Although these fractions appeared a

Although these fractions appeared as single peaks in their chromatograms, the 1H NMR spectra indicated that they were not pure compounds. The two fractions were subjected to an LC-MSTOF experiment to determine the molecular weight of the apparent mixture. Both fractions appeared as single peaks in the HPLC chromatogram and gave m/z values (negative ESI) of 1185.3568 (tR = 4.40 min) and 1185.3470 (tR = 4.70 min). These molecular weights indicate identical molecular formulas (M − 1) of C52H65O33
On the basis of the observed 1H NMR spectra, mass spectrum, and HPLC chromatogram it was concluded that the two separable peaks represented regioisomeric compounds. Further, the presence of four peaks in the 1H NMR spectra of the two compounds between 1.96 and 2.05 ppm suggested that the separable peaks were a set of
inseparable regioisomers that differed in the position of the acetate groups. Further attempts to purify these peaks using other forms of bonded-phase HPLC were fruitless. Attempting to solve the structure of the two compounds as mixtures of acetates was not viable because the mixture gave a spectrum that could not be interpreted. To circumvent this problem, we subjected the compounds to mild base hydrolysis. When the isomers associated with the peak at 4.40 min were treated with a methanolic solution of 0.5 M NaOH for 5 min
followed by neutralization with HOAc and separated using HPLC (NH2), a single peak (tR = 9.1 min) was observed. An accurate mass (negative ESI) gave a molar mass of 1039.3229 corresponding to a molecular formula of C43H59O29 (calculated 1039.3142). When the peak at 4.70 min was treated under the same conditions, a single peak (tR = 8.00) was obtained. Accurate mass of that peak gave an m/z of 1039.3218, which corresponds to C43H59O29. The loss of 146 amu from the native compounds upon hydrolysis was inconsistent with our initial
hypothesis that these native compounds were mixtures of regioisomeric monoacetates (i.e., anticipating a loss of 42 amu).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ถึงแม้ว่าเศษเหล่านี้ปรากฏเป็นยอดเดียวใน chromatograms ของพวกเขา แรมสเป็คตรา NMR 1H ระบุว่า พวกเขาไม่ได้สารที่บริสุทธิ์ ส่วนสองถูกต้องเพื่อการทดลอง LC MSTOF เพื่อกำหนดน้ำหนักโมเลกุลของส่วนผสมที่ชัดเจน เศษส่วนทั้งสองปรากฏเป็นยอดเดียวใน HPLC chromatogram และให้ค่า m/z (ESI ลบ) ของ 1185.3568 (tR = 4.40 นาที) และ 1185.3470 (tR = 4.70 min) น้ำหนักโมเลกุลเหล่านี้บ่งชี้เหมือนโมเลกุลสูตร (M − 1) ของ C52H65O33โดยสังเกต 1 H NMR แรมสเป็คตรา คลื่นใหญ่ และ HPLC chromatogram จะถูกสรุปว่า สองแห่ง separable แสดงสาร regioisomeric เพิ่ม เติม ของยอดสี่ในแรมสเป็คตรา NMR 1H สารสองระหว่าง 1.96 และ 2.05 ppm แนะนำว่า ยอด separable ถูกชุดregioisomers ต่อที่แตกต่างในตำแหน่งของกลุ่ม acetate ความพยายามต่อไปต้องทำยอดเขาเหล่านี้โดยใช้ HPLC ระยะถูกผูกมัดในรูปแบบอื่น ๆ ได้ที่ fruitless พยายามที่จะแก้ไขโครงสร้างของสารประกอบ 2 เป็นน้ำยาผสมของ acetates ไม่ได้เนื่องจากส่วนผสมให้สเปกตรัมที่ไม่สามารถแปลผล เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหานี้ เราต้องสารประกอบไฮโตรไลซ์พื้นฐานอ่อน เมื่อ isomers ที่เกี่ยวข้องกับพีคที่ 4.40 นาทีได้รับการรักษา ด้วยโซลูชั่น methanolic ของ 0.5 M NaOH ใน 5 นาทีตาม ด้วยปฏิกิริยาสะเทินกับ HOAc และแยกโดยใช้ HPLC (NH2), สูงสุดเดียว (tR = 9.1 min) ถูกตรวจสอบ มวลถูกต้อง (ESI ลบ) ให้มวลสบของ 1039.3229 ที่สอดคล้องกับสูตรโมเลกุลของ C43H59O29 (คำนวณ 1039.3142) เมื่อช่วงที่ 4.70 min ถือว่าภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน ช่วงเดียว (tR =เวลา 8.00) กล่าว มวลของพีคที่ถูกต้องให้เป็น m/z ของ 1039.3218 ซึ่งตรงกับ C43H59O29 การสูญเสียของแม่น้ำอามู 146 จากสารประกอบดั้งเดิมเมื่อไฮโตรไลซ์สอดคล้องกับการเริ่มต้นของเราสมมติฐานที่สารประกอบเหล่านี้ดั้งเดิมมีส่วนผสมของ regioisomeric monoacetates (เช่น สนองสูญเสียแม่น้ำอามู 42)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แม้ว่าเศษส่วนเหล่านี้ปรากฏยอดเดียวกับในโครมาโตของพวกเขาสเปกตรัม 1H NMR ชี้ให้เห็นว่าพวกเขาไม่ได้สารบริสุทธิ์ ทั้งสองเศษส่วนถูกยัดเยียดให้การทดลอง LC-MSTOF เพื่อตรวจสอบน้ำหนักโมเลกุลของส่วนผสมที่เห็นได้ชัด เศษส่วนทั้งสองดูเหมือนจะเป็นยอดเดียวใน chromatogram HPLC และให้ค่าเมตร / z (ลบ ESI) ของ 1185.3568 (TR = 4.40 นาที) และ 1185.3470 (TR = 4.70 นาที) เหล่านี้บ่งบอกถึงน้ำหนักโมเลกุลสูตรโมเลกุลเหมือนกัน (M - 1) ของ C52H65O33
บนพื้นฐานของการสังเกตสเปกตรัม 1H NMR สเปกตรัมมวลและ HPLC chromatogram สรุปได้ว่าทั้งสองเป็นตัวแทนของยอดแยกสารประกอบ regioisomeric นอกจากนี้การปรากฏตัวของสี่ยอดใน 1H NMR สเปกตรัมของสารสองระหว่าง 1.96 และ 2.05 ppm ชี้ให้เห็นว่ายอดแยกเป็นชุดของ
regioisomers แยกออกไม่ได้ที่แตกต่างกันในตำแหน่งของกลุ่มอะซิเตทที่ นอกจากนี้ความพยายามในการชำระล้างยอดเหล่านี้โดยใช้รูปแบบอื่น ๆ HPLC เฟสผูกมัดก็ไร้ผล ความพยายามที่จะแก้ปัญหาโครงสร้างของสารสองเป็นผสมอะซีเตทก็ไม่ได้ทำงานเพราะส่วนผสมให้คลื่นความถี่ที่ไม่สามารถตีความ เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหานี้เรายัดเยียดสารเพื่อการย่อยสลายฐานที่ไม่รุนแรง เมื่อสารอินทรีย์ที่เกี่ยวข้องกับจุดสูงสุดที่ 4.40 นาทีได้รับการรักษาด้วยวิธีการแก้ปัญหาของเมทานอล 0.5 M NaOH เป็นเวลา 5
นาทีตามด้วยการวางตัวเป็นกลางด้วยหรือลงและแยกออกจากกันโดยใช้วิธีHPLC (NH2) ซึ่งเป็นยอดเขาที่เดียว (TR = 9.1 นาที) เป็นที่สังเกต มวลที่ถูกต้อง (ลบ ESI) ให้มวลโมเลกุลของ 1039.3229 สอดคล้องกับสูตรโมเลกุลของ C43H59O29 (คำนวณ 1039.3142) เมื่อสูงสุดที่ 4.70 นาทีได้รับการรักษาภายใต้เงื่อนไขเดียวกันยอดเดียว (TR = 8.00) ที่ได้รับ มวลที่ถูกต้องของยอดเขาที่ให้ม. / z ของ 1039.3218 ซึ่งสอดคล้องกับ C43H59O29 การสูญเสียของมวลอะตอม 146
จากสารประกอบพื้นเมืองเมื่อย่อยสลายเป็นไม่สอดคล้องกับครั้งแรกของเราสมมติฐานที่ว่าสารเหล่านี้เป็นพื้นเมืองผสมregioisomeric monoacetates (เช่นการคาดการณ์การสูญเสียของมวลอะตอม 42 ก)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แม้ว่าเศษส่วนเหล่านี้ปรากฏเป็นยอดเดียวในกลิ่นของพวกเขา , 1H NMR สเปกตรัม พบว่าพวกเขาไม่ได้เป็นสารประกอบบริสุทธิ์ สองเศษส่วนที่ถูกภายใต้การ lc-mstof ทดลองเพื่อหาน้ำหนักโมเลกุลของส่วนผสมชัดเจน ทั้งเศษส่วนปรากฏเป็นยอดเดียวใน HPLC chromatogram และให้ M / Z ค่า ( ESI ลบ ) ของ 1185.3568 ( TR = 4.40 นาที ) และเพลง .3470 ( TR = 4.70 min ) น้ำหนัก โมเลกุลเหล่านี้บ่งชี้สูตรโมเลกุลเหมือนกัน ( m − 1 ) c52h65o33
บนพื้นฐานของการตรวจสอบ 1H NMR สเปกตรัมสเปกตรัมมวลและ HPLC chromatogram พบว่าสองแยกยอดแสดง regioisomeric สารประกอบ เพิ่มเติม การปรากฏตัวของสี่ยอดใน 1H NMR สเปกตรัมของสารประกอบสองชนิดระหว่าง 3% และ 205 ppm พบว่ายอดแยกเป็นชุดของ
ซี้ regioisomers ที่แตกต่างกันในตำแหน่งของ , กลุ่ม นอกจากนี้ความพยายามที่จะชำระยอดเหล่านี้โดยใช้รูปแบบอื่น ๆของผูกเฟส HPLC ก็ไร้ผล . พยายามแก้โครงสร้างของสารประกอบสองชนิดเป็นสารผสมของอะซีเตทไม่ได้เพราะส่วนผสมให้สเปกตรัมที่ไม่สามารถตีความได้เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหานี้ เราอาจจะย่อยสลายสารฐานอ่อน เมื่อสารอินทรีย์ที่เกี่ยวข้องกับจุดสูงสุดที่ 4.40 นาที ได้รับการรักษาด้วยสารละลายเมทานอล 0.5 M NaOH เป็นเวลา 5 นาทีตามด้วยการวางตัวเป็นกลางด้วย
hoac แยกโดยใช้ HPLC ( nh2 ) ยอดเดี่ยว ( TR = 9.1 มิน ) ) เป็นมวลที่ถูกต้อง ( ESI ลบ ) ให้มวลต่อโมลของฉัน .3229 สอดคล้องกับสูตรโมเลกุลของ c43h59o29 ( คำนวณ 1039.3142 ) เมื่อสูงสุดที่ 4.70 มินได้รับการรักษาภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน มียอดเดียว ( TR = 8.00 ) คือได้รับ มวลที่ถูกต้องของยอดเขาให้ M / Z ของ 1039.3218 ซึ่งสอดคล้องกับ c43h59o29 . การสูญเสียของพวกอามุจากการย่อยสลายสารดั้งเดิมเมื่อไม่สอดคล้องกับ
ของเราเริ่มต้นพบว่าสารประกอบพื้นเมืองเหล่านี้ถูกผสม regioisomeric monoacetates ( เช่น คาดขาดทุน 42 อามุ

)