in three independent sets with
100 pmol siRNA hTERT, scrambled siRNA and shRNA–hTERT using lipofectamine
2000. Total RNAwas harvested 72 h after transfection using a
Qiagen kit. Affymetrix microarray (PrimeView™ Human Gene Expression
Array chip) hybridization was performed with the help of iLife
Discoveries.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 การกำหนดกิจกรรมเทโลเมอเรสโดยกับดักธรรมดา assayกิจกรรมเทโลเมอเรสถูก assayed ต่อ telomere ซ้ำขยายโพรโทคอล (ดัก) (Piatyszek et al. 1995) โดยใช้ชุดราว(Chemicon) ตามโพรโทคอของผู้ผลิต Autoradiographs การของ PCR ผลิตภัณฑ์เข้าชมอิในต่อไปนี้10% ไม่ใช่ denaturing polyacrylamide ที่ 800-1000 V (Sambrook และรัสเซล 2001)2.6. ยีนนิพจน์อาร์เรย์HeLa cellswere ฟิตเนสในแผ่น 6well ใน DMEMcontaining 10% FBSและดำเนินการ transfection ในสามชุดอิสระกับ100 pmol siRNA hTERT กวน siRNA และ shRNA – hTERT ใช้ lipofectamine2000 RNAwas รวมเก็บเกี่ยว 72 ชม.หลังจากใช้ transfectionชุด Qiagen Affymetrix microarray (PrimeView™มนุษย์ยีนทำ hybridization เรย์ชิ) ของ iLifeการค้นพบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 ความมุ่งมั่นของกิจกรรมดีเอ็นเอโดย TRAP ทดสอบทั่วไป
กิจกรรมดีเอ็นเอได้รับการวิเคราะห์ต่อไปนี้ telomere ซ้ำขยาย
Protocol (TRAP) (Piatyszek et al., 1995) โดยใช้ชุดห้อยโหน
(Chemicon) ตามโปรโตคอลของผู้ผลิต autoradiographs
ของผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ถูกมอง electrophoresis ต่อไปนี้ใน
10% ที่ไม่ใช่ denaturing polyacrylamide ที่ 800-1000 V (Sambrook และ
รัสเซล, 2001).
2.6 การแสดงออกของยีนอาร์เรย์
HeLa cellswere เมล็ดใน 6well แผ่นใน DMEMcontaining 10% FBS
และ transfection ได้ดำเนินการในเซตที่สามอิสระที่มี
100 pmol siRNA hTERT กวน siRNA และ shRNA-hTERT ใช้ lipofectamine
2000 RNAwas รวมเก็บเกี่ยว 72 ชั่วโมงหลังจาก transfection ใช้
ชุด Qiagen Affymetrix microarray (PrimeView ™มนุษย์แสดงออกของยีน
อาร์เรย์ Chip) การผสมพันธุ์ได้ดำเนินการด้วยความช่วยเหลือของ iLife
การค้นพบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การกำหนดกิจกรรมมะเร็งโดยวิธีกับดักปกติกิจกรรมมะเร็งซีรั่มตามซ้ำแบบเทโลเมียร์โพรโทคอล ( ดัก ) ( piatyszek et al . , 1995 ) ที่ใช้ในชุด( chemicon ) ตามขั้นตอนของผู้ผลิต การ autoradiographsผลิตภัณฑ์ PCR ถูกแสดงตามวิธีใน10% โนนี่แถบที่ 800 – 1000 V ( sambrook และรัสเซล , 2001 )2.6 รูปแบบการแสดงออกของยีนถึงระดับเมล็ดใน 6well แผ่นใน dmemcontaining 10% FBSและ สำหรับแสดงใน 3 ชุด อิสระกับ100 pmol บริษัท htert , กวนและบริษัท shrna – htert ใช้ lipofectamine2000 rnawas รวม 72 ชั่วโมงหลังจากเก็บเกี่ยวสำหรับใช้เพิ่มชุด affymetrix microarray ( การแสดงออกของยีนของมนุษย์ primeview ™เรย์ชิป ) hybridization แสดงด้วยความช่วยเหลือของไฮไฟฟ์การค้นพบ .