An enzyme catalyses the conversion

An enzyme catalyses the conversion of one or several
substrates to one or several products. The rate of the
catalysed reaction or the activity of the enzyme can be
determined by measuring either the decrease in substrate
concentration or the increase in product concentration as
a function of the reaction time. When the substrate (S)
and the product (P) differ in absorbance, the progress
of an enzymatic reaction can be followed directly by
monitoring the change in absorbance as a function of time.
The absorbance changes are linearly related with the
changes in concentration (via the Lambert–Beer relation,
see eqn [2]) and therefore the reaction rates (d[P]/dt or
2 d[S]/dt) can be calculated directly from the absorbance
data when the absorption coefficients of the reacting
species are known. NADH-linked enzyme reactions,
such as those catalysed by the lactate, malate or alcohol
dehydrogenases provide excellent examples for absorbance-based
enzyme assays. The reduced nicotinamide
ring in NADH shows an absorbance maximum near
340 nm (e340 5 6220 L mol 2 1 cm 2 1
), which is lost upon
oxidation to NAD 1 . Thus the activities of these dehydrogenases
can be measured directly by following the
decrease in A340 as a function of time.
When no absorbance changes occur during the reaction
of an enzyme with its natural substrate, often coloured
derivatives can be synthesized with chromophoric reporter
groups. A commonly used reporter is 4-nitrophenolate,
which absorbs near 400 nm. This group can be esterified
with acetic acid in 4-nitrophenyl acetate (to serve as a
substrate for proteases), with phosphate (as a substrate for
phosphatases) or with sugars (to probe amylases or
glycosidases).
In favourable cases a ‘silent’ enzyme reaction with a
colourless product can be coupled with another enzyme
reaction that uses the product of the first enzymatic
reaction for a conversion that leads to a change in
absorbance. Often such silent reactions are coupled to an
NADH-consuming or NADH-producing step. As outlined
above, changes in NADH concentration are easily
followed by the strong change in absorbance at 340 nm. It
is, of course, essential that in such coupled enzyme assays
the rate of the indicator reaction is much higher than the
rate of the primary reaction. This is usually achieved by
using the indicator enzyme in a high conc

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

An enzyme catalyses the conversion of one or severalsubstrates to one or several products. The rate of thecatalysed reaction or the activity of the enzyme can bedetermined by measuring either the decrease in substrateconcentration or the increase in product concentration asa function of the reaction time. When the substrate (S)and the product (P) differ in absorbance, the progressof an enzymatic reaction can be followed directly bymonitoring the change in absorbance as a function of time.The absorbance changes are linearly related with thechanges in concentration (via the Lambert–Beer relation,see eqn [2]) and therefore the reaction rates (d[P]/dt or2 d[S]/dt) can be calculated directly from the absorbancedata when the absorption coefficients of the reactingspecies are known. NADH-linked enzyme reactions,such as those catalysed by the lactate, malate or alcoholdehydrogenases provide excellent examples for absorbance-basedenzyme assays. The reduced nicotinamidering in NADH shows an absorbance maximum near340 nm (e340 5 6220 L mol 2 1 cm 2 1), which is lost uponoxidation to NAD 1 . Thus the activities of these dehydrogenasescan be measured directly by following thedecrease in A340 as a function of time.When no absorbance changes occur during the reactionof an enzyme with its natural substrate, often colouredderivatives can be synthesized with chromophoric reportergroups. A commonly used reporter is 4-nitrophenolate,ซึ่งดูดซับใกล้ 400 nm สามารถ esterified กลุ่มนี้มีกรดอะซิติกใน 4 nitrophenyl อะซิเตท (เป็นการพื้นผิวโปรตีเอส), ฟอสเฟต (เป็น substrate สำหรับphosphatases) หรือน้ำตาล (หยั่ง amylases หรือglycosidases)ในดีกรณีปฏิกิริยาเอนไซม์ 'เงียบ' กับการผลิตภัณฑ์สีใสสามารถคู่กับเอนไซม์อื่นปฏิกิริยาที่ผลิตภัณฑ์แรกใช้เอนไซม์สำหรับการแปลงที่นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงในปฏิกิริยาค่า มักปฏิกิริยาดังกล่าวเงียบอยู่ควบคู่กับการขั้นตอนที่ใช้ NADH หรือผลิต NADH ตามที่ระบุไว้ข้างต้น การเปลี่ยนแปลงในความเข้มข้นของ NADH ได้อย่างง่ายดายตาม ด้วยการเปลี่ยนแปลงแข็งแรงค่าที่ 340 nm มันมี แน่นอน ความสำคัญว่า ในคู่ assays เอนไซม์อัตราของปฏิกิริยาไฟจะสูงกว่าการอัตราของปฏิกิริยาหลัก นี้มักจะทำได้โดยใช้เอนไซม์ตัวบ่งชี้ในการสสูง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เอนไซม์ที่เร่งปฏิกิริยาการแปลงหนึ่งหรือหลาย
พื้นผิวหนึ่งหรือหลายผลิตภัณฑ์ อัตราของ
ปฏิกิริยาตัวเร่งปฏิกิริยาหรือกิจกรรมของเอนไซม์ที่สามารถ
กำหนดโดยการวัดทั้งการลดลงของสารตั้งต้นที่
มีความเข้มข้นหรือการเพิ่มขึ้นของความเข้มข้นของผลิตภัณฑ์เป็น
หน้าที่ของเวลาปฏิกิริยา เมื่อสารตั้งต้น (S)
และผลิตภัณฑ์ (P) แตกต่างกันในการดูดกลืนแสงความคืบหน้า
ของการเกิดปฏิกิริยาของเอนไซม์สามารถปฏิบัติตามได้โดยตรงโดย
การตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงเป็นหน้าที่ของเวลา.
การเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงที่เกี่ยวข้องกับเส้นตรงที่มี
การเปลี่ยนแปลงในความเข้มข้น ( ผ่านทางความสัมพันธ์ Lambert-เบียร์,
ดูสม [2]) และดังนั้นจึงมีอัตราการเกิดปฏิกิริยา (D [P] / DT หรือ
2 d [s] / DT) สามารถคำนวณได้โดยตรงจากดูดกลืนแสง
ข้อมูลเมื่อค่าสัมประสิทธิ์การดูดซึมของปฏิกิริยา
ชนิด เป็นที่รู้จักกัน NADH-linked ปฏิกิริยาเอนไซม์
เช่นนั้นโดยตัวเร่งปฏิกิริยาให้น้ำนมที่มาเลตหรือเครื่องดื่มแอลกอฮอล์
dehydrogenases ให้ตัวอย่างที่ยอดเยี่ยมสำหรับการดูดกลืนแสงที่ใช้
เอนไซม์ Nicotinamide ลด
แหวน NADH แสดงให้เห็นถึงการดูดกลืนแสงสูงสุดใกล้
340 นาโนเมตร (E340 5 6220 L โมล 2 1 2 1 ซม.
) ซึ่งจะหายไปเมื่อ
ออกซิเดชัน NAD 1 ดังนั้นกิจกรรมของ dehydrogenases เหล่านี้
สามารถวัดได้โดยตรงโดยต่อไปนี้
การลดลงของ A340 เป็นหน้าที่ของเวลา.
เมื่อไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่เกิดขึ้นในระหว่างการดูดกลืนแสงปฏิกิริยา
ของเอนไซม์ที่มีพื้นผิวตามธรรมชาติของมันมักจะมีสี
อนุพันธ์สามารถสังเคราะห์กับนักข่าว chromophoric
กลุ่ม นักข่าวที่ใช้กันทั่วไปคือ 4 nitrophenolate,
ซึ่งดูดซับใกล้ 400 นาโนเมตร กลุ่มนี้สามารถ esterified
ด้วยกรดอะซิติกใน 4 Nitrophenyl acetate (เพื่อใช้เป็น
สารตั้งต้นสำหรับโปรตีเอส) กับฟอสเฟต (เป็นสารตั้งต้นสำหรับ
ฟอสฟา) หรือน้ำตาล (การสอบสวนอะมัยเลสหรือ
ลูโคซิเด).
ในกรณีที่ดีแบบ 'เงียบ' ปฏิกิริยาของเอนไซม์ที่มี
สินค้าที่ไม่มีสีสามารถควบคู่ไปกับการทำงานของเอนไซม์อีก
ปฏิกิริยาที่ใช้ผลิตภัณฑ์ของเอนไซม์แรก
ปฏิกิริยาสำหรับการแปลงที่นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงใน
การดูดกลืนแสง มักจะเกิดปฏิกิริยาดังกล่าวจะเงียบควบคู่ไปยัง
NADH นานหรือขั้นตอน NADH ผลิต ตามที่ระบุไว้
ข้างต้นการเปลี่ยนแปลงในความเข้มข้น NADH จะได้อย่างง่ายดาย
ตามด้วยการเปลี่ยนแปลงที่แข็งแกร่งในการดูดกลืนแสงที่ 340 นาโนเมตร มัน
เป็นของหลักสูตรที่จำเป็นในการทำงานของเอนไซม์คู่เช่นการวิเคราะห์
อัตราการเกิดปฏิกิริยาของตัวบ่งชี้คือสูงกว่า
อัตราการเกิดปฏิกิริยาหลัก นี้มักจะประสบความสำเร็จโดย
ใช้เอนไซม์ตัวบ่งชี้ในความเข้มข้นสูง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป็นเอนไซม์พันธุ์การแปลงหนึ่งหรือหลายพื้นผิวที่จะหนึ่งหรือหลายผลิตภัณฑ์ อัตราของcatalysed ปฏิกิริยาหรือกิจกรรมของ เอนไซม์ สามารถกำหนดโดยวัดให้ลดลงในพื้นผิวสมาธิ หรือเพิ่มความเข้มข้นของผลิตภัณฑ์เป็นเป็นฟังก์ชันของเวลาปฏิกิริยา . เมื่อพื้นผิว ( S )และผลิตภัณฑ์ ( P ) แตกต่างกันในการดูดกลืนแสง , ความคืบหน้าของปฏิกิริยาเอนไซม์ที่สามารถปฏิบัติตามได้โดยตรงโดยการตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงในค่าเป็นฟังก์ชันของเวลานเปลี่ยนแปลงไป ในลักษณะที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงความเข้มข้น ( ผ่าน Lambert –เบียร์ สัมพันธ์ดู eqn [ 2 ] ) ดังนั้นปฏิกิริยาอัตรา ( D [ P ] / DT หรือ2 D [ S ] / dt ) สามารถคำนวณได้โดยตรงจากการดูดกลืนแสงข้อมูลเมื่อมีการดูดซึมสัมประสิทธิ์ของปฏิกิริยาชนิดที่เป็นที่รู้จักกัน การ เชื่อม โยง กับ ปฏิกิริยาของเอนไซม์เช่น catalysed โดย lactate , malate หรือแอลกอฮอล์เอนไซม์ดีไฮโดรจีเนสให้ตัวอย่างที่ดีสำหรับค่าตามตรวจเอนไซม์ . ลดนิโคตินาไมด์แหวนในการแสดงการดูดกลืนแสงสูงสุดใกล้340 nm ( e340 5 6220 L mol 2 1 ซม. 2 1) ซึ่งจะหายไปเมื่อการเกี่ยวกับ 1 ดังนั้น กิจกรรมของเอนไซม์ดีไฮโดรจีเนสเหล่านี้สามารถวัดได้โดยตรง โดยต่อไปนี้ลด a340 เป็นฟังก์ชันของเวลาเมื่อไม่มีการเปลี่ยนแปลงค่าการดูดกลืนแสงเกิดขึ้นในการทำปฏิกิริยาของเอนไซม์ที่มีพื้นผิวธรรมชาติ , สีบ่อยๆสามารถสังเคราะห์อนุพันธ์ chromophoric กับนักข่าวกลุ่ม ที่ใช้กันทั่วไปคือ 4-nitrophenolate นักข่าว ,ซึ่งดูดซับใกล้ 400 นาโนเมตร กลุ่มนี้สามารถ esterifiedกับ กรดอะซีเตทใน 4-nitrophenyl ( ทำหน้าที่พื้นผิวสำหรับ proteases ) , ฟอสเฟต ( เป็นสารตั้งต้นสำหรับลาร์ ) หรือน้ำตาล ( เพื่อการสอบสวนกลุ่ม พันธมิตรประชาชนเพื่อประชาธิปไตย หรือglycosidases )ในกรณีที่ดี ' เงียบ ' ของปฏิกิริยากับผลิตภัณฑ์สีที่สามารถคู่กับเอนไซม์อื่นปฏิกิริยาที่ใช้ผลิตภัณฑ์แรกของเอนไซม์ปฏิกิริยาสำหรับการแปลงที่จะนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสง . มักจะคู่กับปฏิกิริยาเงียบเช่นการใช้หรือการผลิต ขั้นตอน เป็นเค้าร่างข้างต้น การเปลี่ยนแปลงในการสมาธิได้โดยง่ายตามด้วยเปลี่ยนที่แข็งแกร่งในการดูดกลืนแสงที่ 340 นาโนเมตร มันคือ สรุปว่า ในคู่ตรวจเอนไซม์เช่นอัตราของปฏิกิริยา คือ ตัวบ่งชี้ที่ สูงกว่าอัตราของปฏิกิริยาเบื้องต้น นี้มักจะเกิดขึ้นโดยการใช้เอนไซม์ในตัวบ่งชี้ประสิทธิภาพสูง