2.8. In vivo gene expressionTwo gro

2.8. In vivo gene expression

Two groups of young BALB/c mice (n = 6) were injected with either 1.8 µg of naked pEGFP or 1.8 µg of pEGFP delivered via nanoparticle formulation. Both groups of mice were injected intraperitoneally. Seven days post-injection, mice were sacrificed and their lungs, livers, spleens and lymph nodes were harvested under aseptic conditions. The tissue extracts were prepared in PBS by homogenization and centrifugation (12,000 rpm/4 °C). The tissue homogenates were assayed for total protein using Lowry’s method. Each tissue was normalized for protein and assayed for the expressed green fluorescence protein (GFP) using fluorimeter (excitation filter 365 nm and emission filter 510 nm). The background fluorescence (RFU) obtained from the tissue homogenates of untreated mice was subtracted from the RFU obtained from each of the tissue homogenates of pEGFP treated mice.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.8 ยีนที่ในสัตว์ทดลองกลุ่มสองหนุ่มหนู BALB/c (n = 6) ได้ฉีดใดไมโครกรัมเป็นเครื่อง 1.8 ของ pEGFP เปลือยหรือไมโครกรัมเป็นเครื่อง 1.8 ของ pEGFP ที่ส่งผ่าน nanoparticle กำหนด ทั้งกลุ่มของหนูก็ฉีด intraperitoneally เจ็ดวันหลังฉีด หนูได้เสียสละ และมีการเก็บเกี่ยวของปอด livers, spleens และน้ำเหลืองภายใต้เงื่อนไขที่เข้มข้นขึ้น สารสกัดจากเนื้อเยื่อถูกเตรียมใน PBS โดย homogenization centrifugation (12000 rpm/4 ° C) Homogenates เนื้อเยื่อถูก assayed สำหรับโปรตีนทั้งหมดโดยใช้วิธีของ Lowry แต่ละเนื้อเยื่อตามปกติสำหรับโปรตีน และ assayed สำหรับโปรตีน fluorescence แสดงสีเขียว (GFP) ใช้ fluorimeter (nm กรอง 365 ในการกระตุ้นและปล่อยก๊าซกรอง 510 nm) Fluorescence พื้นหลัง (RFU) ที่ได้รับจาก homogenates เนื้อเยื่อของหนูไม่ถูกรักษาถูกหักออกจาก RFU ที่ได้รับจาก homogenates เนื้อเยื่อของหนูถือว่า pEGFP

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.8 ในร่างกายการแสดงออกของยีนทั้งสองกลุ่มของหนุ่มสาวหนู Balb / c (n = 6) ได้รับการฉีดกับทั้ง 1.8 ไมโครกรัมของ pEGFP เปล่าหรือ 1.8 ไมโครกรัมของ pEGFP ส่งผ่านสูตรอนุภาคนาโน ทั้งสองกลุ่มของหนูที่ได้รับการเข้า intraperitoneally เจ็ดวันหลังการฉีดหนูได้รับการเสียสละของพวกเขาและปอดตับม้ามและต่อมน้ำเหลืองเก็บเกี่ยวภายใต้เงื่อนไขที่ปลอดเชื้อ สารสกัดจากเนื้อเยื่อที่ได้จัดทำขึ้นโดยพีบีเอสเป็นเนื้อเดียวกันและการหมุนเหวี่ยง (12,000 รอบต่อนาที / 4 ° C) homogenates เนื้อเยื่อถูก assayed โปรตีนรวมโดยใช้วิธีการของโลว์รีย์ เนื้อเยื่อปกติแต่ละคนได้รับโปรตีนและ assayed สำหรับแสดงโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP) โดยใช้ fluorimeter (กรองกระตุ้น 365 นาโนเมตรและการปล่อยกรอง 510 นาโนเมตร) เรืองแสงพื้นหลัง (RFU) ที่ได้รับจาก homogenates เนื้อเยื่อของหนูที่ได้รับการรักษาที่ถูกหักออกจาก RFU ที่ได้รับจากแต่ละ homogenates เนื้อเยื่อของหนู pEGFP รับการรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.8 . การแสดงออกของยีนในสัตว์

สองกลุ่มเด็กหนูสายพันธุ์ Balb / C ( n = 6 ) ถูกฉีดด้วย 1.8 µกรัมเปลือยกาย pegfp หรือ 1.8 µกรัมสูตรสำหรับ pegfp พ้นผ่าน . ทั้งกลุ่มของหนูถูกฉีดพบ . เจ็ดวันหลังจากการฉีด , หนูเสียสละและปอด ตับ ม้าม และต่อมน้ำเหลืองเก็บภายใต้สภาพปลอดเชื้อเนื้อเยื่อ สารสกัดที่เตรียมใน PBS โดยการเหวี่ยงแยก ( และ 12 , 000 รอบต่อนาที / 4 ° C ) เนื้อเยื่อ homogenates มีปริมาณโปรตีนทั้งหมดของโลว์รีย์ให้ใช้วิธี ในเนื้อเยื่อปกติให้โปรตีนและเอนไซม์โปรตีนเรืองแสงสีเขียว ( เพื่อแสดง fluorimeter ( GFP ) โดยใช้แผ่นกรอง 365 nm และการปล่อยกรอง 510 nm )เรืองแสงพื้นหลัง ( RFU ) ที่ได้จากเนื้อเยื่อ homogenates ของหนูไม่หักออกจาก RFU ที่ได้จากเนื้อเยื่อของแต่ละ homogenates pegfp ทำกับหนู