To gain insights into how P. taetro

To gain insights into how P. taetrolens cells faced non-limiting
C-source conditions at the single-cell level, the membrane integrity,
membrane polarization and metabolic activity were monitored
during shake-flask batch co-fermentations. Addressing the
impact of such conditions provided deeper knowledge about bioprocess
robustness and how cells faced the over-supply of
non-lactose C-sources like glucose and glycerol.
As can be seen in Fig. S1A, membrane polarization decreased
markedly upon the onset of the lactobionic acid production phase
regardless the higher C-source availability conditions encountered
in a whey/glucose co-fermentation. In comparison to a
non-supplemented fermentation, P. taetrolens cells displayed lower
depolarization levels at later cultivation stages (60 h) for all the different
glucose concentrations, suggesting the presence of readily
assimilated C-sources like glucose or gluconic acid in the fermentation
broth. In terms of metabolic activity, glucose co-supply led
to reduced metabolic activity levels at early cultivation times
(12 h) (Fig. 2A). However, the prolonged exposure to extreme
acidic conditions encountered in a non-supplemented fermentation
led to find similar metabolic activity levels at the end of the
fermentation (60 h) regardless whether the system was
co-supplied with glucose or not (Fig. 2A). After 60 h, all the
fermentations also presented low membrane integrity levels,
suggesting the emergence of a stress-induced physiological
response featured by the loss of membrane integrity and metabolic
activity. Interestingly, physiological segregation with two
major cell subpopulations at early culture stages (12 h) arose when
glucose was employed as co-substrate (Fig. 2B). Such cell
segregation may be translated into an asynchronous burst of producing
and non-producing lactobionic acid cells with detrimental
impact on the fermentation performance (Alonso et al., 2012b,
2013c).
Under whey/glycerol co-fermentation, the grade of membrane
depolarization throughout all the cultivations was quite similar in comparison to a non-supplemented culture (Fig. S1B). Thus, the
unconsumed glycerol left in the co-fermentations did not contribute
to maintain lower membrane depolarization levels.
Whereas the metabolic activity was reduced by co-supplying glycerol
at early cultivation stages (12 h) (Fig. 2C), glycerol co-supply
contributed to ameliorate the stress-induced physiological
response by maintaining higher membrane integrity levels during
the lactobionic acid production phase (>24 h)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การเจาะลึกวิธี P. taetrolens เซลล์ประสบไม่จำกัดเงื่อนไขแหล่ง C ระดับเซลล์เดียว ความสมบูรณ์ เมมเบรนเมมเบรนโพลาไรซ์และกิจกรรมที่เผาผลาญได้ตรวจสอบระหว่างชุดหมักแหนมหนาวสั่นร่วมด้วย แก้ปัญหาผลกระทบต่อเงื่อนไขดังกล่าวให้ความรู้ลึกเกี่ยวกับ bioprocessเสถียรภาพและวิธีเซลล์ประสบเกินจัดหาไม่ใช่ย่อยแลคโตส C แหล่งเช่นกลูโคสและกลีเซอรสามารถมองเห็นได้ในฟิก S1A เมมเบรนโพลาไรซ์ที่ลดลงอย่างเด่นชัดเมื่อเริ่มมีอาการของระยะการผลิตกรด lactobionicไม่คำนึงถึงเงื่อนไขพร้อมแหล่ง C สูงพบในการหมักการร่วมเวย์/กลูโคส เปรียบเทียบการไม่เสริมหมัก P. taetrolens เซลล์แสดงต่ำกว่าdepolarization ระดับที่เพาะปลูกขั้นตอนต่อไป (60 h) สำหรับทั้งหมดที่แตกต่างกันความเข้มข้นกลูโคส การแนะนำของพร้อมขนบธรรมเนียมประเพณี C-แหล่งเช่นกลูโคสหรือ gluconic กรดในการหมักซุป ในกิจกรรมเผาผลาญ กลูโคสร่วมจัดนำการลดระดับการเผาผลาญกิจกรรมช่วงเวลาเพาะปลูก(12 h) (Fig. 2A) อย่างไรก็ตาม การสัมผัสเป็นเวลานานมากสภาพกรดที่พบในการหมักที่ไม่เสริมนำหากิจกรรมเผาผลาญคล้ายระดับเมื่อสิ้นสุดการหมัก (60 h) โดยไม่คำนึงถึงว่าระบบไม่ซึ่งจัดร่วมกับกลูโคส หรือไม่ (Fig. 2A) หลังจาก 60 h ทุกหมักแหนมยังแสดงเยื่อต่ำที่ระดับความสมบูรณ์แนะนำที่เกิดขึ้นของความเครียดเกิดจากสรีรวิทยาตอบที่โดดเด่น โดยสูญเสียความสมบูรณ์ของเยื่อ และเผาผลาญกิจกรรมการ เป็นเรื่องน่าสนใจ การแบ่งแยกสรีรวิทยากับสองsubpopulations เซลล์สำคัญในช่วงระยะวัฒนธรรม (12 h) เกิดขึ้นเมื่อกลูโคสถูกจ้างเป็นพื้นผิวร่วม (Fig. 2B) เซลล์ดังกล่าวการแบ่งแยกอาจแปลตามการระเบิดแบบอะซิงโครนัสการผลิตและไม่ใช่ผลิต lactobionic กรดเซลล์ มีผลดีส่งผลกระทบต่อประสิทธิภาพการหมัก (Alonso et al., 2012b2013 c)ภายใต้/กลีเซอรเวย์ร่วมหมัก ชั้นของเมมเบรนdepolarization ตลอดทั้ง cultivations ทั้งหมดได้ โดยไม่เสริมวัฒนธรรม (ฟิกคล้าย S1B) ดังนั้น การกลีเซอร unconsumed ซ้ายในการหมักแหนมร่วมไม่ได้มีส่วนร่วมเพื่อรักษาระดับการ depolarization เยื่อต่ำกว่าในขณะที่กิจกรรมเผาผลาญได้ลดลง โดยการร่วมจัดหากลีเซอรในช่วงเพาะปลูกขั้นตอน (12 h) (Fig. 2C), กลีเซอรร่วมจัดหาส่วน ameliorate ความเครียดเกิดสรีรวิทยาตอบ โดยรักษาระดับความสมบูรณ์ของเยื่อสูงระหว่างขั้นตอนการผลิตกรด lactobionic (> 24 ชม)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อให้ได้รับข้อมูลเชิงลึกในวิธีการที่พี taetrolens เซลล์ต้องเผชิญไม่ จำกัด
เงื่อนไข C-แหล่งที่มาที่ระดับเซลล์เดียว, ความสมบูรณ์ของเมมเบรนโพลาไรซ์เมมเบรนและกิจกรรมการเผาผลาญได้รับการตรวจสอบระหว่างชุดเขย่าขวดร่วมหมักแหนม ที่อยู่ผลกระทบของเงื่อนไขดังกล่าวให้ความรู้ลึกเกี่ยวกับกระบวนการชีวภาพทนทานและวิธีการที่เซลล์ต้องเผชิญมากกว่าอุปทานของที่ไม่ใช่ของแลคโตสC แหล่งที่มาเช่นกลูโคสและกลีเซอรอล. ที่สามารถเห็นได้ในรูป S1A, โพลาไรซ์เมมเบรนที่ลดลงอย่างเห็นได้ชัดเมื่อการโจมตีของขั้นตอนการผลิตกรดlactobionic โดยไม่คำนึงถึงที่สูงกว่าสภาพพร้อมใช้งานC-แหล่งที่พบในนม / กลูโคสร่วมการหมัก เมื่อเปรียบเทียบกับการหมักที่ไม่ได้เสริม, พี taetrolens เซลล์แสดงที่ต่ำกว่าระดับการสลับขั้วในขั้นตอนการเพาะปลูกต่อมา(60 ชั่วโมง) สำหรับทุกที่แตกต่างกันความเข้มข้นของน้ำตาลกลูโคสซึ่งแสดงว่าได้อย่างง่ายดายหลอมรวมC-แหล่งที่มาเช่นกลูโคสหรือกรด Gluconic ในการหมักน้ำซุป. ในแง่ของกิจกรรมการเผาผลาญกลูโคสร่วมอุปทานนำไปสู่ระดับกิจกรรมการเผาผลาญลดลงในช่วงเวลาที่การเพาะปลูกในช่วงต้น(12 ชั่วโมง) (รูป. 2A) อย่างไรก็ตามการสัมผัสเป็นเวลานานไปมากสภาพเป็นกรดที่พบในการหมักที่ไม่ได้เสริมนำไปสู่การพบในระดับกิจกรรมการเผาผลาญที่คล้ายกันในตอนท้ายของการหมัก(60 ชั่วโมง) โดยไม่คำนึงถึงว่าระบบได้รับการร่วมมาพร้อมกับน้ำตาลกลูโคสหรือไม่(รูป. 2A) . หลังจาก 60 ชั่วโมงทุกหมักแหนมยังนำเสนอความสมบูรณ์ของเยื่อระดับต่ำแนะนำการเกิดขึ้นของทางสรีรวิทยาความเครียดเกิดการตอบสนองที่โดดเด่นจากการสูญเสียความสมบูรณ์ของเยื่อหุ้มเซลล์และการเผาผลาญกิจกรรม ที่น่าสนใจการแยกทางสรีรวิทยาที่มีสองประชากรเซลล์ที่สำคัญในขั้นตอนการเพาะเลี้ยงต้น (12 ชั่วโมง) เกิดขึ้นเมื่อกลูโคสถูกจ้างมาเป็นผู้ร่วมตั้งต้น(รูป. 2B) เซลล์ดังกล่าวแยกอาจจะแปลเป็นระเบิดไม่ตรงกันในการผลิตและไม่ผลิตเซลล์กรดlactobionic กับอันตรายผลกระทบต่อประสิทธิภาพการหมัก(อลอนโซ่ et al., 2012b, 2013c.) ภายใต้เวย์ / กลีเซอรอลร่วมหมักเกรดของเมมเบรนสลับขั้วตลอดเพาะปลูกทั้งหมดก็ค่อนข้างคล้ายกันในการเปรียบเทียบกับวัฒนธรรมที่ไม่เสริม (รูป. S1B) ดังนั้นกลีเซอรอล unconsumed ที่เหลืออยู่ในร่วมหมักแหนม-ไม่ได้มีส่วนร่วมในการรักษาเยื่อลดระดับการสลับขั้ว. ในขณะที่กิจกรรมการเผาผลาญลดลงกลีเซอรอลร่วมการจัดหาในขั้นตอนการเพาะปลูกในช่วงต้น (12 ชั่วโมง) (รูป. 2C), กลีเซอรอลร่วมอุปทาน ส่วนร่วมในการเยียวยาทางสรีรวิทยาความเครียดที่เกิดจากการตอบสนองโดยการรักษาระดับความสมบูรณ์ของเมมเบรนที่สูงขึ้นในช่วงการผลิตกรดlactobionic เฟส (> 24 ชั่วโมง)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่จะได้รับข้อมูลเชิงลึกในวิธีหน้า taetrolens เซลล์เผชิญไม่จํากัด
เงื่อนไข c-source ในระดับเซลล์เดียว , เมมเบรนสมบูรณ์
กิจกรรมโพลาไรเซชันเมมเบรนและการเผาผลาญอาหาร ถูก
ระหว่างเขย่าขวดชุด Co fermentations . ที่อยู่
ผลกระทบเงื่อนไขดังกล่าวให้ความรู้ลึกเกี่ยวกับชื่น
ความแข็งแกร่งและวิธีการเซลล์เผชิญมากกว่าอุปทานของ
ไม่แลคโตส c-sources เช่นกลูโคสและกลีเซอรอล .
ที่สามารถเห็นได้ในรูปที่ s1a เมมเบรน , โพลาไรเซชันลดลงอย่างเห็นได้ชัด
เมื่อการโจมตีของกรด lactobionic ขั้นตอนการผลิต
ไม่ว่าสูง c-source พร้อมเงื่อนไขพบ
ในเวย์ / กลูโคส จำกัดการหมัก ในการเปรียบเทียบกับ
ไม่เสริมการหมัก , หน้า taetrolens เซลล์แสดงลด
ดีโพลาไรเซชันในระดับการเพาะปลูกหลังจากขั้นตอน ( 60 ชั่วโมง ) สำหรับทั้งหมดแตกต่างกัน
กลูโคสความเข้มข้น แสดงสถานะของพร้อม c-sources
ขนบธรรมเนียมประเพณีเช่นกลูโคส หรือ กรดกลูโคนิกในการหมัก
ซุป ในแง่ของการสลายกิจกรรมจัดหา Co เพื่อลดการเผาผลาญกลูโคส LED
กิจกรรมระดับเวลาปลูกต้น
( 12 ชั่วโมง ) ( รูปที่ 2A ) อย่างไรก็ตาม การเปิดรับแสงนานที่สุด
มีสภาพเป็นกรดที่พบในอาหารและไม่นำไปสู่การเผาผลาญกิจกรรมคล้ายกัน
หาระดับที่สิ้นสุดของ
หมัก ( 60 ชั่วโมง ) ไม่ว่าระบบ
Co มาพร้อมกับกลูโคสหรือไม่ ( รูปที่ 2A ) หลังจาก 60 ชั่วโมง fermentations ทั้งหมดยังแสดงระดับความสมบูรณ์ต่ำ

แนะนำเยื่อ , การเกิดขึ้นของ stress-induced สรีรวิทยา
การตอบสนองที่โดดเด่นโดยการสูญเสียของความซื่อสัตย์และเยื่อสลายกิจกรรม

น่าสนใจ สรีรวิทยา แยกกับสอง
สาขาเซลล์แต่ละที่วัฒนธรรมช่วงแรก ( 12 ชั่วโมง ) เกิดขึ้นเมื่อ
กลูโคสใช้วัสดุ จำกัด ( รูปที่ 2B ) เช่นเซลล์
แยกอาจจะแปลเป็นระเบิดแบบอะซิงโครนัส ของการผลิตและการผลิตกรดเซลล์ไม่ lactobionic

กับเป็นอันตรายผลกระทบต่อประสิทธิภาพการหมัก ( อลอนโซ่ et al . , 2012b

, 2013c ) ภายใต้เวย์ / กลีเซอรอล จำกัดการหมัก , เกรดของเมมเบรน
เปลี่ยนขั้วตลอดเพาะทั้งหมดก็ค่อนข้างคล้ายกันในการเปรียบเทียบกับการไม่ใช่เสริมวัฒนธรรม ( รูปที่ s1b ) ดังนั้น unconsumed
กลีเซอรอลที่เหลือใน Co fermentations ไม่ได้มีส่วนร่วมเพื่อรักษาเยื่อเปลี่ยนขั้วล่าง

ระดับ .ส่วนกิจกรรมการเผาผลาญลดลง Co ขายกลีเซอรอล
ที่ปลูกในระยะแรก ( 12 ชั่วโมง ) ( รูปที่ 2 ) , กลีเซอรอล โคจัดหา
ส่วนกระเตื้องการตอบสนองทางสรีรวิทยา
stress-induced โดยรักษาความสมบูรณ์ในระดับที่สูงด้วย
lactobionic ขั้นตอนการผลิตกรด ( 24 ชั่วโมง )