Materials and MethodsBacterial stra

Materials and MethodsBacterial strains and culture condition Lactobacillus casei (ATCC 39392) and Salmonella Typhimurium LT2 (ATCC 700792) were obtained from the culture collection of the Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tabriz, Tabriz, Iran.The bacteria were maintained in bead containing cryo- tubes at -70 ̊C. Working inoculums of bacteria were prepared by transferring a bead containing bacteria to the brain heart infusion (BHI) agar (Himedia, Mumbai, India) and/or De Mann, Rogosa and Sharp (MRS) agar (Merck, Darmstadt, Germany) slant tubes for S. Typhimurium and L. casei, respectively and incubated at 37 ± 1 ̊C for 24 hr. Prior to the empirical test, the bacteria were reactivated by two subcultures. For first subculture, three or four well-isolated colonies were touched with a sterile wire loop and suspended into 10 mL of Luria-Bertani (LB) broth (Biomark, Pune, India) and MRS broth (Merck, Darmstadt, Germany), for S. Typhimurium and L. casei respectively and incubated at 37 ± 1 ̊C for 24 hr with continuous agitation at 150 rpm. Subsequently, a second subculture was prepared and incubated for 20 hr at 37 ± 1 ̊C as well. Bacterial suspensions adjusted to approximately desired log10 CFU mL−1 by ultraviolet-visible spectrophotometry at 600 nm then by using standard serial 10-fold dilution in buffered peptone water (Merck, Germany) and eventually transferred 10 and 100 μL for drop and spread plating on bismuth sulfite agar (BSA) (Merck, Darmstadt, Germany) and MRS agar, for S.Typhimurium and L. casei, respectively. The drops were absorbed to agar in less than half an hour. After the drops on the agar absorbed, the plates were incubated at inverted positions.2 Enumeration of S. Typhimurium viable cells were done after 17-20 hr at 30 ± 1 ̊C in aerobic incubation andforL.caseiafter48hrat37±1 ̊Cina5%CO2 atmosphere.4 At least 3 to 30 colonies grew from 10 μL of drop and 30 to 300 CFU per 100 μL of SP as a confidence technique were chosen to count by using colony counter Funke-Gerber GMBH, Nr. 2774, Berlin/Munchen (Fig. 1). We averaged the total count of CFU over all at least 3 drops at the countable dilution. Finally, the total count was scaled up and the viable cell counts were expressed as CFU mL-1.5Statistical analysis. For analyses and graphical presentations, Graphpad prism® Software (version 5.04, San Diego, CA, USA) and MINITAB (version 16/2/0, Minitab Inc, State College, Pa, USA) were used. Each dilution was plated in duplicate with four drops per plate. A significant difference was considered as p < 0.05.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการ
แบคทีเรียสายพันธุ์และสภาพวัฒนธรรม Lactobacillus casei (ATCC 39392) และ Salmonella Typhimurium LT2 (ATCC 700792) ที่ได้รับจากคอลเลกชันวัฒนธรรมของภาควิชาพยาธิชีววิทยาคณะสัตวแพทยศาสตร์มหาวิทยาลัย Tabriz, Tabriz อิหร่าน
แบคทีเรียที่ถูกเก็บรักษาไว้ในที่มีลูกปัดหลอด cryo- ที่อุณหภูมิ -70 C หัวเชื้อแบคทีเรียการทำงานของแบคทีเรียที่ได้จัดทำขึ้นโดยการโอนลูกปัดที่มีแบคทีเรียในการแช่หัวใจสมอง (BHI) วุ้น (HIMEDIA, มุมไบ, อินเดีย) และ / หรือเดอแมนน์ Rogosa และชาร์ป (MRS) วุ้น (เมอร์คประเทศเยอรมนี) ท่อเอียง สำหรับเอส Typhimurium และ L. casei ตามลำดับและบ่มที่อุณหภูมิ 37 ± 1 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ก่อนที่จะมีการทดสอบเชิงประจักษ์แบคทีเรียที่ถูกเปิดใช้งานอีกสองวัฒนธรรม สำหรับศักดาแรกสามหรือสี่อาณานิคมดีบางแห่งได้รับการสัมผัสพร้อมห่วงลวดผ่านการฆ่าเชื้อและระงับเป็น 10 มล Luria-Bertani (LB) น้ำซุป (Biomark, ปูน, อินเดีย) และนางน้ำซุป (เมอร์ค, ดาร์มสตัด, เยอรมนี) สำหรับ S. Typhimurium และ L. casei ตามลำดับและบ่มที่อุณหภูมิ 37 ± 1 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงด้วยความปั่นป่วนอย่างต่อเนื่องที่ 150 รอบต่อนาที ต่อจากนั้น ศักดาสองได้รับการเตรียมความพร้อมและบ่มเป็นเวลา 20 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ± 1 C เช่นกัน สารแขวนลอยแบคทีเรียปรับให้ log10 ต้องการประมาณ CFU ML-1 โดย spectrophotometry อัลตราไวโอเลตมองเห็นที่ 600 นาโนเมตรแล้วโดยใช้มาตรฐานแบบอนุกรมเจือจาง 10 เท่าในน้ำเปปโตนบัฟเฟอร์ (เมอร์ค, เยอรมนี) และในที่สุดก็โอน 10 และ 100 ไมโครลิตรที่ลดลงและการแพร่กระจายชุบบน บิสมัทซัลไฟต์วุ้น (BSA) (เมอร์ค, ดาร์มสตัด, เยอรมนี) และ MRS agar สำหรับเอส
Typhimurium และ L. casei ตามลำดับ หยดถูกดูดซึมไปวุ้นในเวลาน้อยกว่าครึ่งชั่วโมง หลังจากที่ลดลงในวุ้นดูดซึมแผ่นที่ถูกบ่มที่แจงนับ positions.2 กลับของเอส Typhimurium เซลล์ที่มีชีวิตได้ทำหลังจาก 17-20 ชั่วโมงวันที่ 30 ± 1 ซีในแอโรบิกการบ่ม andforL.caseiafter48hrat37 ± 1 ̊Cina5% CO2 atmosphere.4 อย่างน้อย 3-30 อาณานิคมเพิ่มขึ้นจาก 10 ไมโครลิตรลดลงและ 30-300 CFU ต่อ 100 ไมโครลิตรของ SP เป็นเทคนิคความเชื่อมั่นได้รับเลือกให้นับโดยใช้อาณานิคมเคาน์เตอร์ Funke Gerber-GmbH, Nr 2774, Berlin / Munchen (รูปที่ 1). เราเฉลี่ยจำนวนรวมของ CFU เหนือทุกอย่างน้อย 3 หยดที่เจือจางนับ สุดท้ายนับรวมเป็นสัดส่วนขึ้นและจำนวนเซลล์ทำงานได้ถูกแสดงเป็น CFU ML-1.5
การวิเคราะห์ทางสถิติ. สำหรับการวิเคราะห์และการนำเสนอกราฟิก GraphPad prism®ซอฟแวร์ (เวอร์ชั่น 5.04, San Diego, CA, USA) และ MINITAB (รุ่น 16/2/0, Minitab Inc, วิทยาลัยรัฐ, PA, สหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้ แต่ละเจือจางถูกชุบซ้ำกับสี่หยดต่อแผ่น ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญได้รับการพิจารณาเป็น p <0.05

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
สายพันธุ์แบคทีเรียและสภาพวัฒนธรรมแลคโตบาซิลลัส (ATCC ๓๙๓๙๒) และเชื้อ LT2 Typhimurium (ATCC ๗๐๐๗๙๒) ได้รับจากการเก็บรวบรวมวัฒนธรรมของกระทรวงพยาธิวิทยา, คณะสัตวแพทย์, มหาวิทยาลัย Tabriz, อิหร่าน.
แบคทีเรียถูกเก็บไว้ในลูกปัดที่มี cryo หลอดที่-๗๐̊C. การทำงานของแบคทีเรียที่ได้รับการจัดเตรียมโดยการถ่ายโอนลูกปัดที่มีแบคทีเรียที่มีการแช่หัวใจสมอง (BHI) agar (Himedia, มุมไบ, อินเดีย) และ/หรือเดอแมนน์, Rogosa และชาร์ป (MRS) (Merck, ประเทศเยอรมนี) ท่อเอียงสำหรับ s. Typhimurium และ l. casei, ตามลำดับและ incubated ที่๓๗±1̊C สำหรับ24ชม. ก่อนที่จะทดสอบเชิงประจักษ์, แบคทีเรียถูกเรียกใช้อีกครั้งโดยสองวัฒนธรรมย่อย. สำหรับวัฒนธรรมย่อยครั้งแรกสามหรือสี่อาณานิคมที่โดดเดี่ยวถูกสัมผัสกับห่วงสายไฟฆ่าเชื้อและแขวนอยู่ใน 10 mL ของ luria-bertani (LB) น้ำซุป (biomark, ปูเน, อินเดีย) และน้ำซุปนาง (Merck, ดาร์มชตัดต์, เยอรมนี), สำหรับ s. typhimurium และ l. กาตามลำดับและ incubated ที่๓๗±1̊C สำหรับ24ชั่วโมงกับความปั่นป่วนอย่างต่อเนื่องที่๑๕๐ rpm. ต่อจากนั้นวัฒนธรรมย่อยที่สองถูกเตรียมและ incubated สำหรับ20ชั่วโมงที่๓๗±1̊C เช่นกัน สารแขวนลอยแบคทีเรียที่ปรับให้เหมาะสมกับ log10 CFU mL-1 โดยรโฟที่มองเห็นได้จากรังสีอัลตราไวโอเลตที่๖๐๐ nm จากนั้นโดยใช้อนุกรมมาตรฐาน10พับเจือจางในน้ำ peptone (Merck, เยอรมนี) และในที่สุดก็ได้รับการถ่ายโอน10และ๑๐๐Μ l สำหรับการลดลงและการแพร่กระจายการชุบใน bismuth ซัลไฟต์.
และ l. casei ตามลำดับ หยดถูกดูดซึมเข้าไปในเวลาน้อยกว่าครึ่งชั่วโมง หลังจากที่หยดในนาการ์ที่ดูดซึม, จานถูก incubated ในตำแหน่งที่กลับกัน. 2 การแจงนับของ S. Typhimurium เซลล์ที่ทำงานได้หลังจาก 17-20 hr ที่30±1̊C ในการบ่มแอโรบิกและ Forl caseiafter48hrat37 ±1̊Cina5% CO2 4 อย่างน้อย3ถึง30อาณานิคมที่เติบโตขึ้นจาก10Μ l ของการลดลงและ30ถึง๓๐๐ CFU ต่อ๑๐๐Μ l ของ SP เป็นเทคนิคความเชื่อมั่นถูกเลือกที่จะนับโดยใช้โคโลนีเคาน์เตอร์ Funke-Gerber GMBH, Nr. ๒๗๗๔, เบอร์ลิน/มึน (รูปที่ 1). เราเฉลี่ยจำนวนรวมของ CFU กว่าทั้งหมดอย่างน้อย3หยดที่เจือจางตาราง. สุดท้ายจำนวนรวมถูกปรับขนาดขึ้นและจำนวนเซลล์ที่ทำงานได้ถูกแสดงเป็น CFU mL-๑.๕
การวิเคราะห์ทางสถิติ สำหรับการวิเคราะห์และการนำเสนอภาพกราฟิก, Graphpad ปริซึม®ซอฟต์แวร์ (รุ่น๕.๐๔, แซนดีเอโก, CA, สหรัฐอเมริกา) และ MINITAB (รุ่น 16/2/0, Minitab Inc, วิทยาลัยรัฐ, Pa, สหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้. เจือจางแต่ละครั้งได้รับการชุบซ้ำกับสี่หยดต่อแผ่น ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญถือว่าเป็น p < ๐.๐๕

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ
สายพันธุ์และเงื่อนไขการเพาะเลี้ยงเชื้อ atcc 39392 ATCC และเชื้อ Salmonella Salmonella สายพันธุ์ที่ได้จากการเพาะเลี้ยงในภาควิชาพยาธิวิทยาและชีววิทยาของโรงเรียนสัตวแพทย์มหาวิทยาลัยอังกฤษ
แบคทีเรียที่ถูกเก็บไว้ในท่อลูกปัดที่มี 78c โดยการถ่ายโอนเชื้อแบคทีเรียที่มีลูกปัดไปยังสมองโดยฮิมีเดียมุมไบอินเดียและเดลแมนหรือเดโกซ่าและชาร์ปมิสเตอร์เพื่อเตรียมวุ้นนมชีส ฟักออกเป็นชั่วโมงภายใต้ 37878c ตามลำดับ ก่อนการทดลองแบคทีเรียที่ถูกเปิดใช้งานโดยสองวัฒนธรรม สำหรับวัฒนธรรมรุ่นแรกสัมผัสสามหรือสี่แยกแบคทีเรียอาณานิคมที่ดีกับแหวนปลอดเชื้อและถูกระงับในหนูไทฟอยด์ Salmonella และชีสนมตามลำดับในมิลลิลิตรของลูเรียเบอร์ตันนีซุปเบอร์เกอร์ปุนอินเดียและ MRS ซุปโดยการผสมอย่างต่อเนื่องในอัตรา แล้ววัฒนธรรมที่สองถูกเตรียมไว้และปลูกภายใต้ 37-1 78c สำหรับชั่วโมง ปรับระงับแบคทีเรียเกี่ยวกับ log10-cfu ML-1 ที่ต้องการโดยวิธียูวี 600-nm แล้วเจือจางด้วยมาตรฐานชุดของบัฟเฟอร์เปปโตนในเมอร์คเยอรมนีและในที่สุดการถ่ายโอนและ 100Mμ l บิสมัทซัลเฟตและหยด วุ้นใช้ S
ไทฟอยด์และโยเกิร์ต ในน้อยกว่าครึ่งชั่วโมงยาถูกดูดซึมโดยวุ้น หลังจากหยดยาในวุ้นถูกดูดซึม แผ่นฟักในตำแหน่งที่ผกผันกับน้ำหนักของออกซิเจนฟักไข่ในเงื่อนไขของ 378sp C และหลังจาก 17-20 ชั่วโมงชีวิตเซลล์ของ Salmonella ไทฟอยด์ถูกนับและเติบโตอย่างน้อยหนึ่งชั่วโมงหลังจากชั่วโมงของ 48-7 ± 1 ± 3785 ในสภาพแวดล้อมที่มีคาร์บอนไดออกไซด์ลดลง ใช้ Coroni เคาน์เตอร์ฟุนเกอร์เกอร์เบอร์เกอร์ GMBH หมายเลข 2774 เบอร์ลินและมิวนิค เราเฉลี่ยอย่างน้อย 3-drop CFU ทั้งหมดในนับเจือจาง สุดท้ายนับรวมจะขยายและนับเซลล์ที่มีชีวิตจะถูกแสดงเป็น cfu-ml-1.5
การวิเคราะห์ทางสถิติ สำหรับการวิเคราะห์และสาธิตกราฟิกรุ่นของกราฟิกซอฟต์แวร์ที่ใช้ในการวิเคราะห์และแสดงให้เห็นถึงโครงสร้างของกระดูกสันหลังและกระดูกสันหลังของกระดูกสันหลัง แต่ละชุบสองสี่หยดต่อจาน มีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ