2.2. Moisture content analysisMoist

2.2. Moisture content analysis
Moisture content of the samples was determined according to
the ‘‘Turkish Standard 1129-ISO 1026 method’’ (TSE, 1998). Two
grams of fresh material of each powdered sample was dried in a
vacuum oven (Gallenkamp, London, UK) at 70C for 6 h, after
which the dry weight was calculated and recorded.
2.3. Extract preparation
The sample extracts, which were used in spectrophotometric
assays, were prepared in triplicate, as described previously by
Capanoglu et al. (2008). Briefly, 2 ± 0.01 g fresh weight of each
sample was extracted with 5 mL of 75% aqueous methanol containing 0.1% formic acid followed by 15 min sonication. The treated
samples were then centrifuged (Hettich Zentrifugen Universal
32R, Tuttlingen, Germany) for 10 min at 2700 g, and the supernatant was collected. Another 5 mL of 75% aqueous methanol containing 0.1% formic acid was added to the pellet, and the
extraction procedure was repeated two more times. All three
supernatants were combined and adjusted to a final volume of
15 mL. Prepared extracts were stored at20C until analysis.
For the analysis of individual phenolics by targeted HPLC and
untargeted LC–QTOF–MS based measurements, 0.4 g freeze-dried
sample was extracted with 3.0 mL 75% methanol in MQ water acidified with 0.1% formic acid. Extracts were sonicated for 15 min,
centrifuged at 2500 rpm for 10 min and filtered through 0.45lm
filters (Minisart SRP4, Biotech GmbH, Germany) (Capanoglu et al.,
2008).
2.4. Spectrophotometric assays
The total phenolic (TPC) content of extracts was determined by
Folin–Ciocalteau method modified fromVelioglu, Mazza, Gao, and
Oomah (1998)using gallic acid as a standard. The results were
expressed in milligrams of gallic acid equivalent (GAE) per 100 g
dry weight (DW) sample.
The total flavonoid content (TFC) was determined according to
the method detailed by Kim, Jeong, and Lee (2003). The results
were calculated using a standard calibration curve prepared with
rutin (quercetin-3-rutinoside) and the TFC was expressed in mg
rutin equivalents (RE) per 100 g DW.
The monomeric anthocyanin (TMA) content was determined
according to the pH differential method (Lee, Durst, & Wrolstad,
2005) and expressed in milligrams of cyanidin-3-glucoside equivalent (C3GE) per 100 g dry weight sample. Percent polymeric color
(PC) was determined using the method described by Giusti and
Wrolstad (2001).
The total antioxidant capacities (TAC) of the sample extracts
were evaluated using fourin vitro tests in parallel, including the
ABTS (2,2-azinobis 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid diammonium salt) method, the FRAP (ferric reducing antioxidant
power) method, the CUPRAC (copper reducing antioxidant capacity) method, and the DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)
method, which were described previously byApak, Güçlü,
Özyürek, and Karademir (2004), Benzie and Strain (1996),
Kumaran and Karunakaran (2006) and Miller and Rice-Evans
(1997), respectively. In all these 4 assays, trolox was used as a reference compound and results were expressed in terms of mg trolox
equivalent (TE) per 100 g DW.
2.5. Targeted HPLC analysis of phenolics
The targeted quantification of black mulberry phenolics was
performed according to the method described by Toydemir,
Capanoglu, Gomez Roldan, et al. (2013), using a W600 Waters
HPLC system (Milford, MA, USA) coupled to a Waters 996 photodiode array (PDA) detector (Milford, MA, USA). Compounds were
separated using a Luna C18 column (1504.6 mm, 3l; Phenomenex, Torrance, CA, USA) and quantification was performed based
on the peak surface area at 312 nm for phenolic acids, at 360 nm
for flavonols, and at 520 nm for anthocyanins. Dose–response
Black mulberry Washing Milling Mashing Pressing
Initial
pressed juice
Press cake
Pasteurization Juice
(1) (3)
(5)
(6)
Fig. 1.Schematic representation of black mulberry juice processing with the sampling points identified. The numbers correspond to: (1) fresh fruit, (2) milled fruit, (3) mash,
(4) initial (pressed) juice, (5) press cake, and (6) final (pasteurized) juice.
278 M. Tomas et al. / Food Chemistry 186 (2015) 277–284
curves of chlorogenic acid, quercetin, rutin, and cyanidin-3-glucoside (0–50lg/mL) were used as reference.
2.6. LC–QTOF–MS based identification
Identification of black mulberry phenolics was performed by an
LC–PDA–QTOF–MS system, using the same chromatographic and
mass spectrometric conditions as described before byMoco et al.
(2006). A Luna C18(2) pre-column (2.0 4 mm) and analytical column (2.0150 mm, 10 nm, particle size 3lm) from Phenomenex
(Torrance, CA, USA) were used for chromatographic separation. For
LC–PDA–MS analysis, each filtered sample, with an injection volume of 5lL, was injected into the system using formic acid:water
(1:1000, v/v; eluent A) and formic acid:acetonitrile (1:1000, v/v;
eluent B) as elution solvents. Flow was set at 0.19 mL/min with
the gradient from 95% eluent A and 5% eluent B to 65% eluent A
and 35% eluent B across a period of 45

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. เนื้อหาความชื้นกำหนดความชื้นของตัวอย่างตามการ '' 1129 ISO มาตรฐานตุรกี 1026 วิธี '' (TSE, 1998) สองกรัมวัสดุสดของแต่ละอย่างผงถูกอบแห้งในตัวสูญญากาศเตา (Gallenkamp ลอนดอน สหราชอาณาจักร) 70 c เป็นเวลา 6 ชม. หลังน้ำหนักแห้งถูกคำนวณ และบันทึก2.3. การเตรียมสารสกัดจากสารสกัดตัวอย่าง ซึ่งใช้ใน spectrophotometricมีเตรียม assays ลข้อ ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดยCapanoglu et al. (2008) สั้น ๆ 2 ± 0.01 กรัมสดน้ำหนักของแต่ละตัวอย่างถูกสกัด ด้วย 5 มล. 75% สารละลายเมทานอลที่ประกอบด้วย 0.1% กรดตาม โดย sonication 15 นาที การบำบัดตัวอย่างแล้วเหวี่ยง (Hettich Zentrifugen สากล32R, Tuttlingen เยอรมนี) สำหรับ 10 นาทีที่ 2700 กรัม และ supernatant รวบรวม เพิ่มอีก 5 มล. 75% สารละลายเมทานอลที่ประกอบด้วย 0.1% กรดเม็ด และขั้นตอนการสกัดซ้ำครั้งสองครั้ง ทั้งสามsupernatants รวม และปรับเป็นระดับสุดท้าย15 mL สารสกัดที่เตรียมไว้ถูกเก็บไว้ที่ 20 C จนถึงการวิเคราะห์ในการวิเคราะห์แต่ละ phenolics โดย HPLC เป้าหมาย และuntargeted LC – QTOF – MS ใช้วัด 0.4 กรัมชนิดแห้งตัวอย่างถูกสกัด ด้วยเมทานอล 75% 3.0 มิลลิลิตรในน้ำ MQ กับกรดฟอร์มิก 0.1% สารสกัดถูก sonicated 15 นาทีเหวี่ยงที่ 2500 rpm 10 นาที และกรองผ่าน 0.45lmตัวกรอง (Minisart SRP4 เทคโนโลยีชีวภาพ GmbH เยอรมนี) (Capanoglu et al.,2008)2.4. spectrophotometric assaysเนื้อหาทั้งหมดนฟีนอ (TPC) สารสกัดจากกำหนดโดยวิธีท่อง – Ciocalteau fromVelioglu, Mazza เกา แก้ไข และOomah (1998) โดยใช้กรด gallic เป็นมาตรฐาน ผลลัพธ์ได้แสดงเป็นมิลลิกรัม gallic กรดเทียบเท่า (GAE) ต่อ 100 กรัมแห้งตัวอย่างน้ำหนัก (DW)กำหนดตามเนื้อหารวม flavonoid (ที)วิธีการโดยละเอียด โดยคิม ฮง ลี (2003) ผลลัพธ์คำนวณโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐานพร้อมrutin (quercetin 3 rutinoside) และทีการถูกแสดงในมก.เทียบเท่า rutin (RE) ต่อ 100 กรัม DWกำหนดเนื้อหา monomeric นั้น (TMA)ตามส่วนวิธีวัดค่า pH (ลี Durst และ Wrolstad2005) และแสดงในมิลลิกรัมเทียบเท่า cyanidin-3 glucoside (C3GE) ตัวอย่าง 100 กรัมน้ำหนักแห้ง สีเมอร์เปอร์เซ็นต์กำหนด (PC) โดยใช้วิธีการอธิบาย โดย Giusti และWrolstad (2001)กำลังการผลิตรวมต้านอนุมูลอิสระ (TAC) ของสารสกัดตัวอย่างถูกประเมินโดยใช้ fourin หลอดทดลองทดสอบควบคู่ รวมทั้งการวิธีการรเรียน (azinobis 2.2 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic diammonium กรดเกลือ) FRAP (เฟอร์ลดสารต้านอนุมูลอิสระวิธีพลังงาน) วิธี CUPRAC (ทองแดงลดกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระ และ DPPH (1.1 ได-2-picrylhydrazyl)วิธี ที่ได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ byApak, GüçlüÖzyürek และ Karademir (2004), Benzie และสายพันธุ์ (1996),Kumaran และ Karunakaran (2006) และมิลเลอร์ และข้าวอีวานส์(1997), ตามลำดับ ใน assays ทั้ง 4 เหล่า trolox ถูกใช้เป็นสารอ้างอิง และผลลัพธ์ถูกแสดงในรูปของ mg troloxเทียบเท่ากับ (TE) ต่อ 100 กรัม DW2.5 เป้าหมายวิเคราะห์ HPLC phenolicsด้านเป้าหมายของหม่อนสีดำ phenolics เป็นทำตามวิธีอธิบายไว้ โดย ToydemirCapanoglu เงา Roldan, et al. (2013), ใช้น้ำ W600ระบบ HPLC (ลฟอร์ด MA, USA) ควบคู่กับเครื่องน้ำ 996 โฟโตไดโอดอาร์เรย์ (PDA) ตรวจจับ (ลฟอร์ด MA, USA) สารประกอบได้แยกใช้คอลัมน์ Luna C18 (150 4.6 มม. 3l Phenomenex รันซ์ CA สหรัฐอเมริกา) และด้านมีดำเนินการตามบนพื้นที่ผิวสูงสุดที่ 312 nm สำหรับกรดฟีโนลิก ที่ 360 nmflavonols และ ที่ 520 nm สำหรับ anthocyanins ยา – ตอบสนองสาดำล้างกัดเพศกดเริ่มต้นกดน้ำกดเค้ก น้ำผลไม้พาสเจอร์ไรซ์(1) (3)(5)(6)1.รูปแสดงแผนภาพของหม่อนสีดำน้ำกับจุดเก็บตัวอย่างที่ระบุ หมายเลขตรงกับ: (1) ผลไม้ ผลไม้ข้าวสาร (2) (3) หน่วย ผ่า(4) เริ่มต้นน้ำ (กด), (5) กดเค้ก และน้ำผลไม้ (พาสเจอร์ไรส์) สุดท้าย (6)โทมัส 278 M. และ al. / เคมีอาหาร 186 (2015) 277-284เส้นโค้งขึ้นกรด quercetin, rutin และ cyanidin-3-glucoside (0 – 50lg/mL) ถูกใช้เป็นอ้างอิง2.6. LC – QTOF – MS ใช้รหัสรหัสของหม่อนสีดำ phenolics ทำโดยการระบบ LC – PDA – QTOF – MS โดยใช้โครมาเหมือนกัน และมวล spectrometric เงื่อนไขตามที่อธิบายไว้ก่อน byMoco et al(2006) . A Luna C18(2) ก่อนคอลัมน์ (2.0 4 มิลลิเมตร) และวิเคราะห์คอลัมน์ (2.0 150 มม. 10 nm, 3lm ขนาดอนุภาค) จาก Phenomenex(รันซ์ CA, USA) ถูกใช้สำหรับการแยกโครมา สำหรับLC-PDA – MS วิเคราะห์ ตัวอย่างแต่ละกรอง ด้วยการฉีด 5lL ถูกฉีดเข้าไปในระบบใช้ป้องกันปลวกมดกรด: น้ำ(1: 1000, v/v; eluent A) และป้องกันปลวกมดกรด: acetonitrile (1: 1000, v/veluent ที่ B) เป็นตัวทำละลายชะ ตั้งค่ากระแสที่ 0.19 mL/นาที ด้วยการไล่ระดับสีจาก eluent 95% A และ 5% eluent B การ eluent 65% Aและ B eluent 35% ในระยะเวลา 45