To investigate whether a DVHRF-spec

To investigate whether a DVHRF-specific probe will hybridize to its
orthologs, total RNA extracted from DV, DA, AA and BM were subjected
to northern blotting analysis. Similarly, to investigate whether transcription
of DVHRF was developmentally regulated, total RNA of immature ticks
(larvae and nymph) were also subjected to northern blotting analysis.
Samples (3–7.5 lg total RNA per lane) treatment, electrophoresis and
transfer to Hybond N + membranes were done as described in Northern-
Max protocol (Ambion, Austin, TX). Following transfer, processing of the
RNA blots was done as previously described (Mulenga et al. 2003b). The
membranes were washed to a final stringency of 0.1· SSC plus 0.1 % SDS
at 65 C twice for 15 min each and subsequently exposed to an X-ray film
for 40 min at 80 C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การตรวจสอบว่า โพรบ DVHRF-specific การจะคือการorthologs อาร์เอ็นเอรวมสกัดจาก DV, DA, AA และ BM ถูกต้องไปเหนือ blotting วิธีการวิเคราะห์การ ในทำนองเดียวกัน การตรวจสอบว่า transcriptionของ DVHRF เป็น developmentally อาร์เอ็นเอการควบคุม รวมของเครื่องหมายขีด immature(ตัวอ่อนและนาง) ถูกต้องให้เหนือ blotting วิธีวิเคราะห์รักษาตัวอย่าง (3 – 7.5 lg รวมอาร์เอ็นเอต่อเลน) electrophoresis และโอนย้ายไปที่ Hybond N + เข้าได้ทำตามที่อธิบายไว้ในภาคเหนือสูงสุดโพรโทคอล (Ambion, Austin, TX) โอนย้ายต่อไปนี้ การประมวลผลเสร็จกันบล็อทอาร์เอ็นเอเป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Mulenga et al. 2003b) ที่เยื่อหุ้มถูกล้างไป stringency final ของ 0.1· SSC บวก 0.1% SDSที่ C 65 ครั้งใน 15 นาที และมาสัมผัสกับการเอ็กซ์เรย์ filmใน 40 นาทีที่ 80 c

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อตรวจสอบว่าสาย DVHRF-speci สอบสวนคจะผสมพันธุ์ของมัน
orthologs, RNA รวมสกัดจาก DV, DA, AA และ BM ถูกยัดเยียด
การวิเคราะห์ซับภาคเหนือ ในทำนองเดียวกันในการตรวจสอบว่าการถอดรหัส
ของ DVHRF ถูกควบคุมการพัฒนา, RNA รวมของเห็บที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะ
(ตัวอ่อนและผี) ถูกยัดเยียดยังวิเคราะห์ซับภาคเหนือ.
ตัวอย่าง (3-7.5 จีอาร์เอ็นเอรวมต่อเลน) การรักษา electrophoresis และ
การถ่ายโอนไป Hybond N + เยื่อได้ทำตามที่อธิบายไว้ใน Northern-
แม็กซ์โปรโตคอล (Ambion, ออสติน, เท็กซัส) ต่อไปนี้การถ่ายโอนการประมวลผลของ
blots อาร์เอ็นเอที่ได้กระทำตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Mulenga et al. 2003b)
เยื่อถูกล้างไปเข้มงวดสาย NAL 0.1 · SSC บวก 0.1% SDS
ที่ 65? C ละสองครั้งเป็นเวลา 15 นาทีในแต่ละครั้งและสัมผัสต่อมาสาย X-ray LM
40 นาทีที่? 80? C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อตรวจสอบว่า dvhrf กาจึงจะผสมของ C ด้วย
orthologs อาร์เอ็นเอทั้งหมดสกัดจาก DV , ดา , AA และ BM ถูก
ทางตอนเหนือของวิธีวิเคราะห์ ในทำนองเดียวกัน เพื่อตรวจสอบว่า การถอดความ
ของ dvhrf คือได้รับการควบคุมอาร์เอ็นเอทั้งหมดไป
( เห็บตัวอ่อนและตัวอ่อน ) ก็ต้องวิเคราะห์ภาคเหนือ blotting .
ตัวอย่าง ( 3 ) 75 . LG รวมต่อเลน ) การรักษาวิธี
โอน hybond N เยื่อ ทำไปตามที่อธิบายไว้ในภาคเหนือ -
แมกซ์ โปรโตคอล ( ambion , ออสติน , เท็กซัส ) ต่อไปนี้การโอน , การประมวลผลของ
rna กีดกันกระทำตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( mulenga et al . 2003b )
+ ถูกล้างไป นาล จึง stringency 0.1 ด้วย SSC บวก 0.1% SDS
65  องศาเซลเซียส 15 นาทีในแต่ละครั้งและต่อมาถูกเอ็กซเรย์จึง LM
สำหรับ 40 นาทีที่  80  C