The DGGE bands were excised with a

The DGGE bands were excised with a sterile scalpel, and the DNA from each band was eluted overnight at 4 °C in 20 μl of sterile water. The eluted DNA (2 μl) was re-amplified using the conditions described above (Hu et al. 2009). The resulting PCR products were analyzed by DGGE to confirm isolation of the expected products. The samples that yielded a single band co-migrating with that of the original sample were excised, amplified with the primers without the GC clamp, purified and sent to Genscript Company (Nanjing, China) for sequencing. The recovered sequences were aligned with bacteria and fungi gene fragments available from databases of the National Center for Biotechnology Information (NCBI). BLAST searches in GenBank were used to find the closest known relatives of the partial bacteria and fungus sequences.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วง DGGE ถูก excised กับ scalpel กอซ และดีเอ็นเอจากแต่ละวงมี eluted ค้างคืนที่ 4 ° C ใน μl 20 กระบอกน้ำ ดีเอ็นเอ eluted (2 μl) ที่ขยายโดยใช้เงื่อนไขที่อธิบายไว้ข้างต้น (Hu et al. 2009) อีกด้วย ผลิตภัณฑ์ PCR ได้ถูกวิเคราะห์ โดย DGGE เพื่อยืนยันการแยกผลิตภัณฑ์ที่คาดไว้ ตัวอย่างที่ให้ผลเป็นวงเดียวร่วมโยกย้ายด้วยว่า ของอย่างเดิมได้ excised ขยายกับไพรเมอร์โดยแคลมป์ GC บริสุทธิ์ และส่งไปที่ บริษัท Genscript (หนาน จีน) สำหรับลำดับ ลำดับที่กู้คืนได้สอดคล้องกับแบคทีเรียและเชื้อราบางส่วนของยีนจากฐานข้อมูลของศูนย์แห่งชาติสำหรับเทคโนโลยีชีวภาพข้อมูล (NCBI) ค้นหาระเบิดใน GenBank ถูกใช้เพื่อค้นหาญาติที่รู้จักเคียงลำดับเชื้อราและแบคทีเรียบางส่วน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วง DGGE ถูกตัดด้วยมีดผ่าตัดปลอดเชื้อและดีเอ็นเอจากแต่ละกลุ่มได้รับการชะค้างคืนที่ 4 ° C ใน 20 ไมโครลิตรของน้ำหมัน ดีเอ็นเอชะ (2 ไมโครลิตร) เป็นอีกครั้งที่การขยายการใช้เงื่อนไขที่กล่าวไว้ข้างต้น (Hu et al. 2009) ส่งผลให้ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ได้รับการวิเคราะห์โดย DGGE เพื่อยืนยันการแยกของผลิตภัณฑ์ที่คาดว่าจะ ตัวอย่างที่ให้ผลเป็นวงเดียวร่วมการโยกย้ายกับที่ของตัวอย่างดั้งเดิมถูกตัดขยายด้วยไพรเมอร์โดยไม่ต้องยึด GC บริสุทธิ์และส่งไปยัง บริษัท เจนสคริปต์ (จิง, จีน) สำหรับลำดับ ลำดับที่กู้คืนได้สอดคล้องกับแบคทีเรียและเชื้อราชิ้นส่วนของยีนที่มีอยู่จากฐานข้อมูลของศูนย์แห่งชาติสำหรับข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพ (NCBI) ค้นหาระเบิดใน GenBank ถูกนำมาใช้เพื่อหาญาติที่รู้จักกันใกล้เคียงที่สุดของแบคทีเรียบางส่วนและลำดับเชื้อรา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การทดลองที่รัดตัดด้วยมีดผ่าตัดหมันและดีเอ็นเอจากตัวอย่างแต่ละวงก็ค้างคืนที่ 4 ° C ใน 20 μลิตรน้ำหมัน จากตัวอย่างดีเอ็นเอ ( 2 μ L ) คือจะขยายการใช้เงื่อนไขที่อธิบายไว้ข้างต้น ( Hu et al . 2009 ) ผลตรวจผลิตภัณฑ์ วิเคราะห์โดยการทดลองเพื่อยืนยันการแยกทาง คาดว่าผลิตภัณฑ์ตัวอย่างที่ให้ผลเดียววง Co อพยพกับของตัวอย่างเดิมถูกตัด อัตรา กับไพรเมอร์โดย GC Clamp , บริสุทธิ์และส่งไปยัง บริษัท genscript ( หนานจิง , จีน ) สำหรับการติดตาม . กู้คืน ชิดกับลำดับยีนของแบคทีเรียและเชื้อราเศษจากฐานข้อมูลของศูนย์ข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ ( ncbi )ค้นหาพบระเบิดถูกพบใกล้ญาติของแบคทีเรีย และเชื้อรา บางส่วน ดังนี้