2.5. Measurement of enzyme activiti

2.5. Measurement of enzyme activities
The enzyme extract for cathepsin assays was prepared from 2.5 g
of muscle homogenised in 25 mL of 50 mM sodium citrate buffer, pH
5.0, containing 1 mM EDTA and 2% (v/v) Triton X-100, whereas 4.0 g
of muscle was employed for peptidases (aminopeptidases and
dipeptidylpeptidases) assays in 20 mL of 50 mM phosphate buffer,
containing 5 mM EGTA, pH 7.5. In all cases, the extracts were
homogenised using a Polytron homogeniser (Kinematica GmbH,
Luzerne, Switzerland) 3 × 10 s at 27.000 rpm in an ice bath and then
centrifuged at 10,000 ×g for 20 min at 4 °C. The resulting supernatants
were each filtered through glass wool and used for further enzymatic
assays.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 การวัดกิจกรรมของเอนไซม์
สารสกัดเอนไซม์สำหรับ cathepsin assays ที่เตรียมจาก 2.5 g
ของกล้ามเนื้อ homogenised ใน 25 mL 50 mM โซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ pH
5.0 ที่ประกอบด้วย EDTA 1 มม.และ 2% (v/v) X 100 ไตรตั้น ในขณะที่ 4.0 g
ของกล้ามเนื้อได้รับการว่าจ้างสำหรับ peptidases (aminopeptidases และ
dipeptidylpeptidases) assays ใน 20 mL บัฟเฟอร์ฟอสเฟต 50 มม.,
5 มม. EGTA, pH 7.5 ประกอบด้วยการ สารสกัดได้ในทุกกรณี
homogenised ใช้ homogeniser ฝากระจกโค้ง (Kinematica GmbH,
Luzerne สวิตเซอร์แลนด์) 3 × 10 s ที่ 27.000 รอบต่อนาทีในการอาบน้ำแข็งแล้ว
centrifuged ที่ 10000 × g สำหรับ 20 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส Supernatants ผล
ถูกละ filtered ผ่านเส้นใยแก้ว และใช้เอนไซม์ในระบบเพิ่มเติม
assays

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การวัดกิจกรรมของเอนไซม์
สารสกัดเอนไซม์สำหรับการตรวจ cathepsin เตรียมจาก 2.5 กรัม
ของกล้ามเนื้อ homogenised ใน 25 มล. 50 มิลลิบัฟเฟอร์โซเดียมซิเตรต, pH
5.0 ที่มี 1 มิลลิ EDTA และ 2% (v / v) Triton X-100 ในขณะที่ 4.0 กรัม
ของกล้ามเนื้อถูกใช้สำหรับ peptidases (aminopeptidases และ
dipeptidylpeptidases) การตรวจใน 20 มิลลิลิตร 50 มิลลิบัฟเฟอร์ฟอสเฟต
ที่มี 5 มิลลิ EGTA, pH 7.5 ในทุกกรณีสารสกัดถูก
homogenised ใช้ homogeniser Polytron (Kinematica GmbH,
ลูเซิร์น, วิตเซอร์แลนด์) 3 × 10 s ที่ 27.000 รอบต่อนาทีในอ่างน้ำแข็งแล้ว
หมุนเหวี่ยงที่ 10,000 ×กรัมเป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 ° C. supernatants ผลให้
แต่ละคนกรองผ่านใยแก้วและใช้สำหรับเอนไซม์ต่อ
การตรวจ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การวัดผลของกิจกรรมเอนไซม์เอนไซม์คาเทปซินพยายามสกัดสำหรับ

เตรียมจาก 2.5 กรัมของกล้ามเนื้อ homogenised ใน 25 มล. 50 มิลลิโมลาร์โซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ pH
5.0 ประกอบด้วย 1 mM EDTA และ 2% ( v / v ) Triton X-100 และ 4.0 g
ของกล้ามเนื้อโดยใช้เปปติเดส ( มีแนวโน้มที่จะยึดถือและ
dipeptidylpeptidases พบ 20 มิลลิลิตร ) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 50 mm
ที่มีหน่วย pH 7.5 , 5 mm .ในทุกกรณี , สารสกัดถูก
homogenised ใช้ polytron homogeniser ( kinematica GmbH ,
ลูเซิร์น , สวิตเซอร์แลนด์ ) 3 × 10 รอบในน้ำแข็งที่ 27.000 บาทแล้ว
ไฟฟ้า 10 , 000 × G สำหรับ 20 นาทีที่ 4 องศา ส่งผลให้ supernatants
แต่ละคน จึง ltered ผ่านใยแก้ว และใช้เพื่อตรวจเพิ่มเติม โดย