It has also been shown [129] that s

It has also been shown [129] that synthases possess a
conserved catalytic triad comprising three residues (cysteine,
aspartic acid and histidine) and that the cysteine
bonds are involved in covalent catalysis. It is suggested
that the histidine activates the cysteine for nucleophilic
attack on 3-hydroxybutyryl-CoA, while the aspartic acid
may function as a general base catalyst to activate the
hydroxyl group of HBCoA for ester formation [7].
Two mechanisms have been proposed for chain elongation
to fit with these observations [130] (Fig. 3). Both
involve chain elongation from acylated cysteine. The first
requires only one active cysteine site, and involves both
covalently and noncovalently bound HBn(CoA) intermediates.
The second requires that the active site be at the
interface of two PhaC monomers (with PHA synthase being
present in a dimeric form), with the chain being always
covalently attached to one of the two synthase units,
switching between them with the addition of each new
HA unit. In both mechanisms, the cysteine is activated for
nucleophilic attack by a base residue such as histidine in
the active site. The authors found through labeling studies
using the slower synthase mutant C149S-PhaEC that noncovalently
bound species were present in the early stages
of synthesis, and that these intermediates functioned in
a chemically and kinetically competent fashion, lending
weight to the possibility that the first mechanism is more
likely. In another proposal, Yamanaka et al.[131]

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มันยังแสดง [129] synthases มีการtriad ปัจจัยนำประกอบด้วยสามตกค้าง (cysteineกรดและ histidine) และ cysteineพันธบัตรเกี่ยวข้องในปฏิกิริยาโควาเลนต์ มีการแนะนำว่า ที่ histidine ป็น cysteine สำหรับ nucleophilicโจมตี 3-hydroxybutyryl-CoA ในขณะกรดในอาจทำหน้าที่เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาพื้นฐานทั่วไปเพื่อเปิดใช้งานการกลุ่มไฮดรอกของ HBCoA เอสก่อ [7]กลไกที่สองที่ได้รับการเสนอสำหรับโซ่ยืดพอดี มีข้อสังเกตเหล่านี้ [130] (รูป 3) ทั้งสองเกี่ยวข้องกับห่วงโซ่ยืดจาก acylated cysteine ครั้งแรกต้อง active cysteine ไซต์เดียวเท่านั้น และเกี่ยวข้องกับทั้งสองด้วย และ noncovalently ผูก HBn(CoA) intermediatesที่สองกำหนดว่า ไซต์ที่ใช้งานอยู่ที่การอินเตอร์เฟซของสองใกล้ภาคฮัทปาอสามารถ (ด้วยผา synthaseปัจจุบันในแบบฟอร์ม dimeric), สายโซ่อยู่เสมอด้วยกับหนึ่งในสอง synthase หน่วยสลับระหว่างพวกเขาด้วยการเพิ่มแต่ละใหม่ฮา หน่วย ในทั้งสองกลไก cysteine จะเรียกใช้สำหรับสารตกค้างเป็นฐานเช่น histidine ใน nucleophilic โจมตีไซต์ใช้งาน ผู้เขียนพบผ่านฉลากศึกษาใช้ mutant synthase ช้า C149S PhaEC ที่ noncovalentlyผูกพันธุ์กำลังอยู่ในขั้นเริ่มต้นการสังเคราะห์ และ intermediates เหล่านี้ทำหน้าที่ในแฟชั่น เคมี และสร้างอำนาจให้ยืมน้ำหนักความกลไกแรกคือมีแนวโน้ม ในข้อเสนออื่น ยามานากะ et al. [131]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นอกจากนี้ยังได้รับการแสดง [129] ที่ synthases มี
ป่าสงวนสามตัวเร่งปฏิกิริยาประกอบไปด้วยสามตกค้าง (cysteine,
กรด aspartic และฮิสติดีน) และ cysteine
​​พันธบัตรมีส่วนร่วมในการเร่งปฏิกิริยาโควาเลนต์ มันบอก
ว่าฮิสติดีนเปิดใช้งาน cysteine ​​สำหรับ nucleophilic
โจมตี 3 hydroxybutyryl-CoA ในขณะที่กรด aspartic
อาจทำงานเป็นตัวเร่งปฏิกิริยาที่ฐานทั่วไปเพื่อเปิดใช้งาน
กลุ่มไฮดรอกซิของ HBCoA สำหรับการก่อตัวเอสเตอร์ [7].
สองกลไกการได้รับการเสนอให้ การยืดตัวของห่วงโซ่
เพื่อให้พอดีกับข้อสังเกตเหล่านี้ [130] (รูปที่. 3) ทั้งสอง
เกี่ยวข้องกับการยืดตัวของห่วงโซ่จาก cysteine ​​acylated เป็นครั้งแรกที่
ต้องมีเพียงเว็บไซต์ cysteine ​​หนึ่งที่ใช้งานและเกี่ยวข้องกับทั้ง
โควาเลนต์และ noncovalently ผูกพัน HBN (COA) ตัวกลาง.
ที่สองกำหนดว่าใช้งานเว็บไซต์เป็นที่
อินเตอร์เฟซของทั้งสองโมโนเมอร์ PhaC (กับ PHA เทสถูก
นำเสนอในรูปแบบ dimeric) กับ ห่วงโซ่ที่ถูกเสมอ
แนบ covalently ให้เป็นหนึ่งในสองหน่วยเทส,
สลับไปมาระหว่างพวกเขากับการเพิ่มของแต่ละใหม่
หน่วย HA ในทั้งสองกลไก cysteine ​​ถูกเปิดใช้งานสำหรับ
nucleophilic โจมตีด้วยสารตกค้างฐานเช่นฮิสติดีนใน
การใช้งานเว็บไซต์ ผู้เขียนพบว่าผ่านการศึกษาการติดฉลาก
โดยใช้เทสช้า C149S-PhaEC กลายพันธุ์ที่ noncovalently
สายพันธุ์ผูกพันอยู่ในปัจจุบันในช่วงแรก
ของการสังเคราะห์และที่ตัวกลางเหล่านี้ทำหน้าที่ใน
แฟชั่นเคมีและมีอำนาจ kinetically ยืม
น้ำหนักให้กับความเป็นไปได้ว่ากลไกแรกคือ มากขึ้น
มีแนวโน้ม ในข้อเสนออื่น Yamanaka et al. [131]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ก็ยังได้รับแสดง [ 129 ] แต่ไม่ครอบครองศึกษาการตกค้าง ( cysteine ซึ่งประกอบด้วยสามแก๊งมังกรดำกรด aspartic และกรดอะมิโนฮิสติดีน ) และที่หุ้นกู้มีการเกี่ยวข้องในปฏิกิริยา มันแนะนำที่กระตุ้นให้ nucleophilic กรดอะมิโนฮิสติดีนการโจมตีบน 3-hydroxybutyryl-coa , ในขณะที่กรดแอสปาร์ติกอาจใช้เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาเพื่อใช้งานพื้นฐานทั่วไปหมู่ไฮดรอกซิลของ hbcoa สำหรับ Ester การพัฒนา [ 7 ]สองกลไกได้รับการเสนอสำหรับโซ่พอดีกับเหล่านี้สังเกต [ 130 ] ( รูปที่ 3 ) ทั้งเกี่ยวข้องกับโซ่ยืดจาก acylated ซีสเตอีน . ครั้งแรกต้องมีเพียงหนึ่งงาน 8-12 เว็บไซต์และเกี่ยวข้องกับทั้งcovalently noncovalently ผูกพันและ hbn ( COA ) ตัวกลาง2 ต้องที่เว็บไซต์ที่ใช้งานอยู่ที่เฟสสองแบบ phac ( ผา และเป็นปัจจุบันในรูปแบบท้องเฟ้อ ) กับโซ่ที่ถูกเสมอcovalently ติดหนึ่งในสองคน และหน่วยสลับระหว่างพวกเขากับทั้งใหม่ฮา หน่วย ทั้งกลไก ซิสเตอีนถูกเปิดใช้งานสำหรับnucleophilic โจมตีโดยฐานกากเช่นีนในเว็บไซต์ที่ใช้งานอยู่ ผู้เขียนได้ศึกษาผ่านการติดฉลากการใช้ช้าลง และ c149s phaec ที่ noncovalently กลายพันธุ์ผูกพันชนิด ปัจจุบัน ใน ระยะ แรกการสังเคราะห์ และตัวกลางเหล่านี้อยู่ในแฟชั่นและเชี่ยวชาญจลนศาสตร์เคมี ยืมน้ำหนักที่จะเป็นไปได้ว่ากลไกแรกมากขึ้นมีแนวโน้มที่ ในข้อเสนออื่น ยามานากะ et al . [ 131 ]