Materials and Methods
This study was to determine and compare anti-acne-inducing
bacterial activity by broth microdilution method and the content
of a major active component, -mangostin, in mangosteen fruit
rind extracts prepared using different solvents including hexane,
dichloromethane, ethanol and water. Thin-layer chromatographic
(TLC) autobiography for antibacterial activity against P. acnes
and S. epidermidis of each extract was also performed. The extract
with high anti-acne activity should be recommended as the appropriate
extract for further development of antiacne preparation.
Preparation of G. mangostana Fruit Rind Extract Plant
Material
The ripe fruits of G. mangostana were collected from Lang
Suan District, Chumphon Province, in the South of Thailand
in June 2006. The samples were identified by Dr. Wandee Gritsanapan
at the Faculty of Pharmacy, Mahidol University, Bangkok,
Thailand. The voucher specimen (WGM0806) was deposited
at the Department of Pharmacognosy, Faculty of Pharmacy,
Mahidol University, Bangkok, Thailand.
The fresh fruits were cleaned and the edible aril parts were
removed. The fruit rinds were cut into small pieces and dried in
a hot air oven at 50 ° C for 72 h. The dried samples were ground
into powder and passed through a sieve (20 mesh). The powdered
sample was kept in an air-tight container and protected from light
until used.
Extraction of G. mangostana Fruit Rind Extract
Powdered rinds (10 g) were extracted separately with 1,000 ml
of hexane, dichloromethane and 95% ethanol using a Soxhlet apparatus.
Each extract was filtered through a Whatman No. 1 filter
paper. The filtrate was concentrated under reduced pressured at
50 ° C using a rotary vacuum evaporator. To prepare a water extract,
the powdered G. mangostana fruit rind (10 g) was boiled
with 200 ml of water for 1 h and filtered through a Whatman No.
1 filter paper. This method was repeated 5 times for exhaustive
extraction and the filtrates were combined and evaporated on a
boiling water bath. Each extraction was done in triplicate and
yields of the dried extracts were recorded.
Isolation of -Mangostin
-Mangostin was separated from the dichloromethane extract
of G. mangostana fruit rind by column chromatography
eluted with hexane, hexane/ethyl acetate and then ethyl acetate
with increasing polarity. After purification by recrystallization,
-mangostin was identified by comparison of 1 H-NMR spectra
with reference data of -mangostin [18] . The purity of isolated -
mangostin was determined by high-performance liquid chromatography
(HPLC), which was used as a standard compound in this
study.
Anti-Acne-Inducing Bacterial Susceptibility Testing
The test organisms used in this study were P. acnes (ATCC
6919) and S. epidermidis (ATCC 14990), which were obtained
from the American Type Culture Collection, USA. Brain-heart
infusion and tryptic soy broth were purchased from DIFCO (Detroit,
Mich., USA).
P. acnes was incubated in brain-heart infusion for 72 h at 37 ° C
under anaerobic conditions, while S. epidermidis was incubated
in tryptic soy broth for 24 h at 37 ° C, and they were adjusted to
approximately 10 8 CFU/ml.
The minimal inhibitory concentration (MIC) values were determined
by 2-fold serial microdilution assay [17] . The extracts
were incorporated into media to obtain a concentration of serial
dilution from 500 to 0.24 g/ml. A sample of 10 l standardized
วัสดุและวิธีการ
ศึกษานี้คือการ ตรวจสอบ และเปรียบเทียบการป้องกัน-acne-inducing
กิจกรรมแบคทีเรีย โดยวิธี microdilution ซุปและเนื้อหา
ของส่วนงานสำคัญ, - mangostin ในผลไม้มังคุด
สารสกัดแคบที่ใช้แตกต่างกันหรือสารทำละลายเช่นเฮกเซน,
dichloromethane เอทานอลและน้ำ อัตชีวประวัติบางเลเยอร์ chromatographic
(TLC) สำหรับกิจกรรมต้านเชื้อแบคทีเรียกับพี สิว
และ S. epidermidis ของสารสกัดแต่ละยังได้ดำเนินการ สารสกัด
กับกิจกรรมป้องกันสิวสูงควรจะแนะนำเป็นงาน
แยกสำหรับการพัฒนาเพิ่มเติมของ antiacne เตรียม
mangostana เตรียมกรัมผลไม้แคบแยกโรงงาน
วัสดุ
ผลไม้สุกของ mangostana กรัมถูกเก็บรวบรวมจากลัง
อำเภอสวน จังหวัดชุมพร ภาคใต้ของไทย
ใน 2006 มิถุนายน ตัวอย่างที่ระบุ โดยดร.วันดี Gritsanapan
ที่คณะเภสัชศาสตร์ มหาวิทยาลัยมหิดล กรุงเทพมหา นคร,
ไทย ตัวอย่างใบสำคัญ (WGM0806) ถูกฝาก
ที่ภาควิชาเภสัชเวท เภสัชศาสตร์,
มหาวิทยาลัยมหิดล กรุงเทพมหานคร ไทย.
ผลไม้สดได้ถูกล้างไวรัส และถูกส่วนกิน aril
เอา Rinds ผลไม้ตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ และแห้งใน
เตาอบอากาศร้อนที่ 50 ° C สำหรับ 72 h ตัวอย่างแห้งถูกล่าง
เป็นผง และผ่านตะแกรง (ตาข่าย 20) ที่ผง
ตัวอย่างถูกเก็บไว้ในภาชนะที่อากาศแน่น และป้องกันจากแสง
จนใช้
สกัด G. mangostana สารสกัดผลไม้แคบ
rinds ผง (10 g) ถูกแยกต่างหากกับ 1000 ml
ของเฮกเซน dichloromethane และ 95% เอทานอที่ใช้เครื่อง Soxhlet
แยกแต่ละที่กรองผ่านตัวกรอง Whatman No. 1
กระดาษ สารกรองมีความเข้มข้นต่ำกว่าลดให้ที่
50 ° C ใช้ evaporator สิวแบบโรตารี่ เตรียมสกัดจากน้ำ,
แคบผลไม้ของ mangostana ผงกรัม (10 กรัม) ถูกต้ม
ด้วย 200 ml น้ำ 1 h และกรองผ่านหมายเลข Whatman
กระดาษกรอง 1 วิธีนี้ถูกทำซ้ำ 5 ครั้งสำหรับหมดแรง
สกัดและ filtrates ถูกรวม และหายไปในตัว
อ่างน้ำเดือด แยกแต่ละภายใน triplicate และ
บันทึกอัตราผลตอบแทนของสารสกัดแห้ง.
แยก - Mangostin
- Mangostin ถูกแยกออกจากสารสกัด dichloromethane
ของ mangostana กรัมผลไม้แคบโดยคอลัมน์ chromatography
eluted กับโพลี โพลี/เอทิล acetate และเอทิล acetate
กับเพิ่มขั้ว หลังจากฟอกโดย recrystallization,
- mangostin ระบุ โดยเปรียบเทียบของแรมสเป็คตรา H NMR 1
กับข้อมูลอ้างอิงของ - mangostin [18] ความบริสุทธิ์ของแยก-
mangostin ถูกกำหนด โดยประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography
(HPLC) ซึ่งถูกใช้เป็นมาตรฐานผสมในนี้
ศึกษา.
Anti-สิว-Inducing แบคทีเรียภูมิไวรับการทดสอบ
ชีวิตทดสอบที่ใช้ในการศึกษานี้มีพี สิว (ATCC
6919) และ S. epidermidis (ATCC 14990), ซึ่งได้รับ
จากอเมริกาชนิดวัฒนธรรมชุด สหรัฐอเมริกา สมองหัวใจ
ซื้อคอนกรีตและซุปถั่วเหลือง tryptic จาก DIFCO (ดีทรอยต์,
Mich. สหรัฐอเมริกา) .
สิว P. ถูก incubated ในสมองหัวใจคอนกรีตสำหรับ h 72 ที่ 37 ° C
ภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจน ขณะ S. epidermidis ถูก incubated
ในซุปถั่วเหลือง tryptic ใน 24 ชมที่ 37 ° C และพวกเขาได้ปรับปรุง
ประมาณ 10 8 CFU / มล.
ถูกกำหนดค่าความเข้มข้นลิปกลอสไขต่ำสุด (MIC)
โดย 2-fold microdilution ประจำวิเคราะห์ [17] สารสกัด
ถูกรวมเป็นสื่อเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของประจำ
เจือจางจาก 500 ไป 0.24 g/ml ตัวอย่างของมาตรฐาน l 10
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
วัสดุและวิธีการ
การศึกษาครั้งนี้คือเพื่อตรวจสอบและเปรียบเทียบต่อต้านสิวชักนำ
กิจกรรมของแบคทีเรียโดยวิธี microdilution น้ำซุปและเนื้อหา
ขององค์ประกอบที่ใช้งานสำคัญ? -mangostin ในผลมังคุด
สารสกัดเปลือกเตรียมใช้ตัวทำละลายที่แตกต่างกันรวมทั้งเฮกเซน
ไดคลอโรมีเทนเอทานอลและน้ำ โครบางชั้น
(TLC) อัตชีวประวัติสำหรับฤทธิ์ต้านสิวพี
และเอส epidermidis ของสารสกัดแต่ละคนถูกดำเนินการยัง สารสกัด
ที่มีฤทธิ์ต้านการเกิดสิวสูงควรได้รับการแนะนำให้เป็นที่เหมาะสม
ของสารสกัดสำหรับการพัฒนาต่อไปในการจัดทำ antiacne
เตรียม G. mangostana ผลไม้เปลือกสารสกัดจากพืช
วัสดุ
ผลไม้สุกของ G. mangostana ได้ถูกเก็บรวบรวมจาก Lang
สวนจังหวัดชุมพรใน ภาคใต้ของประเทศไทย
ในเดือนมิถุนายนปี 2006 กลุ่มตัวอย่างที่ถูกระบุโดยดรวันดี Gritsanapan
ที่คณะเภสัชศาสตร์มหาวิทยาลัยมหิดล
ประเทศไทย บัตรกำนัลตัวอย่าง (WGM0806) ถูกวาง
ที่ภาควิชาเภสัชเวท, คณะเภสัชศาสตร์
มหาวิทยาลัยมหิดลกรุงเทพฯ
ผลไม้สดทำความสะอาดและชิ้นส่วนยวงกินได้ถูก
ลบออก เปลือกผลไม้ที่ถูกตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ และแห้งใน
เตาอบลมร้อนที่ 50 ° C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง ตัวอย่างอบแห้งมาบด
เป็นผงและผ่านตะแกรง (20 ตาข่าย) ผง
ตัวอย่างถูกเก็บไว้ในภาชนะที่ลมเข้าและมีการป้องกันจากแสง
จนใช้
การสกัด G. mangostana ผลไม้เปลือกสารสกัดจาก
เปลือกผง (10 กรัม) ถูกสกัดแยก 1,000 มิลลิลิตร
ของเฮกเซนไดคลอโรมีเทนและ 95% เอทานอลโดยใช้เครื่องมือวิธีการสกัดแบบ .
สารสกัดจากแต่ละคนได้ผ่านการกรอง Whatman ที่ 1 กรอง
กระดาษ กรองที่เข้มข้นภายใต้แรงกดดันที่ลดลง
50 ° C โดยใช้เครื่องระเหยสูญญากาศแบบหมุน เพื่อเตรียมความพร้อมสารสกัดจากน้ำ,
ผงเปลือกผลไม้ G. mangostana (10 กรัม) ต้ม
กับ 200 ml ของน้ำเป็นเวลา 1 ชั่วโมงและผ่านการกรอง Whatman ที่
1 กระดาษกรอง วิธีการนี้ถูกทำซ้ำ 5 ครั้งสำหรับแรง
สกัดและ filtrates มารวมกันและระเหยใน
อ่างน้ำเดือด สกัดแต่ละคนได้ทำในเพิ่มขึ้นสามเท่าและ
อัตราผลตอบแทนของสารสกัดแห้งที่ถูกบันทึก
แยก? -Mangostin
? -Mangostin ถูกแยกออกจากสารสกัดไดคลอโรมีเทน
ของเปลือกผลไม้ G. mangostana โดยคอลัมน์โครมา
ชะด้วยเฮกเซนเฮกเซน / เอทิลอะซิเตทและอะซิเตทเอทิล
ด้วยการเพิ่มขั้ว หลังจากที่การทำให้บริสุทธิ์โดย recrystallization,
? -mangostin ถูกระบุโดยเปรียบเทียบของ 1 H-NMR สเปกตรัม
ที่มีข้อมูลอ้างอิงของ? -mangostin [18] ความบริสุทธิ์ของเมือง? -
เปลือกมังคุดถูกกำหนดโดยที่มีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography
(HPLC) ซึ่งถูกใช้เป็นสารมาตรฐานใน
การศึกษา
การป้องกันสิว Inducing แบคทีเรียทดสอบความไวต่อ
สิ่งมีชีวิตในการทดสอบที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้มี P. สิว (ATCC
6919) และ S . epidermidis (ATCC 14990) ซึ่งได้รับ
จากประเภทวัฒนธรรมอเมริกันเก็บสหรัฐอเมริกา สมองหัวใจ
และแช่น้ำซุปถั่วเหลือง tryptic ที่ซื้อมาจาก DIFCO (ดีทรอยต์,
มิชิแกน. USA)
P. สิวถูกบ่มในแช่สมองหัวใจเป็นเวลา 72 ชั่วโมงที่ 37 ° C
ภายใต้สภาวะไร้ออกซิเจนในขณะที่เอส epidermidis ถูกบ่ม
ในน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 37 ° C, และพวกเขาก็ปรับ
ประมาณ 10 8 cfu / ml
ความเข้มข้นต่ำสุด (MIC) ค่าถูกกำหนด
โดย 2 เท่าทดสอบ microdilution อนุกรม [17] สารสกัด
ถูกรวมเข้าไปในสื่อที่จะได้รับความเข้มข้นของอนุกรม
การเจือจาง 500-.24? g / ml ตัวอย่างจาก 10? ลิตรที่ได้มาตรฐาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
วัสดุและวิธีการ
เพื่อศึกษา และเปรียบเทียบสิวกระตุ้น
กิจกรรมแบคทีเรียโดยวิธี microdilution broth และเนื้อหา
ใหญ่ของส่วนที่ใช้งาน , - แมงโกสตินในเปลือกผลมังคุดสกัดโดยใช้ตัวทำละลายต่าง ๆเตรียมไว้
รวมถึงเฮกเซน , ไดคลอโรมีเทน , เอทานอลและน้ำ ชั้นบาง ( TLC ) อัตชีวประวัติสำหรับโครม
กิจกรรมต่อต้านแบคทีเรีย Pสิว
S . อาหารของแต่ละแยกก็แสดง สารสกัดจาก
สูงต่อต้านกิจกรรมสิวควรเป็นสารสกัดที่เหมาะสมสำหรับการพัฒนาต่อไปของการเตรียม antiacne
.
การเตรียมกรัมเปลือกผลไม้สารสกัดจากพืชวัสดุเกิด
ผลไม้สุก กรัม เกิดจากการเก็บแลง
สวน อำเภอเมือง จังหวัดชุมพร ในภาคใต้ของประเทศไทย
ในเดือนมิถุนายน 2006จำนวนที่ระบุ โดย ดร. วันดี gritsanapan
คณะเภสัชศาสตร์ มหาวิทยาลัยมหิดล , กรุงเทพ ,
) คูปองตัวอย่าง ( wgm0806 ) ฝาก
ที่ภาควิชาเภสัชเวท คณะเภสัชศาสตร์
มหาวิทยาลัยมหิดล .
ผลไม้สดสะอาดชิ้นส่วนเนื้อกินได้ถูก
ลบออก ผลไม้เปลือกและหั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆและแห้งใน
อากาศร้อนเตาอบที่อุณหภูมิ 50 องศา C เป็นเวลา 72 ชั่วโมงแห้งจำนวนพื้นดิน
เป็นผงและผ่านตะแกรง ( 20 ตาข่าย ) ขาว
ตัวอย่างเก็บไว้ในอากาศแน่นตู้ และป้องกันจากแสง
จนใช้ การสกัดกรัมเปลือกผลไม้สกัดโรค
ผงเปลือก ( 10 กรัม ) ถูกสกัดแยกด้วย 1000 ml
ของเฮกเซน ไดคลอโรมีเทน และ 95% เอทานอล โดยใช้เครื่องมือ
1 .แต่ละแยกถูกกรองผ่าน whatman
1 ไส้กรองกระดาษ นำหนักลดลงกดดันที่ภายใต้ 50 ° C
โดยใช้เครื่องระเหยแบบสุญญากาศ . การเตรียมสารสกัดน้ำผง g
โรคผลไม้เปลือก ( 10 กรัม ) ต้มกับน้ำ 200 มล.
1 H และกรองผ่าน whatman .
1 ไส้กรองกระดาษ วิธีนี้ทำซ้ำ 5 ครั้งหมดแรง
การสกัดและสารละลายถูกรวมและระเหยบน
ต้มน้ำอาบ แต่ละสกัดทั้งสามใบ และปริมาณของสารสกัดแห้ง
ถูกบันทึกแยก - แมงโกสติน
- แมงโกสตินถูกแยกออกจากสิ่งสกัดจากเปลือกผลกรัมเกิด
ตัวอย่างโดยคอลัมน์โครมาโทกราฟี ด้วยเฮกเซน เอทิลอะซิเตท และเฮกเซน เอทิลอะซิเตท /
เพิ่มขั้วหลังจากที่บริสุทธิ์โดยการตกผลึกใหม่
, - แมงโกสตินถูกระบุโดยการเปรียบเทียบกับข้อมูลอ้างอิง
1 ผลิตภัณฑ์ Spectra ของ - แมงโกสติน [ 18 ] ความบริสุทธิ์ของแยก -
แมงโกสตินถูกกำหนดโดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC )
, ซึ่งถูกใช้เป็นสารมาตรฐานในการศึกษานี้
.
สิวกระตุ้นแบคทีเรียทดสอบความไว
การทดสอบสิ่งมีชีวิตที่ใช้ในการศึกษา คือ หน้าสิว ( ATCC
6919 ) และ อาหารและ 14990 ) ซึ่งได้จากชนิดของอเมริกันวัฒนธรรม
ฉีดคอลเลกชัน , USA สมองหัวใจและอาหารซุปถั่วเหลืองถูกซื้อจาก difco ( ดีทรอยต์ ,
ซีแอทเทิล สหรัฐอเมริกา ) .
P . acnes ถูกบ่มใน สมอง หัวใจ แช่นาน 72 ชั่วโมง ที่ 37 ° C
ภายใต้สภาวะไร้อากาศในขณะที่ S อาหารถูกบ่มในซุปถั่วเหลืองอาหาร
24 H ที่ 37 ° Cและพวกเขาปรับให้
8 ประมาณ 10 CFU / ml ความเข้มข้นยับยั้งน้อยที่สุด ( MIC ) โดยพิจารณาถึงค่า
microdilution อนุกรม ) [ 17 ] สารสกัด
ถูกรวมเข้าไปในสื่อเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของอนุกรม
เจือจางจาก 500 ถึง 0.24 กรัม / มล. จำนวน 10 ลิตรมาตรฐาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)