- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
2.7. Surface morphology analysisSam
2.7. Surface morphology analysis
Sample was mounted onto a scanning electron microscope
(SEM) specimen stub with a carbon double-sided tape prior to
coating. Sample was coated with gold using a Bal-Tec SCD 005
sputter coater (Bal-Tec AG, Liechtenstein) and subsequently photographed
using a Leo 1455 variable pressure SEM (Germany)
at 25 and 100 magnifications.
2.8. Homogeneity and molecular weight determination using size
exclusion chromatography
The molecular weight determination by laser light scattering was
measured using the method described by Corredig, Kerr, andWicker
(2000). Dragon fruit peel, apple and citrus pectins were analysed using
high performance size exclusion chromatography (HPSEC)
coupledwithaDawnHeleosmultiangle laser light-scattering (MALLS)
detector (Wyatt Technology, USA) and a Optilab reX differential
refractometer (RI) which operated at 633 nm at a constant temperature,
25 C. The pectin solutions (1.5 mg/mL) were solubilised under
magnetic stirring, then filtered through a 0.45 mm membrane filter
(Milipore Co., Milford, USA) and manually injected through a 100 mL
loop. One PL aquagel-OH MIXED-H 8 mm column (Agilent Technologies,
USA) was used. Elution was carried out at a flow rate of 0.6 mL/
min with 0.1 M sodium nitrite (NaNO2) solution containing 0.5 g/L
sodium azide (NaN3) as a bactericide at 25 C.Monodisperse dextran
standards with molecular weights 25, 60 and 500 kDa were used to
check the performance of the HPSEC-MALLS system. Molecular
weight parameters were calculated using the Astra software.
2.9. Determination of monosaccharide composition
Monosaccharide composition of dragon fruit peel pectin was
determined using the method described by Dai et al. (2010) using
high performance liquid chromatography (HPLC). The pectin (3 mg/
mL) was dissolved in distilled purified water. The pectin solution
(100 uL) was hydrolysed to monomers with 100 uL of 4 M trifluoroacetic
acid for 2 h in an oven at 100 C prior to derivatisation with 1-
phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP). Ten monosaccharides
(mannose, ribose, rhamnose, glucuronic acid, galacturonic acid,
glucose, galactose, xylose, arabinose, fucose) were separated using
ZORBAX Eclipse Plus-C18 HPLC column (250 mm length, 4.6 mm
internal diameter and 5 mmparticle size, Agilent Technologies, USA).
AWaters e2695 HPLC equipped with aWaters 2489 UV/Vis detector
was used. The HPLC conditions and mobile phase compositionwere
as described by Dai et al. (2010). An Empower2 software (Waters,
USA)was used to collect the data.Themonosaccharide concentration
in dragon fruit peel pectin was calculated by comparing integration
values of their peak areas to a calibrated standard curve.
2.10. Flow analysis
Dragon fruit peel, apple and citrus pectins dispersions with
different concentrations (0.5%,1%,2%and3%,w/v)were preparedwith
distilled deionised water. Flow behaviour of the dispersions was
determined using a rheometer (Rheostress 600, Karlsruhe, Germany).
Measurements were performed with a 35 mm in diameter serrated
parallel plate geometry (PP35Ti). The shear rate was increased from
0 to 400 s1 using the software control (Monsoor, 2005). The temperaturewasmaintained
at 250.1 C throughout themeasurement.
2.11. Statistical analysis
Statistical analysis was performed using Minitab version 14
software (Minitab Inc., State College, PA, USA). Analysis of variance
(ANOVA) was applied to determine significant difference at
p < 0.05.
3. Results and discussion
3.1. Pectin yield
The optimum extraction conditions (temperature: 73 C, time:
67 min, pH 2.03) were obtained from a preliminary optimisation
Table 1
The matrix of central composite design and the experimental data obtained for the
response variable (yield, %) using the fresh inner layer of peel (IPF).
Run order Blocks Temperature (C) Time (min) pH Yield (%)
1a 3 67.5 95 3.25 13.9
2 3 67.5 95 4.47 4.9
3 3 38.9 95 3.25 9.3
4 3 96.0 95 3.25 18.8
5 3 73.0 67 2.03 26.4
6 3 67.5 185 3.25 13.4
7a 3 67.5 95 3.25 14.2
8 3 67.5 5.2 3.25 7.2
9a 2 67.5 95 3.25 14.5
10 2 50.0 150 2.50 23.3
11a 2 67.5 95 3.25 13.2
12 2 85.0 150 4.00 6.0
13 2 50.0 40 4.00 5.6
14 2 85.0 40 2.50 21.8
15a 1 67.5 95 3.25 14.0
16 1 85.0 40 4.00 6.8
17 1 50.0 150 4.00 6.4
18 1 50.0 40 2.50 20.7
19 1 85.0 150 2.50 24.5
20a 1 67.5 95 3.25 14.3
a Centre point.
Fig. 1. Response surface plot showing the significant (p < 0.05) interaction effect of
time (min) and pH on fresh inner layer of peel (IPF) pectin yield (%).
Table 2
Moisture content (%) of dragon fruit peel fractions and the pectin yield (%).
Samplea Moisture (%) Pectin yield (% dry weight)
WPD 7.15b 0.07 15.00b 0.48
WPF 89.94c 0.12 14.41b 0.79
IPD 7.58d 0.08 7.99c 0.92
IPF 91.68e 0.07 26.38d 0.47
Data are expressed as means standard deviations of triplicate analysis.
bee Means followed by different superscript lowercase letters indicate significant
differences (p < 0.05) within column by Tukey’s HSD test.
a WPD: whole peel (dried); WPF: whole peel (fresh); IPD: inner layer of peel
(dried); IPF: inner layer of peel (fresh
Sample was mounted onto a scanning electron microscope
(SEM) specimen stub with a carbon double-sided tape prior to
coating. Sample was coated with gold using a Bal-Tec SCD 005
sputter coater (Bal-Tec AG, Liechtenstein) and subsequently photographed
using a Leo 1455 variable pressure SEM (Germany)
at 25 and 100 magnifications.
2.8. Homogeneity and molecular weight determination using size
exclusion chromatography
The molecular weight determination by laser light scattering was
measured using the method described by Corredig, Kerr, andWicker
(2000). Dragon fruit peel, apple and citrus pectins were analysed using
high performance size exclusion chromatography (HPSEC)
coupledwithaDawnHeleosmultiangle laser light-scattering (MALLS)
detector (Wyatt Technology, USA) and a Optilab reX differential
refractometer (RI) which operated at 633 nm at a constant temperature,
25 C. The pectin solutions (1.5 mg/mL) were solubilised under
magnetic stirring, then filtered through a 0.45 mm membrane filter
(Milipore Co., Milford, USA) and manually injected through a 100 mL
loop. One PL aquagel-OH MIXED-H 8 mm column (Agilent Technologies,
USA) was used. Elution was carried out at a flow rate of 0.6 mL/
min with 0.1 M sodium nitrite (NaNO2) solution containing 0.5 g/L
sodium azide (NaN3) as a bactericide at 25 C.Monodisperse dextran
standards with molecular weights 25, 60 and 500 kDa were used to
check the performance of the HPSEC-MALLS system. Molecular
weight parameters were calculated using the Astra software.
2.9. Determination of monosaccharide composition
Monosaccharide composition of dragon fruit peel pectin was
determined using the method described by Dai et al. (2010) using
high performance liquid chromatography (HPLC). The pectin (3 mg/
mL) was dissolved in distilled purified water. The pectin solution
(100 uL) was hydrolysed to monomers with 100 uL of 4 M trifluoroacetic
acid for 2 h in an oven at 100 C prior to derivatisation with 1-
phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP). Ten monosaccharides
(mannose, ribose, rhamnose, glucuronic acid, galacturonic acid,
glucose, galactose, xylose, arabinose, fucose) were separated using
ZORBAX Eclipse Plus-C18 HPLC column (250 mm length, 4.6 mm
internal diameter and 5 mmparticle size, Agilent Technologies, USA).
AWaters e2695 HPLC equipped with aWaters 2489 UV/Vis detector
was used. The HPLC conditions and mobile phase compositionwere
as described by Dai et al. (2010). An Empower2 software (Waters,
USA)was used to collect the data.Themonosaccharide concentration
in dragon fruit peel pectin was calculated by comparing integration
values of their peak areas to a calibrated standard curve.
2.10. Flow analysis
Dragon fruit peel, apple and citrus pectins dispersions with
different concentrations (0.5%,1%,2%and3%,w/v)were preparedwith
distilled deionised water. Flow behaviour of the dispersions was
determined using a rheometer (Rheostress 600, Karlsruhe, Germany).
Measurements were performed with a 35 mm in diameter serrated
parallel plate geometry (PP35Ti). The shear rate was increased from
0 to 400 s1 using the software control (Monsoor, 2005). The temperaturewasmaintained
at 250.1 C throughout themeasurement.
2.11. Statistical analysis
Statistical analysis was performed using Minitab version 14
software (Minitab Inc., State College, PA, USA). Analysis of variance
(ANOVA) was applied to determine significant difference at
p < 0.05.
3. Results and discussion
3.1. Pectin yield
The optimum extraction conditions (temperature: 73 C, time:
67 min, pH 2.03) were obtained from a preliminary optimisation
Table 1
The matrix of central composite design and the experimental data obtained for the
response variable (yield, %) using the fresh inner layer of peel (IPF).
Run order Blocks Temperature (C) Time (min) pH Yield (%)
1a 3 67.5 95 3.25 13.9
2 3 67.5 95 4.47 4.9
3 3 38.9 95 3.25 9.3
4 3 96.0 95 3.25 18.8
5 3 73.0 67 2.03 26.4
6 3 67.5 185 3.25 13.4
7a 3 67.5 95 3.25 14.2
8 3 67.5 5.2 3.25 7.2
9a 2 67.5 95 3.25 14.5
10 2 50.0 150 2.50 23.3
11a 2 67.5 95 3.25 13.2
12 2 85.0 150 4.00 6.0
13 2 50.0 40 4.00 5.6
14 2 85.0 40 2.50 21.8
15a 1 67.5 95 3.25 14.0
16 1 85.0 40 4.00 6.8
17 1 50.0 150 4.00 6.4
18 1 50.0 40 2.50 20.7
19 1 85.0 150 2.50 24.5
20a 1 67.5 95 3.25 14.3
a Centre point.
Fig. 1. Response surface plot showing the significant (p < 0.05) interaction effect of
time (min) and pH on fresh inner layer of peel (IPF) pectin yield (%).
Table 2
Moisture content (%) of dragon fruit peel fractions and the pectin yield (%).
Samplea Moisture (%) Pectin yield (% dry weight)
WPD 7.15b 0.07 15.00b 0.48
WPF 89.94c 0.12 14.41b 0.79
IPD 7.58d 0.08 7.99c 0.92
IPF 91.68e 0.07 26.38d 0.47
Data are expressed as means standard deviations of triplicate analysis.
bee Means followed by different superscript lowercase letters indicate significant
differences (p < 0.05) within column by Tukey’s HSD test.
a WPD: whole peel (dried); WPF: whole peel (fresh); IPD: inner layer of peel
(dried); IPF: inner layer of peel (fresh
0/5000
2.7 วิเคราะห์สัณฐานวิทยาผิวตัวอย่างติดตั้งลงในกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนการสแกนขั้วตัวอย่าง (SEM) มีคาร์บอนสองเทปก่อนเคลือบ ตัวอย่างถูกเคลือบ ด้วยทองที่ใช้เป็นดุล-Tec SCD 005sputter coater (AG ดุล-Tec ลิกเตนสไตน์) และถ่ายภาพในเวลาต่อมาใช้ความดันแปร 1455 นั่นเองลีโอ SEM (เยอรมนี)ในขนาด 25 และ 1002.8 ใช้ขนาดกำหนด homogeneity และน้ำหนักโมเลกุลแยก chromatographyกำหนดน้ำหนักโมเลกุล ด้วยแสงเลเซอร์ไปกระทบถูกวัดโดยใช้วิธีการอธิบาย โดยเคอร์ andWicker, Corredig(2000) เปลือกผลไม้มังกร แอปเปิ้ล และส้ม pectins ได้ analysed ใช้ประสิทธิภาพสูงขนาดแยก chromatography (HPSEC)coupledwithaDawnHeleosmultiangle เลเซอร์แสง-scattering (ห้างสรรพสินค้า)เครื่องตรวจจับ (Wyatt เทคโนโลยี สหรัฐอเมริกา) และแตกต่างกัน Optilab reXrefractometer (RI) ที่ดำเนินการ ณ 633 nm ที่อุณหภูมิคงค. 25 โซลูชั่นเพกทิน (1.5 mg/mL) solubilised ภายใต้แม่เหล็กกวน แล้ว กรองผ่านเยื่อกรอง 0.45 มม.(Milipore Co. ลฟอร์ด สหรัฐอเมริกา) และฉีดด้วยตนเองผ่าน 100 มลวน หนึ่ง PL aquagel OH ผสม-คอลัมน์ H 8 มม. (Agilent เทคโนโลยีใช้สหรัฐอเมริกา) Elution ถูกดำเนินการที่อัตราการไหลของ 0.6 mL /นาที ด้วย 0.1 M โซเดียมไนไตรต์ (NaNO2) โซลูชันประกอบด้วย 0.5 g/Lโซเดียม azide (NaN3) เป็น bactericide ที่ 25 C.Monodisperse เดกซ์แทรนมาตรฐาน มีน้ำหนักโมเลกุล 25, 500 และ 60 kDa ถูกใช้ในการตรวจสอบประสิทธิภาพของระบบห้างสรรพสินค้า HPSEC โมเลกุลมีคำนวณน้ำหนักพารามิเตอร์ใช้ซอฟต์แวร์ Astra2.9 การกำหนดองค์ประกอบ monosaccharideบทประพันธ์ monosaccharide ของเพกทินเปลือกผลไม้มังกรกำหนดโดยใช้วิธีอธิบายโดยไดเอ็ด al. (2010)ประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) เพกทิน (3 มิลลิกรัม /mL) ที่ละลายในน้ำกลั่นบริสุทธิ์ โซลูชั่นเพกทิน(100 uL) ถูก hydrolysed เพื่อ monomers กับ uL 100 ของ trifluoroacetic 4 Mกรดสำหรับ h ในเตาอบที่ 100 C ก่อน derivatisation มี 1 - 2phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP) Monosaccharides สิบ(mannose, ribose, rhamnose กรด glucuronic, galacturonic กรดกลูโคส กาแล็กโทส xylose, arabinose, fucose) ถูกแยกออกโดยใช้คอลัมน์ HPLC บวก C18 คราส ZORBAX (ความยาว 250 มม. 4.6 มม.เส้นผ่าศูนย์กลางภายในและ 5 mmparticle ขนาด Agilent เทคโนโลยี สหรัฐอเมริกา)AWaters e2695 HPLC พร้อม aWaters เครื่องตรวจจับ UV/Vis 2489ใช้ เงื่อนไข HPLC และระยะเคลื่อน compositionwereตามที่อธิบายไว้โดยไดเอ็ด al. (2010) ซอฟแวร์ Empower2 (น้ำสหรัฐอเมริกา) ถูกใช้เพื่อเก็บรวบรวมข้อมูลความเข้มข้น Themonosaccharideในมังกร เพกทินเปลือกถูกคำนวณ โดยการเปรียบเทียบการรวมค่าของพื้นที่สูงสุดของเส้นโค้งมาตรฐาน calibrated2.10 การกระแสเปลือกผลไม้มังกร แอปเปิ้ล และส้ม pectins dispersions ด้วยความเข้มข้นแตกต่างกัน (0.5%,1%,2%and3%,w/v)were preparedwithกลั่นน้ำ deionised พฤติกรรมการไหลของ dispersions ที่ถูกกำหนดใช้เป็นลารี่รีโอม (Rheostress 600 คาร์ลส์รูเออ เยอรมนี)ดำเนินการประเมินกับ 35 มม.เส้นผ่านศูนย์กลาง serratedแผ่นขนานเรขาคณิต (PP35Ti) เพิ่มขึ้นจากอัตราเฉือน0-400 s 1 ใช้ซอฟต์แวร์ควบคุม (Monsoor, 2005) Temperaturewasmaintainedที่ 0.1 25 C ตลอด themeasurement2.11. สถิติวิเคราะห์ทำการวิเคราะห์ทางสถิติโดยใช้ปัจจัยรุ่น 14ซอฟต์แวร์ (ปัจจัย Inc. วิทยาลัยรัฐ PA สหรัฐอเมริกา) วิเคราะห์ผลต่างของ(การวิเคราะห์ความแปรปรวน) ถูกใช้เพื่อกำหนดความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญที่p < 0.053. ผลลัพธ์ และสนทนา3.1. ผลตอบแทนเพกทินเงื่อนไขการสกัดที่เหมาะสม (อุณหภูมิ: เวลา 73 C:นาที 67, pH 2.03) ได้รับมาจากคุณภาพเบื้องต้นตารางที่ 1เมตริกซ์ของกลางออกแบบคอมโพสิตและข้อมูลทดลองได้ตัวแปรตอบสนอง (ผลผลิต %) โดยใช้ชั้นในสดของเปลือก (IPF)สั่งรันค่า pH อุณหภูมิบล็อก (C) เวลา (นาที) ผลผลิต (%)1a 3 67.5 95 3.25 13.92 3 67.5 95 4.47 4.93 3 38.9 95 3.25 9.34 3 96.0 95 3.25 18.85 3 73.0 67 2.03 26.46 3 67.5 185 3.25 13.47a 3 67.5 95 3.25 14.28 3 67.5 5.2 3.25 7.29a 2 67.5 95 3.25 14.510 2 50.0 150 2.50 23.311a 2 67.5 95 3.25 13.212 2 85.0 150 4.00 6.013 2 50.0 40 4.00 5.614 2 85.0 40 2.50 21.815a 1 67.5 95 3.25 14.016 1 85.0 40 4.00 6.817 1 50.0 150 4.00 6.418 1 50.0 40 2.50 20.719 1 85.0 150 2.50 24.520a 1 67.5 95 3.25 14.3จุดศูนย์กลางFig. 1 แปลงพื้นผิวตอบสนองแสดงผลโต้ตอบ (p < 0.05) อย่างมีนัยสำคัญของเวลา (นาที) และค่า pH ในชั้นสดในของเปลือก (IPF) เพกทินผลตอบแทน (%)ตารางที่ 2ชื้น (%) ของมังกรลอกเศษและผลผลิตเพกทิน (%)Samplea ความชื้น (%) เพกทินอัตราผลตอบแทน (%น้ำหนักแห้ง)WPD 7.15b 0.07 15.00b 0.48WPF 89.94c 0.12 14.41b 0.79สองดี 7.58 0.08 0.92 7.99cIPF 91.68e 0.07 26.38 d 0.47ข้อมูลจะแสดงเป็นหมายถึง ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานการวิเคราะห์ triplicateหมายถึงผึ้งตาม ด้วยอักษรตัวพิมพ์เล็กตัวยกแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญบ่งชี้ความแตกต่าง (p < 0.05) ภายในโดยการทดสอบของ Tukey HSDWPD แบบ: เปลือกทั้งหมด (แห้ง); WPF: ทั้งเปลือก (สด), สอง: ชั้นในของเปลือก(แห้ง); IPF: ภายในชั้นของเปลือกสด
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.7. Surface morphology analysis
Sample was mounted onto a scanning electron microscope
(SEM) specimen stub with a carbon double-sided tape prior to
coating. Sample was coated with gold using a Bal-Tec SCD 005
sputter coater (Bal-Tec AG, Liechtenstein) and subsequently photographed
using a Leo 1455 variable pressure SEM (Germany)
at 25 and 100 magnifications.
2.8. Homogeneity and molecular weight determination using size
exclusion chromatography
The molecular weight determination by laser light scattering was
measured using the method described by Corredig, Kerr, andWicker
(2000). Dragon fruit peel, apple and citrus pectins were analysed using
high performance size exclusion chromatography (HPSEC)
coupledwithaDawnHeleosmultiangle laser light-scattering (MALLS)
detector (Wyatt Technology, USA) and a Optilab reX differential
refractometer (RI) which operated at 633 nm at a constant temperature,
25 C. The pectin solutions (1.5 mg/mL) were solubilised under
magnetic stirring, then filtered through a 0.45 mm membrane filter
(Milipore Co., Milford, USA) and manually injected through a 100 mL
loop. One PL aquagel-OH MIXED-H 8 mm column (Agilent Technologies,
USA) was used. Elution was carried out at a flow rate of 0.6 mL/
min with 0.1 M sodium nitrite (NaNO2) solution containing 0.5 g/L
sodium azide (NaN3) as a bactericide at 25 C.Monodisperse dextran
standards with molecular weights 25, 60 and 500 kDa were used to
check the performance of the HPSEC-MALLS system. Molecular
weight parameters were calculated using the Astra software.
2.9. Determination of monosaccharide composition
Monosaccharide composition of dragon fruit peel pectin was
determined using the method described by Dai et al. (2010) using
high performance liquid chromatography (HPLC). The pectin (3 mg/
mL) was dissolved in distilled purified water. The pectin solution
(100 uL) was hydrolysed to monomers with 100 uL of 4 M trifluoroacetic
acid for 2 h in an oven at 100 C prior to derivatisation with 1-
phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP). Ten monosaccharides
(mannose, ribose, rhamnose, glucuronic acid, galacturonic acid,
glucose, galactose, xylose, arabinose, fucose) were separated using
ZORBAX Eclipse Plus-C18 HPLC column (250 mm length, 4.6 mm
internal diameter and 5 mmparticle size, Agilent Technologies, USA).
AWaters e2695 HPLC equipped with aWaters 2489 UV/Vis detector
was used. The HPLC conditions and mobile phase compositionwere
as described by Dai et al. (2010). An Empower2 software (Waters,
USA)was used to collect the data.Themonosaccharide concentration
in dragon fruit peel pectin was calculated by comparing integration
values of their peak areas to a calibrated standard curve.
2.10. Flow analysis
Dragon fruit peel, apple and citrus pectins dispersions with
different concentrations (0.5%,1%,2%and3%,w/v)were preparedwith
distilled deionised water. Flow behaviour of the dispersions was
determined using a rheometer (Rheostress 600, Karlsruhe, Germany).
Measurements were performed with a 35 mm in diameter serrated
parallel plate geometry (PP35Ti). The shear rate was increased from
0 to 400 s1 using the software control (Monsoor, 2005). The temperaturewasmaintained
at 250.1 C throughout themeasurement.
2.11. Statistical analysis
Statistical analysis was performed using Minitab version 14
software (Minitab Inc., State College, PA, USA). Analysis of variance
(ANOVA) was applied to determine significant difference at
p < 0.05.
3. Results and discussion
3.1. Pectin yield
The optimum extraction conditions (temperature: 73 C, time:
67 min, pH 2.03) were obtained from a preliminary optimisation
Table 1
The matrix of central composite design and the experimental data obtained for the
response variable (yield, %) using the fresh inner layer of peel (IPF).
Run order Blocks Temperature (C) Time (min) pH Yield (%)
1a 3 67.5 95 3.25 13.9
2 3 67.5 95 4.47 4.9
3 3 38.9 95 3.25 9.3
4 3 96.0 95 3.25 18.8
5 3 73.0 67 2.03 26.4
6 3 67.5 185 3.25 13.4
7a 3 67.5 95 3.25 14.2
8 3 67.5 5.2 3.25 7.2
9a 2 67.5 95 3.25 14.5
10 2 50.0 150 2.50 23.3
11a 2 67.5 95 3.25 13.2
12 2 85.0 150 4.00 6.0
13 2 50.0 40 4.00 5.6
14 2 85.0 40 2.50 21.8
15a 1 67.5 95 3.25 14.0
16 1 85.0 40 4.00 6.8
17 1 50.0 150 4.00 6.4
18 1 50.0 40 2.50 20.7
19 1 85.0 150 2.50 24.5
20a 1 67.5 95 3.25 14.3
a Centre point.
Fig. 1. Response surface plot showing the significant (p < 0.05) interaction effect of
time (min) and pH on fresh inner layer of peel (IPF) pectin yield (%).
Table 2
Moisture content (%) of dragon fruit peel fractions and the pectin yield (%).
Samplea Moisture (%) Pectin yield (% dry weight)
WPD 7.15b 0.07 15.00b 0.48
WPF 89.94c 0.12 14.41b 0.79
IPD 7.58d 0.08 7.99c 0.92
IPF 91.68e 0.07 26.38d 0.47
Data are expressed as means standard deviations of triplicate analysis.
bee Means followed by different superscript lowercase letters indicate significant
differences (p < 0.05) within column by Tukey’s HSD test.
a WPD: whole peel (dried); WPF: whole peel (fresh); IPD: inner layer of peel
(dried); IPF: inner layer of peel (fresh
Sample was mounted onto a scanning electron microscope
(SEM) specimen stub with a carbon double-sided tape prior to
coating. Sample was coated with gold using a Bal-Tec SCD 005
sputter coater (Bal-Tec AG, Liechtenstein) and subsequently photographed
using a Leo 1455 variable pressure SEM (Germany)
at 25 and 100 magnifications.
2.8. Homogeneity and molecular weight determination using size
exclusion chromatography
The molecular weight determination by laser light scattering was
measured using the method described by Corredig, Kerr, andWicker
(2000). Dragon fruit peel, apple and citrus pectins were analysed using
high performance size exclusion chromatography (HPSEC)
coupledwithaDawnHeleosmultiangle laser light-scattering (MALLS)
detector (Wyatt Technology, USA) and a Optilab reX differential
refractometer (RI) which operated at 633 nm at a constant temperature,
25 C. The pectin solutions (1.5 mg/mL) were solubilised under
magnetic stirring, then filtered through a 0.45 mm membrane filter
(Milipore Co., Milford, USA) and manually injected through a 100 mL
loop. One PL aquagel-OH MIXED-H 8 mm column (Agilent Technologies,
USA) was used. Elution was carried out at a flow rate of 0.6 mL/
min with 0.1 M sodium nitrite (NaNO2) solution containing 0.5 g/L
sodium azide (NaN3) as a bactericide at 25 C.Monodisperse dextran
standards with molecular weights 25, 60 and 500 kDa were used to
check the performance of the HPSEC-MALLS system. Molecular
weight parameters were calculated using the Astra software.
2.9. Determination of monosaccharide composition
Monosaccharide composition of dragon fruit peel pectin was
determined using the method described by Dai et al. (2010) using
high performance liquid chromatography (HPLC). The pectin (3 mg/
mL) was dissolved in distilled purified water. The pectin solution
(100 uL) was hydrolysed to monomers with 100 uL of 4 M trifluoroacetic
acid for 2 h in an oven at 100 C prior to derivatisation with 1-
phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP). Ten monosaccharides
(mannose, ribose, rhamnose, glucuronic acid, galacturonic acid,
glucose, galactose, xylose, arabinose, fucose) were separated using
ZORBAX Eclipse Plus-C18 HPLC column (250 mm length, 4.6 mm
internal diameter and 5 mmparticle size, Agilent Technologies, USA).
AWaters e2695 HPLC equipped with aWaters 2489 UV/Vis detector
was used. The HPLC conditions and mobile phase compositionwere
as described by Dai et al. (2010). An Empower2 software (Waters,
USA)was used to collect the data.Themonosaccharide concentration
in dragon fruit peel pectin was calculated by comparing integration
values of their peak areas to a calibrated standard curve.
2.10. Flow analysis
Dragon fruit peel, apple and citrus pectins dispersions with
different concentrations (0.5%,1%,2%and3%,w/v)were preparedwith
distilled deionised water. Flow behaviour of the dispersions was
determined using a rheometer (Rheostress 600, Karlsruhe, Germany).
Measurements were performed with a 35 mm in diameter serrated
parallel plate geometry (PP35Ti). The shear rate was increased from
0 to 400 s1 using the software control (Monsoor, 2005). The temperaturewasmaintained
at 250.1 C throughout themeasurement.
2.11. Statistical analysis
Statistical analysis was performed using Minitab version 14
software (Minitab Inc., State College, PA, USA). Analysis of variance
(ANOVA) was applied to determine significant difference at
p < 0.05.
3. Results and discussion
3.1. Pectin yield
The optimum extraction conditions (temperature: 73 C, time:
67 min, pH 2.03) were obtained from a preliminary optimisation
Table 1
The matrix of central composite design and the experimental data obtained for the
response variable (yield, %) using the fresh inner layer of peel (IPF).
Run order Blocks Temperature (C) Time (min) pH Yield (%)
1a 3 67.5 95 3.25 13.9
2 3 67.5 95 4.47 4.9
3 3 38.9 95 3.25 9.3
4 3 96.0 95 3.25 18.8
5 3 73.0 67 2.03 26.4
6 3 67.5 185 3.25 13.4
7a 3 67.5 95 3.25 14.2
8 3 67.5 5.2 3.25 7.2
9a 2 67.5 95 3.25 14.5
10 2 50.0 150 2.50 23.3
11a 2 67.5 95 3.25 13.2
12 2 85.0 150 4.00 6.0
13 2 50.0 40 4.00 5.6
14 2 85.0 40 2.50 21.8
15a 1 67.5 95 3.25 14.0
16 1 85.0 40 4.00 6.8
17 1 50.0 150 4.00 6.4
18 1 50.0 40 2.50 20.7
19 1 85.0 150 2.50 24.5
20a 1 67.5 95 3.25 14.3
a Centre point.
Fig. 1. Response surface plot showing the significant (p < 0.05) interaction effect of
time (min) and pH on fresh inner layer of peel (IPF) pectin yield (%).
Table 2
Moisture content (%) of dragon fruit peel fractions and the pectin yield (%).
Samplea Moisture (%) Pectin yield (% dry weight)
WPD 7.15b 0.07 15.00b 0.48
WPF 89.94c 0.12 14.41b 0.79
IPD 7.58d 0.08 7.99c 0.92
IPF 91.68e 0.07 26.38d 0.47
Data are expressed as means standard deviations of triplicate analysis.
bee Means followed by different superscript lowercase letters indicate significant
differences (p < 0.05) within column by Tukey’s HSD test.
a WPD: whole peel (dried); WPF: whole peel (fresh); IPD: inner layer of peel
(dried); IPF: inner layer of peel (fresh
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.7 .
ตัวอย่างการวิเคราะห์พื้นผิวติดตั้งบนสแกน
กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ( SEM ) ตัวอย่างต้นขั้วกับคาร์บอนเทปสองก่อน
เคลือบ วัตถุประสงค์เคลือบด้วยทองใช้บัล TEC SCD 005
ละล่ำละลักเครื่องเคลือบ ( Bal เทค เอจี ลิกเตนสไตน์ ) และต่อมาถ่ายภาพ
ใช้ลีโอฉันไม่แปรแรงดัน SEM ( เยอรมนี )
ที่ 25 และ 100 magnifications .
2.8 .ความสม่ำเสมอและการหาน้ำหนักโมเลกุลโดยใช้โครมาโตกราฟีการหาขนาด
ยกเว้นน้ำหนักโมเลกุลโดยเลเซอร์แสงกระจายเป็น
วัดใช้วิธีอธิบายโดย corredig เคอร์ , andwicker
( 2000 ) มังกรเปลือกผลแอปเปิ้ลและส้มเพกทินวิเคราะห์โดยใช้โครมาโทกราฟีสมรรถนะสูงขนาดบ้าง
( hpsec )coupledwithadawnheleosmultiangle เลเซอร์แสงกระจาย ( ห้างสรรพสินค้า )
ตรวจจับ ( สหรัฐอเมริกาไว เทคโนโลยี ) และ Refractometer ค่า
optilab เร็กซ์ ( ริ ) ซึ่งดำเนินการ 633 nm ที่อุณหภูมิคงที่
25 C เพคติน โซลูชั่น ( 1.5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร solubilised ภายใต้
แม่เหล็กกวนแล้วกรองผ่านเยื่อกรอง
0.45 มม. ( milipore Co . , ฟอร์ด , USA ) และตนเองฉีดผ่าน 100 ml
วง คอลัมน์หนึ่งคุณ aquagel โอ้ mixed-h 8 มม. ( Agilent Technologies ,
USA ) ใช้ ได้มาดำเนินการที่อัตราการไหล 0.6 มิลลิลิตร /
มินกับ 0.1 โมลาร์โซเดียมไนไตรท์ ( nano2 ) สารละลายที่มีโซเดียม 0.5 g / l
ไซด์ ( nan3 ) เป็น bactericide 25 c.monodisperse dextran
มาตรฐานที่มีน้ำหนักโมเลกุล 30 , 60 และ 500 ดาลตันใช้
hpsec-malls ตรวจสอบประสิทธิภาพของระบบ . โมเลกุล
พารามิเตอร์ของน้ำหนัก คำนวณโดยใช้ Astra ซอฟแวร์ .
2.9 . การกำหนดสื่อองค์ประกอบ
โมโนแซ็กคาไรด์องค์ประกอบของแก้วมังกรเปลือกเพคตินคือ
ตัดสินใจใช้วิธีอธิบายโดยได et al . ( 2010 ) โดยใช้
วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC ) เพคติน ( 3 มก. /
มิลลิลิตร ) ละลายในน้ำกลั่นบริสุทธิ์ โซลูชั่น
เพคติน( 100 UL ) คือน้ำตาลกับมอนอเมอร์ 100 UL 4 m
2 H trifluoroacetic กรดในเตาอบที่อุณหภูมิ 100 C ก่อน derivatisation 1 -
phenyl-3-methyl-5-pyrazolone ( PMP ) สิบโมโนแซ็กคาไรด์
( แมนหน้าตัวเมีย rhamnose glucuronic , , กรด , กรดกาแลค
, กลูโคส , galactose , ไซโลส , น้ำตาล arabinose , ฟูโคส ) แยกใช้
zorbax คราส plus-c18 HPLC คอลัมน์ ( 250 มม. ความยาว 4.6 mm
เส้นผ่าศูนย์กลางภายใน และ 5 mmparticle ขนาด Agilent Technologies , USA ) .
awaters e2695 HPLC พร้อมกับ awaters 2489 UV / VIS ตรวจจับ
ถูกใช้ พบเงื่อนไขและเฟสเคลื่อนที่ compositionwere
ตามที่อธิบายไว้โดยได et al . ( 2010 ) การ empower2 ซอฟต์แวร์ ( น้ำ
USA ) เป็นเครื่องมือในการเก็บรวบรวมข้อมูล themonosaccharide สมาธิ
ในแก้วมังกรเปลือกส้มได้คำนวณเปรียบเทียบการรวม
ค่าของพื้นที่สูงสุดของพวกเขาเพื่อปรับมาตรฐานโค้ง .
2.10 . การไหลของมังกรผลไม้เปลือกส้มและการวิเคราะห์
, แอปเปิ้ลเพคตินความแข็ง
ความเข้มข้นต่างกัน ( 0.5% , 1% , 2% และ % w / v )
deionised preparedwith กลั่นน้ำ พฤติกรรมการไหลของการกระจายคือ
กำหนดโดยใช้ระบบ ( rheostress 600 , Karlsruhe , เยอรมนี ) .
วัดได้กับ 35 มม. หยัก
เรขาคณิตแผ่นขนาน ( pp35ti ) เฉือนคะแนนเพิ่มขึ้นจาก
0 400 S 1 โดยใช้ซอฟต์แวร์ควบคุม ( monsoor , 2005 ) การ temperaturewasmaintained
ที่ 25 0.1 ตลอดโดย C .
2.11 . สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูล สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ใช้โปรแกรม
รุ่น 14 ซอฟต์แวร์ ( โปรแกรม ) วิทยาลัยรัฐ , PA , USA ) การวิเคราะห์ความแปรปรวน
( 4 ) ถูกนำมาใช้เพื่อกำหนดระดับความมีนัยสำคัญทางสถิติที่ p < 0.05
.
3 ผลและการอภิปราย
3.1 . การสกัดเพคติน
ผลผลิตที่เหมาะสม ( อุณหภูมิ : 73 C เวลา :
67 นาที , พีเอช 2.03 ) ที่ได้จากตารางที่ 1
เพิ่มประสิทธิภาพเบื้องต้นเมทริกซ์การออกแบบคอมโพสิตกลางและข้อมูลที่ได้รับเพื่อการตอบสนองตัวแปร
( ผลผลิต , % ) ใช้ชั้นในสดของเปลือก ( IPF ) .
เรียกใช้คำสั่งบล็อกอุณหภูมิ ( C ) เวลา ( นาที ) pH ผลตอบแทน ( % )
8 3 67.5 95 3.25 13.9
2 3 67.5 95 4.47 4.9
3
4 3 38.9 95 3.25 9.3 96.0 95 3.25 18.8
5 3 73.0 67 2.03 26.4
6 3 67.5 185 3.25 13.4
0 3 67.5 95 3.25 14.2
8 3 67.5 5.2 3.25 7.2
9A 2 67.5 95 3.25 14.5
10 2 : 150 2.50 23.3
11A 2 67.5 95 3.25 13.2
12 2 85.0 150 16.00 6.0
13 2 : 40 - 5.6
14 2 85.0 40 2.50 21.8
15A 1 67.5 95 3.25 14.0
16 1 85.0 40 4.00 6.8
17 1 : 150 - 6.4
18 1 : 40 2.50 20.7
19 1 85.0 150 2.50 24.5
20A 1 67.5 95 3.25 14.3
ศูนย์จุด รูปที่ 1 พื้นผิวพล็อตแสดงการตอบสนองอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( p < 0.05 ) ปฏิสัมพันธ์ของ
เวลา ( นาที ) และค่า pH ในผิวชั้นในสด ( IPF ) ปริมาณเพคติน ( % ) 2
.
ตารางความชื้น ( % ) ของมังกรผลไม้เปลือก เศษส่วน และเพคตินผล (
% )samplea ความชื้น ( % ) ผลผลิตน้ำหนักแห้งของเพกติน ( % )
wpd 7.15b 0.07 15.00b 0.48
WPF 89.94c 0.12 14.41b 0.79
3 7.58d 0.08 7.99c 0.92
12 91.68e 0.07 26.38d 0.47
ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน การวิเคราะห์ ทำสำเนาสามฉบับ .
ผึ้งหมายถึง ตามด้วยตัวยกต่าง ตัวอักษรตัวพิมพ์เล็กแสดงความแตกต่าง
( P < 0.05 ) ในคอลัมน์โดยทดสอบดำเนินการทดสอบ .
เป็น wpd :ทั้งเปลือก ( แห้ง ) ; WPF : ทั้งเปลือก ( สด ) ; 3 : ชั้นด้านในของเปลือก
( แห้ง ) ; 12 : ชั้นด้านในของเปลือก ( สด
ตัวอย่างการวิเคราะห์พื้นผิวติดตั้งบนสแกน
กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ( SEM ) ตัวอย่างต้นขั้วกับคาร์บอนเทปสองก่อน
เคลือบ วัตถุประสงค์เคลือบด้วยทองใช้บัล TEC SCD 005
ละล่ำละลักเครื่องเคลือบ ( Bal เทค เอจี ลิกเตนสไตน์ ) และต่อมาถ่ายภาพ
ใช้ลีโอฉันไม่แปรแรงดัน SEM ( เยอรมนี )
ที่ 25 และ 100 magnifications .
2.8 .ความสม่ำเสมอและการหาน้ำหนักโมเลกุลโดยใช้โครมาโตกราฟีการหาขนาด
ยกเว้นน้ำหนักโมเลกุลโดยเลเซอร์แสงกระจายเป็น
วัดใช้วิธีอธิบายโดย corredig เคอร์ , andwicker
( 2000 ) มังกรเปลือกผลแอปเปิ้ลและส้มเพกทินวิเคราะห์โดยใช้โครมาโทกราฟีสมรรถนะสูงขนาดบ้าง
( hpsec )coupledwithadawnheleosmultiangle เลเซอร์แสงกระจาย ( ห้างสรรพสินค้า )
ตรวจจับ ( สหรัฐอเมริกาไว เทคโนโลยี ) และ Refractometer ค่า
optilab เร็กซ์ ( ริ ) ซึ่งดำเนินการ 633 nm ที่อุณหภูมิคงที่
25 C เพคติน โซลูชั่น ( 1.5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร solubilised ภายใต้
แม่เหล็กกวนแล้วกรองผ่านเยื่อกรอง
0.45 มม. ( milipore Co . , ฟอร์ด , USA ) และตนเองฉีดผ่าน 100 ml
วง คอลัมน์หนึ่งคุณ aquagel โอ้ mixed-h 8 มม. ( Agilent Technologies ,
USA ) ใช้ ได้มาดำเนินการที่อัตราการไหล 0.6 มิลลิลิตร /
มินกับ 0.1 โมลาร์โซเดียมไนไตรท์ ( nano2 ) สารละลายที่มีโซเดียม 0.5 g / l
ไซด์ ( nan3 ) เป็น bactericide 25 c.monodisperse dextran
มาตรฐานที่มีน้ำหนักโมเลกุล 30 , 60 และ 500 ดาลตันใช้
hpsec-malls ตรวจสอบประสิทธิภาพของระบบ . โมเลกุล
พารามิเตอร์ของน้ำหนัก คำนวณโดยใช้ Astra ซอฟแวร์ .
2.9 . การกำหนดสื่อองค์ประกอบ
โมโนแซ็กคาไรด์องค์ประกอบของแก้วมังกรเปลือกเพคตินคือ
ตัดสินใจใช้วิธีอธิบายโดยได et al . ( 2010 ) โดยใช้
วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC ) เพคติน ( 3 มก. /
มิลลิลิตร ) ละลายในน้ำกลั่นบริสุทธิ์ โซลูชั่น
เพคติน( 100 UL ) คือน้ำตาลกับมอนอเมอร์ 100 UL 4 m
2 H trifluoroacetic กรดในเตาอบที่อุณหภูมิ 100 C ก่อน derivatisation 1 -
phenyl-3-methyl-5-pyrazolone ( PMP ) สิบโมโนแซ็กคาไรด์
( แมนหน้าตัวเมีย rhamnose glucuronic , , กรด , กรดกาแลค
, กลูโคส , galactose , ไซโลส , น้ำตาล arabinose , ฟูโคส ) แยกใช้
zorbax คราส plus-c18 HPLC คอลัมน์ ( 250 มม. ความยาว 4.6 mm
เส้นผ่าศูนย์กลางภายใน และ 5 mmparticle ขนาด Agilent Technologies , USA ) .
awaters e2695 HPLC พร้อมกับ awaters 2489 UV / VIS ตรวจจับ
ถูกใช้ พบเงื่อนไขและเฟสเคลื่อนที่ compositionwere
ตามที่อธิบายไว้โดยได et al . ( 2010 ) การ empower2 ซอฟต์แวร์ ( น้ำ
USA ) เป็นเครื่องมือในการเก็บรวบรวมข้อมูล themonosaccharide สมาธิ
ในแก้วมังกรเปลือกส้มได้คำนวณเปรียบเทียบการรวม
ค่าของพื้นที่สูงสุดของพวกเขาเพื่อปรับมาตรฐานโค้ง .
2.10 . การไหลของมังกรผลไม้เปลือกส้มและการวิเคราะห์
, แอปเปิ้ลเพคตินความแข็ง
ความเข้มข้นต่างกัน ( 0.5% , 1% , 2% และ % w / v )
deionised preparedwith กลั่นน้ำ พฤติกรรมการไหลของการกระจายคือ
กำหนดโดยใช้ระบบ ( rheostress 600 , Karlsruhe , เยอรมนี ) .
วัดได้กับ 35 มม. หยัก
เรขาคณิตแผ่นขนาน ( pp35ti ) เฉือนคะแนนเพิ่มขึ้นจาก
0 400 S 1 โดยใช้ซอฟต์แวร์ควบคุม ( monsoor , 2005 ) การ temperaturewasmaintained
ที่ 25 0.1 ตลอดโดย C .
2.11 . สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูล สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ใช้โปรแกรม
รุ่น 14 ซอฟต์แวร์ ( โปรแกรม ) วิทยาลัยรัฐ , PA , USA ) การวิเคราะห์ความแปรปรวน
( 4 ) ถูกนำมาใช้เพื่อกำหนดระดับความมีนัยสำคัญทางสถิติที่ p < 0.05
.
3 ผลและการอภิปราย
3.1 . การสกัดเพคติน
ผลผลิตที่เหมาะสม ( อุณหภูมิ : 73 C เวลา :
67 นาที , พีเอช 2.03 ) ที่ได้จากตารางที่ 1
เพิ่มประสิทธิภาพเบื้องต้นเมทริกซ์การออกแบบคอมโพสิตกลางและข้อมูลที่ได้รับเพื่อการตอบสนองตัวแปร
( ผลผลิต , % ) ใช้ชั้นในสดของเปลือก ( IPF ) .
เรียกใช้คำสั่งบล็อกอุณหภูมิ ( C ) เวลา ( นาที ) pH ผลตอบแทน ( % )
8 3 67.5 95 3.25 13.9
2 3 67.5 95 4.47 4.9
3
4 3 38.9 95 3.25 9.3 96.0 95 3.25 18.8
5 3 73.0 67 2.03 26.4
6 3 67.5 185 3.25 13.4
0 3 67.5 95 3.25 14.2
8 3 67.5 5.2 3.25 7.2
9A 2 67.5 95 3.25 14.5
10 2 : 150 2.50 23.3
11A 2 67.5 95 3.25 13.2
12 2 85.0 150 16.00 6.0
13 2 : 40 - 5.6
14 2 85.0 40 2.50 21.8
15A 1 67.5 95 3.25 14.0
16 1 85.0 40 4.00 6.8
17 1 : 150 - 6.4
18 1 : 40 2.50 20.7
19 1 85.0 150 2.50 24.5
20A 1 67.5 95 3.25 14.3
ศูนย์จุด รูปที่ 1 พื้นผิวพล็อตแสดงการตอบสนองอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( p < 0.05 ) ปฏิสัมพันธ์ของ
เวลา ( นาที ) และค่า pH ในผิวชั้นในสด ( IPF ) ปริมาณเพคติน ( % ) 2
.
ตารางความชื้น ( % ) ของมังกรผลไม้เปลือก เศษส่วน และเพคตินผล (
% )samplea ความชื้น ( % ) ผลผลิตน้ำหนักแห้งของเพกติน ( % )
wpd 7.15b 0.07 15.00b 0.48
WPF 89.94c 0.12 14.41b 0.79
3 7.58d 0.08 7.99c 0.92
12 91.68e 0.07 26.38d 0.47
ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน การวิเคราะห์ ทำสำเนาสามฉบับ .
ผึ้งหมายถึง ตามด้วยตัวยกต่าง ตัวอักษรตัวพิมพ์เล็กแสดงความแตกต่าง
( P < 0.05 ) ในคอลัมน์โดยทดสอบดำเนินการทดสอบ .
เป็น wpd :ทั้งเปลือก ( แห้ง ) ; WPF : ทั้งเปลือก ( สด ) ; 3 : ชั้นด้านในของเปลือก
( แห้ง ) ; 12 : ชั้นด้านในของเปลือก ( สด
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- Preliminary Proceeding
- shades
- from the cradle to the grave
- ตอนนี้เราอยู่ที่
- Preliminary Proceeding
- หมูแดง
- Just tell me the truth so that i can't a
- mixer
- ฉันอยู่สวนจตุจักรคุณอยากได้ของอะไรหรือไม
- Work today or not
- น้ำมันไฮดรอลิค
- in some prokaryotes they are located at
- หลวม
- น้ำขังบนถนน ทำให้ชาวบ้านที่ใช้เส้นทางลำบ
- expression
- Extracts, fractions and residues of Gree
- ฉันรู้สึกได้ว่ามีอะไรที่เปลี่ยนไป ถ้าสมม
- ถ้าคุณยอมรับว่าคุณมัน ฉันจะหายโกรธ
- ประกอบอาชีพ
- صحيح؟
- เมื่อประธานเป็นเอกพจน์บุรุษที่ 3 หลังคำก
- Feel it like a rush, rush, rushBrushing
- He is strike by wood
- contacts
