2.3. Bacterial strain and vectorThe

2.3. Bacterial strain and vector
The bC1gene was amplified by PCR and cloned into pGEMTEasy
vector in antisense orientation. The resulting clones were
sequenced and further sub-cloned into binary vector-PBI 121
and electroporation was used to mobilize into A. Tumefaciens
(strain LBA 4404). The confirmation of correct clones were
done by colony PCR and sequencing. Bacterial culture was
maintained on luria broth medium containing kanamycin
(50 mg/l) and Rifampicin (25 mg/l). The Agrobacterium culture
was developed by inoculating and overnight culture of a
single colony in the Agrobacterium minimal medium. The
design of gene construct is presented in Fig. 1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. ต้องใช้แบคทีเรียและเวกเตอร์BC1gene ถูกขยาย โดย PCR และโคลนลงใน pGEMTEasyเวกเตอร์ใน antisense โคลนเกิดขึ้นตามลำดับ และเพิ่มเติมย่อยโคลนเป็นไบนารีแบบเวกเตอร์-PBI 121และใช้ electroporation กรีธาทัพเข้า A. Tumefaciens(สายพันธุ์ LBA 4404) การยืนยันถูกต้องโคลนได้โดยอาณานิคม PCR และลำดับ วัฒนธรรมจากแบคทีเรียได้อยู่ในกลางซุป luria ประกอบด้วยกานามัยซิน(50 mg/l) และ Rifampicin (25 มิลลิกรัม/ลิตร) วัฒนธรรมอโกรแบคทีเรียมโดยวัฒนธรรม inoculating และค้างคืนฝูงเดียวในกลางน้อยอโกรแบคทีเรียม ที่Fig. 1 จะแสดงออกของยีนโครงสร้าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 สายพันธุ์แบคทีเรียและเวกเตอร์
bC1gene ถูกขยายโดยวิธี PCR และโคลนเข้า pGEMTEasy
เวกเตอร์ในทิศทาง antisense โคลนที่เกิดขึ้นได้รับการ
จัดลำดับขั้นตอนและต่อย่อยโคลนเข้าสู่ไบนารีเวกเตอร์ PBI 121
และ Electroporation ถูกใช้ในการระดมเข้าไป A. tumefaciens
(สายพันธุ์ LBA 4404) ยืนยันการโคลนที่ถูกต้องถูก
ทำโดยอาณานิคม PCR และการเรียงลำดับ วัฒนธรรมแบคทีเรียได้รับการ
เก็บรักษาไว้ในสื่อที่มีน้ำซุป Luria KANAMYCIN
(50 มิลลิกรัม / ลิตร) และ Rifampicin (25 มิลลิกรัม / ลิตร) วัฒนธรรม Agrobacterium
รับการพัฒนาโดยการฉีดวัคซีนและวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนของ
อาณานิคมเดียวใน Agrobacterium กลางน้อยที่สุด
การออกแบบโครงสร้างของยีนจะถูกนำเสนอในรูป 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 แบคทีเรียสายพันธุ์และเวกเตอร์
bc1gene ถูกขยายโดยวิธี PCR และโคลนเข้า pgemteasy
เวกเตอร์ในทิศทาง antisense . ทำให้โคลนและโคลนเข้าย่อยลำดับต่อไป

pbi ไบนารีเวกเตอร์ 121 และถูกใช้เพื่อระดมเข้า electroporation A . tumefaciens
( สายพันธุ์ LBA 4404 ) การยืนยันของโคลนที่ถูกต้องคือ
ทำโดยวิธี PCR และอาณานิคมของ แบคทีเรียคือ
รักษาลุเรียนขนาดกลางที่มีน้ำซุป
( 50 mg / L ) และ rifampicin ( 25 mg / l ) ที่ถูกพัฒนาขึ้นโดย Agrobacterium วัฒนธรรม
ณและวัฒนธรรมข้ามคืนของ
อาณานิคมเดียวใน Agrobacterium น้อยที่สุด )
ออกแบบยีนสร้างที่แสดงในรูปที่ 1